오이류 덩굴마름병균(Didymella bryoniae)의 포자형성에 미치는 배지, 근자외선광과 화광색형광등 12시간 교호조사와 계속암흑처리의 영향을 조사하였다. Didymella bryoniae를 감자한천과 V-8 juice 한천에 배양하였을 때 광선은 병자각 및 자양각의 형성을 촉진하였으나 계속 암흑처리구의 포자형성은 낮았다. 그러나 균주에 따라서는 무광하에서도 병자각과 자양각을 형성할 수 있었다. V-8 juice 한천에 배양했을 때 자양각의 형성은 근자외선 보다는 화광색광선에서 촉진되었다. 일반적으로 광원에 관계없이 V-8 juice 한천에 배양한 것이 감자한천에 배양한 것보다 포자의 형성이 양호하였다. 감자한천에서 배양된 C. bryoniae의 각균주는 병포자의 대부분이 무격막의 소형 병포자였음에 비하여 V-8 juice 한천에 배양한 것은 무격막의 대형 병포자 또는 1개의 격막을 가진 병포자로써 병든 종자의 배축상에 형성된 배포자와 흡사하였다. 자양각의 외관은 병자각과는 판이하였으며 유두상 각공위에 백색의 포자괴가 형성되었다.
Since the leaf inoculation procedures are time-consuming and require considerable growth chamber space, a rapid dioassay method for screening of pathogenicity of Didymella bryoniae, a casual agent of gummy stem blight in watermelon, was established in this paper. The method produced reliable results within 8 days ( 5 days for growing seedlings and 3 days for rapid disease response in the seedlings). After contaminants in the root of 4~5 day-old seedlings had been washed using sterilized water, 5 seedlings were dipped into a vial containing 12 ml of conidial suspension (106 cells/ml). After the vials were placed in a growth chamber (22$^{\circ}C$, RH 50%, 14hr light/10hr darkness) for 3 days, susceptibility and resistance of cultivars were determined by the degree of disease response on cotyledon. The result of obtained by the dip-inoculation method was well coincided with the results by the leaf inoculation procedures and the result that had been observed for several years in the field. Screening of collected watermelon cultivars by the dip-inoculation method revealed that all the 21 domestic cultivars collected were susceptible and only 3 foreign cultivars (PI 189225, PI 482322 and IT 188207) were resistant among 18 cultivars A cucumber cultivar (Marketer) and bitter cucumber were proven to be resistant against the D. bryoniae among 8 other different cucurbits tested. The SDS-PAGE patterns of total proteins from a susceptible (Keumcheon) and a resistant (PI 189225) watermelon cultivars were compared 0, 12, 24 and 36 hrs after inoculation. The amounts of two distinct protein bands (24 kDa and 70 kDa) were gradually increased after inoculation in both cultivars.
자연상태(自然狀態)에서 Didymella bryoniae에 이병(罹病)된 오이 및 호박 종자(種子)를 습지법(濕紙法)으로 처리(處理)하여 불완전(不完全) 세대(世代)와 완전세대(完全世代)의 특징(特徵)을 조사(調査)하고 Difco PDA, V-8쥬스한천(寒天) 및 water agar leaf medium에서의 특징(特徵)과 비교(比較) 하였다. 병든 종자(種子)가 발아(發芽)할 때 종피(種皮)나 배축(胚軸)에 형성(形成)된 Didymella bryoniae의 병포자(柄胞子)와 Difco PDA, V-8 juice한천(寒天) 및 WALM에 형성(形成)된 본균(本菌)의 병포자(柄胞子)는 형태적(形態的)으로 많은 차이(差異)가 나타난다. 즉 PDA에 형성(形成)되는 병포자(柄胞子)는 무색(無色) 소형단포자(小型單胞子)가 대부분이며, V-8 juice한천(寒天) 및 WALM에 형성(形成)되는 것은 대형단포자외(大型單胞子外)에 격막(隔膜)이 하나 있는 포자(胞子)를 형성하고 또 균주(菌株)에 따라서는 격막(隔膜)이 두개 있는 포자(胞子)를 형성하므로써 마치 병든 종피(種皮)나 배축(胚軸)에 형성(形成)된 것과 흡사하였다. 한편 자양각은 병든 종자(種子)의 표본(標本)에 따라 잘 형성(形成)되는 것도 있었으나 대부분(大部分)의 표본(標本)에서는 형성(形成)되지 않았다. 외부형태적(外部形態的)인 특징(特徵)은 색깔이 진한 흑색(黑色)이며 유두상각공(乳頭狀殼孔) 위에 백색(白色)의 포자괴(胞子塊)가 형성(形成)되는 특징(特徵)을 가지고 있어서 쉽게 병자각(柄子殼)과 구별(區別)할 수 있었다. 불완전(不完全) 세대(世代)인 병자각(柄子殼)이나 병포자(柄胞子)와 같이 자양각의 각방(殼房)과 포자(胞子)의 크기에는 큰 변이(變異)가 없었다.
Anti-fungal materials producing bacteria were isolated from soil by bennett's agar and actinomycete isola-tion agar medium. The bacterla were identified as synonym of Actinomycetes. Based on the data obtained from its morphological and colony characteristics. The medium for production of anti-fungal materials was YEME (yeast extract 4 g, malt extract l0g, glucose 4 g, D.W 1ι, pH 7.0${\pm}$0.2). The culture conditions were 30$^{\circ}C$, 7 days and 200 rpm in shaking incubator. No. 13, No. 15 and No.28 strains were produced anti-fungal materials against fungal plant pathogens. Specially, The No. 28 strain showed a powerful biopesticide activity and broad spectrum effects of anti -fungal materials on Collectrichum coccodes, Botrytis cinerea, Cladosporium cucumerinum, Didymella bryoniae.
한국환경보건학회 2004년도 International Conference Global Environmental Problems and their Health Consequences
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pp.165-168
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2004
An anti-fungal material producing actinomycete was isolated from domestic soil. This strain was identified as Streptomyces albogriseus by 16S rDNA sequence. YEME (yeast extract 4g, malt extract 10g, glucose 4g, D.W 1l , pH $7.0{\pm}0.2$) medium was used for production of anti-fungal materials. S. albogriseus was cultured in a shaking incubator for 2 weeks at 150 rpm and $25{\pm}1^{\circ}C$. An anti-fungal material produced by S. albogriseus was identified at 340nm by uv/vis- spectrometer and it showed powerful anti-fungal activity. This is the first report that secondary metabolite produced by S. albogriseus showed an activity against phytopathogenic fungi such as Collectrichum coccodes, Botrytis cinerea, Cladosporium cucumerinum, Didymella bryoniae.
An anti-fungal material produced by actinomycetes was isolated from domestic soil. This actinomycetes was identified as Streptomyces albogriseus by 16S rDNA sequence. YEME (yeast extract 4 g, malt extract 10 g, glucose 4 g, D.W 1l, pH 7.00.2) medium was used for production of anti-fungal materials. S. albogriseus was cultured in a shaking incubator for 2 weeks at 150 rpm and $25^{\circ}C$. An anti-fungal material produced by S. albogriseus was identified at 340 nm by uv/vis- spectrometer and it showed powerful anti-fungal activity. This is the first report that secondary metabolite produced by S. albogriseus showed an activity against phytopathogenic fungi such as Collectrichum coccodes, Botrytis cinerea, Cladosporium cucumerinum, Didymella bryoniae.
The selected five plant growth-promoting rhizobacteria (PGPR) strains, WR8-3 (Pseudomonas fluorescens), WR8-6 (P. putida), WR9-9 (P. fluorescens), WR9-11 (Pseudomonas sp.), and WR9-16 (P. putida) isolated in the rhizosphere of watermelon plants were tested on their growth promotion and control effect against gummy stem rot of watermelon. Strains, WR8-3 and WR9-16 significantly increased stem length of watermelon, and there was a little increase in leaf area, fresh weight and root length when strains, WR8-3, WR9-9 and WR9-16 were treated. Generally, seed treatment was better for plant growth promotion than the soil drench, but there was no significant difference. Seed treatment and soil drench of each bacterial strain also significantly reduced the mean lesion area (MLA) by gummy stem rot, but there was no significant difference between the two treatments. At initial inoculum densities of each strain ranging from 10$^6\;to\;10^{15}$ cfu/g seed, approximately the same level of disease resistance was induced. But resistance induction was not induced at the initial inoculum density of 10$^3$ cfu/g seed. Resistance was induced by treating the strains, WR9-9, WR9-11 and WR9-16, on all of four watermelon varieties tested, and there was no significant difference in the decrease of gummy stem rot among varieties. Populations of the strains treated initially at log 9-10 cfu/g seed, followed with a rapid decrease from planting day to 1 week after planting, but the population density was maintained above log 5.0 cfu/g soil until 4 weeks after planting. Generally no or very weak in vitro antagonism was observed at the strains treated excepting WR9-11. Rifampicin-resistant bacteria which had been inoculated were not detected in the stems or leaves, which suggesting that the bacterium and the pathogens remained spatially separated during the experiment. This is the first report of rsistance induction in watermelon to gummy stem rot by PGPR strains.
핀란드의 Lappeenranta 지역에 위치하는 Saimaa 호수가의 토양시료로부터 분리된 Bacillus sp. KMU-1011를 이용하여 많은 작물에 잿빛 곰팡이병을 유발하는 Botrytis cinerea KACC 40573에 대한 항진균 활성을 위한 배양조건을 조사하였다. 항진균 물질의 생산을 위한 기본배지로 nutrient broth를 사용하였으며 탄소원으로 1.0% glucose와 질소원으로 1.0% polypeptone를 첨가하였을 때 가장 높은 항진균 활성을 나타내었다. 배양조건으로는 $24^{\circ}C$, 180 rpm, 48시간 배양하였을 때 가장 높은 항진균 활성을 나타내었다. Ammonium sulfate를 $30{\sim}60%$ 첨가하여 항진균 물질을 회수하였을 때 가장 양호한 항진균 활성을 나타내었으며, chloroform을 이용하여 배양액 중에 존재하는 항진균 물질을 회수하여 다양한 작물병원성 곰팡이에 대한 spectrum을 조사한 결과, 잿빛곰팡이병, 고추 탄저병, 참외 탄저병, 수박등의 박과작물의 덩굴마름병, 토마토 시들음병, 글라디올러스 마른썩음병, 토마토 질병, 수박 덩굴쪼김병. 수박 질병, 사과나무 역병, 벼 잎집무늬마름병, 참외 줄기썩음병, 그리고 고추 균핵병에 대하여 양호한 항진균 활성을 나타내는 것으로 조사되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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