Fluorescent in situ hybridization (FISH) with rRNA-targeted oligonucleotide probes was used to compare the community structures of free-living and aggregated bacteria at thawing period in Lake Baikal. Targeted groups were Eubacteria, $\alpha$-, $\beta$-, $\gamma$- proteobacteria groups, Cytophaga-Flavobacterium group and Planctomycetales. Total bacterial numbers of free-living bacteria were ranged from $0.2{\times}10^6\cells{\cdot}ml^-1$ to $3.2{\times}10^6\cells{\cdot}ml^-1$, which were decreasing with depth, while the aggregated bacterial numbers were dramatically increasing from $0.4{\times}10^4 to 3.3{\times}10^4 \cells{\cdot}ml^-1$ with depth. The ratios of EUB probe binding cells to DAPI counts were ranged from 52.3 to 74.1% in free-living bacteria, and from 39.6 to 66.7% in the aggregated bacteria, respectively. Community structures of the aggregated bacteria were very different from each free-living bacteria at every depth. At 25 m depth, where the chlorophyll a concentration was highest, both structures were quite different from those of surface layers, rendering the fact that the community structures might be affected by phytoplankton. The vertical profile of community structure of aggregated bacteria is particular. The proportion of $\beta$-proteobacteria group was increasing with depth and it was 51.8% at 100 m, but the dominant group was $\gamma$-pro-teobacteria group at 250 m. Taken together, the biodiversity and succession of aggregated bacteria are quite different from free-living bacteria.
We isolated and cultured bacteria that inhabited marine biofilms, and identified them by phylogenetic analysis using 16S rDNA sequences. In the marine environment, biofilms cover most subtidal and intertidal solid surfaces such as rocks, ships, loops, marine animals, and algae. The bacteria in most biofilms are embedded in extracellular polymeric substances that comprise mainly of exopolysaccharides. The exopolysaccharides are excreted from multiple bacterial species; therefore, biofilms are a good source for screening exopolysaccharide-producing bacteria. Thirty-one strains were cultured, and a total of 17 unique strains were identified. Phylogenetic analysis using 16S rDNA sequences indicated that the 17 strains belonged to ${\alpha}$-Proteobacteria (Ochrobactrum anthropi, Paracoccus carotinifaciens); ${\gamma}$-Proteobacteria (Pseudoalteromonas agarovorans, P. piscicida, Pseudomonas aeruginosa, Shewanella baltica, Vibrio parahaemolyticus, V. pomeroyi); CFB group bacteria (Cytophaga latercula, Tenacibaculum mesophilum); high GC, Gram-positive bacteria (Arthrobacter nicotianae, Brevibacterium casei, B. epidermidis, Tsukamurella inchonensis); and low GC, Gram-positive bacteria (Bacillus macroides, Staphylococcus haemolyticus, S. warneri).
We isolated and cultured bacteria inhabiting solar saltern ponds in Taean-Gun, Chungnam Province, Korea. All of the isolated 64 strains were found to be moderately halophilic bacteria, growing in a salt range of 2-20 %, with an optimal concentration of 5% salt. Bacterial diversity among the isolated halophiles was evaluated via RFLP analyses of PCR-amplified 16S rDNAs, followed by phylogenetic analysis of the partial 16S rDNA sequences. The combination of restriction enzyme digestions with HaeIII, CfoI, MspI and RsaI generated 54 distinct patterns. A neighbor-joining tree of the partial 16S rDNA sequences resulted in the division of the 64 strains into 2 major groups, 45 strains of ${\gamma}-Proteobacteria$ (70.3%) and 19 strains of Firmicutes (29.7%). The ${\alpha}-Proteobacteria$ and Cytophaga-Flavobacterium-Bacterioides groups, which were repeatedly found to exist in thalassohaline environments, were not represented in our isolates. The ${\gamma}-Proteobacteria$ group consisted of several subgroups of the Vibrionaceae (37.5%), Pseudoalteromonadaceae (10.9%), Halomonadaceae (7.8%), Alteromonadaceae (7.8%), and Idiomarinaceae (6.3%). Members of Salinivibrio costicola (29.7%) were the most predominant species among all of the isolates, followed by Halobacillus treperi (12.5%). Additionally, three new species candidates were found, based on similarities of the 16S rDNA sequences to those of previously published species.
Ahn, Tae-Seok;Hong, Sung-Hee;Kim, Dong-Joo;Suck, Jung-Hyun;Valentin V. Drucker
Journal of Microbiology
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v.37
no.1
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pp.10-13
/
1999
The bacterial abundance, proportion of respiring bacteria, and bacterial community of southern Lake Baikal were analyzed at 1 m and 400m depths during winter. The total bacterial numbers were 5.1${\times}$105 cells ml-1 at 1 m and 2.5${\times}$105 cells ml-1 at 400 m depth, which are about half and quarter of the numbers of other lakes. The proportion of respiring bacteria was as low as 2.5% at 1 m and 1.4% at 400 m depth. Considering the amount of organic carbon which need to be degraded and low proportion of respiring bacteria, the bacteria could be assumed to have high activities. The EUB/DAPI ratios were 77 and 89% at 1 m and 400 m depths, respectively. Of the bacterial community, the other group was dominant at both depths, and gamma group of protebacteria followed next. But the beta group of proteobacteria and Cytophaga-Flavobacterium groups occupied very small proportions.
We studied the diversity of the halophilic archaea and bacteria in crystallizer ponds of a Korean solar saltern by analyzing 16S rRNA gene libraries. Although diverse halophilic archaeal lineages were detected, the majority (56%) were affiliated with the uncultured and cultured Halorubrum group. Halophilic archaea that have been frequently observed in solar saltern environments previously, such as Halogeometricum, Halococcus, Haloarcula, and Haloferax, were not detected in our samples. The majority of clones (53%) belonged to the Cytophaga-Flavobacterium-Bacteroides and ${\alpha}-,\;{\gamma}-,\;and\;{\delta}-Proteobacteria$ groups, with 47% of the clones being affiliated with ${\gamma}-Proteobacteria$. We also identified new ${\delta}-Proteobacteria$-related bacteria that have not been observed in hypersaline environments previously. Our data show that the diversity of the halophilic archaea and bacteria in our Korean saltern differs from that of solar salterns found in other geographic locations. We also showed by quantitative real-time PCR analysis that bacteria can form a significant component of the microbial community in solar salterns.
Kim Ok-Sun;Yoo Jae-Jun;Lee Dong-Hun;Ahn Tae-Seok;Song Hong-Gyu
Journal of Microbiology
/
v.42
no.4
/
pp.278-284
/
2004
Changes in the soil bacterial community of a coniferous forest were analyzed to assess microbial responses to wildfire. Soil samples were collected from three different depths in lightly and severely burned areas, as well as a nearby unburned control area. Direct bacterial counts ranged from $3.322.6\times10^8\;cells/(g{\cdot}soil).$ In surface soil, direct bacterial counts of unburned soil exhibited a great degree of fluctuation. Those in lightly burned soil changed less, but no significant variation was observed in the severely burned soil. The fluctuations of direct bacterial count were less in the middle and deep soil layers. The structure of the bacterial community was analyzed via the fluorescent in situ hybridization method. The number of bacteria detected with the eubacteria-targeted probe out of the direct bacterial count varied from $30.3\;to\;84.7\%,$ and these ratios were generally higher in the burned soils than in the unburned control soils. In the surface unburned soil, the ratios of $\alpha,\;\beta\;and\;gamma-proteobacteria,$ Cytophaga-Flavobacterium group, and other eubacteria groups to total eubacteria were 9.9, 10.6, 15.5, 9.0, and $55.0\%,$ respectively, and these ratios were relatively stable. The ratios of $\alpha,\;\beta\;and\;gamma-proteobacteria,$ and Cytophaga-Flavobacterium group to total eubacteria increased immediately after the wildfire, and the other eubacterial proportions decreased in the surface and middle layer soils. By way of contrast, the composition of the 5 groups of eubacteria in the subsurface soil exhibited no significant fluctuations during the entire period. The total bacterial population and bacterial community structure disturbed by wildfire soon began to recover, and original levels seemed to be restored 3 months after the wildfire.
The bacterial community structures at 2 sponge species belonging to the genus Baikalospongia and Lubomirskia in Lake Baikal were analyzed with fluorescent in situ hybridization (FISH) method. The total bacterial numbers in the genus Baikalospongia ranged from $7.2{\times}10^{7}\;to\;4.2{\times}10^{8}\;cells/ml$, and those in Lubomirskia from $1.2{\times}10^{8}\;to\;1.6{\times}10^{8}\;cells/ml$, while those of lake water were from $2.3{\times}7.7{\times}10^{5}\;cells/ml$. Total bacterial numbers in the sponges were $10^{3}-10^{4}$ times higher than those of lake water. In the genera Baikalospongia and Lubomirskia, the proportions of other unidentified bacterial groups to the Bacteria were 42.0-60.3% and 40.7-51.9%, respectively. These proportions were similar to those in lake water (22.6-46.3%). These results suggest that bacterial compositions in Lake Baikal water and sponges are highly unique.
The endosymbionts of 4 strains of Acanthamoeba(KA/E9, KA/E21, KA/E22, and KA/E23) isolated from the infected corneas of Korean patients were characterized via orcein stain, transmission electron microscopic examination, and 16S rDNA sequence analysis. Double membrane-bound, rod-shaped endosymbionts were distributed randomly throughout both the trophozoites and cysts of each of Acanthamoeba isolates. The endosymbionts of KA/E9, KA/E22, and KA/E23 were surrounded by electron-translucent areas. No lacunae-like structures were observed in the endosymbionts of KA/E21, the bacterial cell walls of which were studded with host ribosomes. Comparative analyses of the 16S rDNA sequences showed that the endosymbionts of KA/E9, KA/E22 and KA/E23 were closely related to Caedibacter caryophilus, whereas the KA/E21 endosymbiont was assigned to the Cytophaga-Flavobacterium-Bacteroides(CFB) phylum. In the 4 strains of Acanthamoeba, the hosts of the endosymbionts were identified as belonging to the Acanthamoeba castellanii complex, which corresponds to the T4 genotype. Acanthamoeba KA/E21 evidenced characteristics almost identical to those of KA/E6, with the exception of the existence of endosymbionts. The discovery of these endosymbionts from Acanthamoeba may prove essential to future studies focusing on interactions between the endosymbionts and the amoebic hosts.
A culture-independent molecular phylogenetic survey was carried out on the bacterial community in cold-seep sediment at Edison Seamount, south of Lihir Island, Papua New Guinea. Small-subunit rRNA genes were amplified directly from the sediment DNA by PCR and cloned. The majority of the cloned 16S rRNA gene sequences were most closely related to as-yet-uncultivated microorganisms found in deep-sea sediments, and were primarily affiliated with one of four groups: the $\gamma$-, $\delta$-, and $\epsilon$-subdivisions of Proteobacteria, and Cytophaga-Flavobacterium-Bacteroides. We did not recover any sequences related to cyanobacteria, prochlorophytes, and $\alpha$-Proteobacteria, which are known to occur in great abundance within the surface mixed layer of the Atlantic and Pacific Oceans. The majority of the cloned $\gamma$-and $\epsilon$-Proteobacterial sequences were closely related to chemoautotrophic sulfur-oxidizing symbionts of marine benthic fauna, and the $\delta$-Proteobacterial sequences to sulfate- and sulfur-reducing bacteria, indicating that they might play an important role in chemoautotrophic primary production and the sulfur cycle in the cold-seep area. There results demonstrate the high diversity of the bacterial community in the cold-seep sediment, and substantially expand knowledge of the extent of bacterial diversity in this formidable and unique habitat.
CHO WONSIL;LEE EUN-HEE;SHIM EUN-HWA;KIM JAISOO;RYU HEE WOOK;CHO KYUNG-SUK
Journal of Microbiology and Biotechnology
/
v.15
no.5
/
pp.952-964
/
2005
The diesel-degrading activities of biofilms sampled from petroleum-contaminated groundwaters in urban subway drainage systems were examined in liquid cultures, and the microbial populations of the biofilms were characterized by denaturing gel gradient electrophoresis (DGGE) and 16S rDNA sequence analysis. Biofilm samples derived from two sites (19 K and 20 K) at subway Station N and Station I could degrade around $80\%$ of applied diesel within 20 and 40 days, respectively, at $15^{\circ}C$, and these results were strongly correlated with the growth patterns of the biofilms. The closest phylogenetic neighbor of a dominant component in the 19 K biofilm was Thiothrix fructosivorans strain Q ($100\%$ similarity). Four dominant strains in the 20 K biofilm were closely related to Thiothrix fructosivorans strain Q ($100\%$ similarity), Thiothrix sp. CC-5 ($100\%$ similarity), Sphaerotilus sp. IF14 ($99\%$ similarity), and Cytophaga-Flexibacter-Bacterioides (CFB) group bacterium RW262 ($98\%$ similarity). Three dominant members in the Station I biofilms were very similar to uncultured Cytophagales clone CRE-PA82 ($91\%$ similarity), Pseudomonas sp. WDL5 ($97\%$ similarity), and uncultured CFB group bacterium LCK-64 ($94\%$ similarity). The microbial components of the biofilms differed depending on the sampling site. This is the first report on the isolation of clones highly similar to Thiothrix fructosivorans and Thiothrix sp. from biofilms in petroleum-polluted groundwaters, and the first evidence that these organisms may play major roles in petroleum degradation and/or biofilm-development.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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