Al-Douh, Mohammed Hadi;Sahib, Hayder B.;Osman, Hasnah;Hamid, Shafida Abd;Salhimi, Salizawati M.
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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제13권8호
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pp.4075-4079
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2012
Benzimidazoles 1-4 were obtained using modified synthesis methods and studied for their ability to inhibit cell proliferation of colon cancer cell HCT-116 and breast cancer cell MCF-7 using MTT assays. In the HCT-116 cell line, benzimidazole 2 was found to have an $IC_{50}$ value of $16.2{\pm}3.85{\mu}g/mL$ and benzimidazole 1 a value of $28.5{\pm}2.91{\mu}g/mL$, while that for benzimidazole 4 was $24.08{\pm}0.31{\mu}g/mL$. In the MCF-7 cell line, benzimidazole 4 had an $IC_{50}$ value of $8.86{\pm}1.10{\mu}g/mL$, benzimidazole 2 a value of $30.29{\pm}6.39{\mu}g/mL$, and benzimidazole 1 a value of $31.2{\pm}4.49{\mu}g/mL$. Benzimidazole 3 exerted no cytotoxity in either of the cell lines, with $IC_{50}$ values $>50{\mu}g/mL$. The results suggest that benzimidazoles derivatives may have chemotherapeutic potential for treatment of both colon and breast cancers.
Oxidative stress induces apoptosis in many cellular systems including glioblastoma cells, with caspase-8 activation was regarded as a major contribution to $H_2O_2$-induced cell death. This study focused on the role of the autophagic protein p62 in $H_2O_2$-induced apoptosis in U87MG cells. Oxidative stress was applied with $H_2O_2$, and cell apoptosis and viability were measured with use of caspase inhibitors or autophagic mediators or siRNA p62, GFP-p62 and GFP-p62-UBA (del) transfection. We found that $H_2O_2$-induced U87MG cell death was correlated with caspase-8. To understand the role of p62 in MG132-induced cell death, the levels of p62/SQSTM1 or autophagy in U87MG cells were modulated with biochemical or genetic methods. The results showed that the over-expression of wild type p62/SQSTM1 significantly reduced $H_2O_2$ induced cell death, but knockdown of p62 aggravated the process. In addition, inhibition of autophagy promoted p62 and active caspase-8 increasing $H_2O_2$-induced apoptosis while induction of autophagy manifested the opposite effect. We further demonstrated that the function of p62/SQSTM1 required its C-terminus UBA domain to attenuate $H_2O_2$ cytotoxity by inhibition of caspase-8 activity. Our results indicated that p62/SQSTM1 was a potential contributor to mediate caspase-8 activation by autophagy in oxidative stress process.
약 100년 전에 박테리아가 암을 억제한다는 보고를 바탕으로 다양한 미생물이 항암효과를 가지는 백신 개발에 이용되거나 또는 미생물의 세포 밖 독소 단백질을 찾아내고 있다. Psuedomonas aeruginosa exotoxin A(ETA)는 암세포에서 세포성장을 억제하고 세포 죽음을 유발하는 것으로 알려져 있다. 하지만 ETA가 세포 자멸사를 유도하는 정확한 기전은 아직 알려져 있지 않다. 따라서 본 연구에서는 세포자멸사의 유도를 확인하기 위해 K562 cell을 이용하여 세포의 형태학적 변화, 세포독성, Annexin-V binding assay 그리고 세포주기를 분석하였으며, 그 결과로 ETA는 K-562세포에서의 세포증식과 성장을 억제하였고, 세포자멸사 기작을 통한 K-562 암세포의 사멸을 일으켰음을 관찰하였다. 또한 flow cytometric analysis에서는 ETA가 세포주기 중 특히 sub-G1 기를 정지시키는 것으로 나타났다. 본 연구는 ETA가 인간 백혈병 K-562 암세포의 세포성장을 억제하고 sub-G1 기를 정지시킴으로서 세포자멸사를 유도하고 있음을 확인하였다.
The green microalga of the genus Nannochloropsis (class Eustigmatophyceae) is a leading candidate for biofuel production due to its ability to accumulate high oil content (28.7% of cellular ash-free dry weight). We investigated the anti-inflammatory and anticancer activities of sterol-rich fraction from nannochloropsis oculata n-hexane (NOH) extract after saponification of the microalga. Among the fractions with n-hexane, chloroform and ethyl acetate, the n-hexane fraction showed the highest anti-inflammatory activity in LPS-stimulated RAW 264.7 macrophage as well as anticancer activity against human leukemia HL-60 cells without the cytotoxity. And the sterol-rich fraction was obtained from the n-hexane fraction by open silica column under the gradient solvent condition with 100% hexane (1L), hexane : ethyl acetate (20 : 1, 10 : 1, 5 : 1, 1 : 1, v/v). Among the four fractions (NOH-1~4), especially NOH-1 contained the highest content of sterols. NOH1 showed the highest HL-60 (about 85%) and NO inhibitory activities at the concentration of $100{\mu}g/mL$. These results demonstrated that the sterol-rich fraction from N. oculata might be a useful candidate as anti-inflammatory and anticancer agents for anti-inflammatory and anticancer activity.
본 연구의 목적은 발광 다이오드 (LED)을 인간 피부 각질 세포에 조사 시 콜라겐, 프로 콜라겐의 증식 발현을 조사하기 위해 실시되었었다. LED 조사 시 안전하게 인간의 피부에 적용할 수 있는지 여부를 결정하기 위해, LED 조사의 증식 효과는 인간 표피 각질세포에서 MTS 분석으로 결정하였다. 470nm의 파장 조사는 세포 독성 없이 mRNA의 콜라겐의 발현, 프로 콜라겐을 증가시켰으며, 이 결과는 470nm LED 조사가 피부각질세포 증식 효과와 콜라겐 합성에 영향을 미칠 수 있음을 시사한다. 또한 LED 조사시 독성 효과는 인간 피부 섬유 아세포 (HDF)에서 MTS 분석으로 결정 한 결과 세포 증식에 독성을 나타내지 않았다. 470nm LED 조사시 시험 관내 콜라겐 합성 활동을 증가시킴으로 피부미용 및 융복합적인 부분에 활용할 수 있는 기초 자료로 활용이 가능하다고 사료된다.
Objectives : The purpose of this research was physiological activities and investigate cytotoxicity of Sunbanghwalmyung-um extract. Methods : Physiological activity and a cytotoxicity were examined through the hot water and ethanol extracts from Sunbanghwalmyung-um and its ingredient. Results : The electron donating ability(EDA) was 66.9%, 71.3% in 1000 ppm water extract and ethanol extract. Above 90% from 1000 ppm ethanol extract showed a higher activities and it is Rhei Radix et Rhizoma, Lonicerae Flos, Gleditsiae Spina, Glycyrrhizae Radix, Myrrh. SOD-like activity was weak as 12.24%, 16.62% in 700 ppm. In water and ethanol extracts cytotoxicity were against G361, B16F10, MDA, A549, high cytotoxity over 70%. Rhei Radix et Rhizoma, Gleditsiae Spina, Trichosanthis Radix, Paeoniae Radix Rubra showed high cytotoxicity in water and ethanol extracts. Conclusions : We observed physiological activities and investigated cytotoxicity of Sunbanghwalmyung-um and its ingredients. The results also demonstrated in food or cosmetic industry.
The properties of ideal retrograde filling materials include the ability to seal the root canal system in three dimensions and well tolerated by periradicular tissues. Biocompatibility testing has been done mainly with cytotoxicity tests using cell culture. Little attention has been paid to the potential adverse influence on the inflammatory and immune reaction in the periapical tissue. The purpose of this study was to investigate the effects of retrograde filling materials on human mononuclear cells in vitro. Freshly mixed and set specimens from six materials (Z100, Tetric Ceram, Fuji II, Fuji II LC, F2000, Compoglass Flow, and ZOE) were eluated with cell culture medium for 24 hours. Cytotoxic effects of these extracts were evaluated by determining cell viability and enzyme activity using MTT and lactate dehydrogenase (LD). The production of inflammatoy bone resorptive cytokine, TNF-${\alpha}$ was measured from human peripheral blood mononuclear cells (PBMC) exposed to the extracts by means of Endogen Human TNF-${\alpha}$ ELISA kit (Wobrun, MA, U.S.A.). Eluates and diluted (1 : 10) eluates with cell culture medium from freshly mixed Fuji IT had cytotoxic effects on mononuclear cells using MTT and LD. However, eluates from set Fuji II were not cytotoxic. Eluates form set ZOE exhibited cytotoxicity with LD test. TNF-${\alpha}$ levels were high in eluates from freshly mixed Fuji II and Z100. Diluted eluates from freshly mixed Z100 and F2000 stimulated the production of TNF-${\alpha}$. However, there were no significant difference in TNF-${\alpha}$ levels compared to controls. These results indicate that some materials could possibly stimulate bone resorption in the periapical tissue by means of the production of bone resorptive cytokine.
본 연구에서는 울금의 선호도 및 이용율을 높이기 위해 Aspergillus oryzae를 이용하여 발효시킨 후 용매별 추출을 통하여 얻은 발효 울금 추출물들을 사용하여 면역조절 효과를 살펴보았다. MTT assay를 이용하여 실온 추출물 $200{\mu}g/mL$, 열수 추출물 $400{\mu}g/mL$, 20% 주정 추출물 $200{\mu}g/mL$, 80% 주정 추출물 $100{\mu}g/mL$의 농도가 적정하다고 판단되어 추후 실험에 사용하도록 하였다. 면역조절 효과를 보고자 대식세포의 탐식작용 능력, nitric oxide(NO), TNF-${\alpha}$ 생성, NK 세포 활성, SC-1 세포에서 발현되는 LP-BM5 virus의 LP-BM5 eco 유전자 발현을 측정하였다. NK 세포의 활성을 측정한 결과 NK 세포는 YAC-1 세포에 대한 cytotoxity를 관찰했을 때 20% 주정 추출물이 가장 활성을 나타내는 것으로 확인하였다. 발효 울금 추출물 중 열수 추출물과 20% 주정 추출물은 대식세포를 활성화시킴으로써 탐식능력을 증가시켰다. NO 생성을 관찰했을 때 발효 울금처리에 의해 활성화된 대식세포는 효과를 나타내지 않았으나 80% 주정 추출물을 제외한 추출물에서 TNF-${\alpha}$ 생성을 정상군에 비해 유의적으로 증가시켰다. SC-1 세포에 있는 LP-BM5 eco 유전자 발현을 비교하여 바이러스 복제 억제능을 측정한 결과 모든 추출물이 유의적으로 억제되었으며, 특히 20% 주정 추출물이 가장 많이 억제하고 있는 것을 확인할 수 있다. 이러한 연구 결과로부터 발효 울금이 면역조절 효과를 가진 천연 기능성 소재로 개발에 있어 기초자료로 활용할 수 있을 것으로 기대할 수 있다.
일부 malignant tumor에 Pt-complex의 일상 응용 과정에서 신장독성등의 심한 부작용이 문제점으로 지적되고 있다. 이 연구에서는 기존의 cisplatin보다 항암효과는 우수하면서, 부작용을 감소시킨 새로운 Pt-complex의 개발에 역점을 두었다. 본 연구에서 합성한 Pt(Ⅱ) complex는 carrier ligand로서 1,2-diaminocyclohexane(dach)을 사용하였고, leaving group으로는 diophosphine류인 1,2-bisdiphenylphosphinoethane(DPPE)을 도입하였으며, 물에 대한 용해도를 높이기 위해 dinitrate로 만들었다. 새로이 합성한 [Pt(Ⅱ)(trans-d-dach)(DPPE)]$(NO_3)_2$는 원소 분석, IR 및 $^{13}C-NMR$ 분석 data에 의하여 위의 물질임이 확인되었다. MTT assay method에 의한 항암활성 연구를 통하여 P-388, L-1210 lymphocytic leukemia cell과 SK-OV3 난소암세포에서 항암효과가 인정되었으며, 이 항암효과는 대조 약물로 사용된 cisplatin과 유사하였다. 토끼의 신세뇨관 세포와 인체의 신피질 세포를 이용한 cytotoxity 및 thymidine 섭취율과 인체 신피질 조직 배양을 이용한 glucose consumption 실험을 통하여 모두 cisplatin보다 신장독성이 현저히 감소되었다. 이상의 결과로 보아 Pt(Ⅱ)complexes는 carrier ligand와 leaving group의 선택에 따라 항암활성의 증가와 신독성의 감소를 일으키는 요인으로 보여지며, 이 연구에서 만들어진 Pt(Ⅱ)complex는 앞으로 다각적인 검토를 거쳐 새로운 항암화학요법제로 개발될 가능성이 있을 것으로 생각된다.
This study was carried out to evaluate cytotoxic effects of Poncirus trifoliata Raf. extract on lymphocytic leukemia tumor (L1210) cell lines. Disruptions in cell organelles were determined by 3-(4,5-dimethyl thiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazoliumbromide (MTT) assay The comparison of Ic50 Values of Poncirus trifoliata Raf. extract in L1210 cell lines showed that their susceptibility to these fractons decreased in the following order: adriamycin > Fr.4> Fr. 6> Fr. 5> Fr. 3> Fr. 1> Fr. 2 by the MTT assay. In order to develop an antumicrobial agent, Poncirus trifoliata Raf. was extracted wit ethanol, and then it was fractionated with several mobile phase. The antitumor activities of fractions of the ethanol soluble extract was investigated. The minimal inhibitory concentrations (MIC) of fractions of the ethanol soluble extract of Poncirus trifoliata Raf. against microorganisms were also examined. Antimicrobial activities of ampicillin and ketoconazole as references were compared to those of fractions of the ethanol soluble extract of Poncirus trifoliata Raf. The antimicrobial activities of all fractions from the extract had growth inhibition activities against gram-positive bacteria, gram-negative bacteria and fungi $(MIC\;>\;200{\mu}g/ml)$. These results suggest that fraction 4 of the ethanol soluble extract of Poncirus trifoliata Raf. possessed the most antitumorous agent.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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