Kim, Jin-Woo;Kim, Sung-Won;Kim, Gyoo-Cheon;Kim, Yong-Deok;Kim, Cheol-Hun;Kim, Bok-Joo;Kim, Uk-Kyu
Maxillofacial Plastic and Reconstructive Surgery
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제33권4호
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pp.301-307
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2011
Purpose: If the tooth structure is damaged, then it is impossible to regenerate the tooth. The materials used to restore the tooth structure are not related to the composition of the tooth. The materials used to restore the structure can't replace the natural tooth because they just fill the defective structure. Calcium phosphate cement remineralizes the dentin and almost replaces the natural tooth, but there are some disadvantages. We conducted basic tests with Biomimetic CPC (Bio-CPC) to make sure of the possibility of the biomaterial to remineralize the defective tooth structure. Methods: In this study, the bioactivity and biocompatibility of Bio-CPC were evaluated for its potential value as the bio-material for regeneration of damaged tooth structure by conducting a cell toxicity assay (WST-1 assay), a cytokinesis-block micronucleus assay, a chromosomal aberration test, total RNA extraction and RT-PCR on MDPC-23 mouse odontoblast-like cells. Results: The in vitro cytotoxicity test showed that the Bio-CPC was fairly cytocompatible for the MDPC-23 mouse odontoblast-like cells. Conclusion: Bio-CPC has a possibility to be a new biomaterial and further study of Bio-CPC is needed.
Ding, Xiangming;Yu, Wenbo;Liu, Ming;Shen, Suqin;Chen, Fang;Wan, Bo;Yu, Long
BMB Reports
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제40권6호
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pp.973-978
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2007
Septins are a family of conserved cytoskeletal GTPase forming heteropolymeric filamentous structure in interphase cells, however, the mechanism of assembly are largely unknown. Here we described the characterization of SEPT12, sharing closest homology to SEPT3 and SEPT9. It was revealed that subcelluar localization of SEPT12 varied at interphase and mitotic phase. While SEPT12 formed filamentous structures at interphase, it was localized to the central spindle and to midbody during anaphase and cytokinesis, respectively. In addition, we found that SEPT12 can interact with SEPT6 in vitro and in vivo, and this interaction was independent of the coiled coil domain of SEPT6. Further, co-expression of SEPT12 altered the filamentous structure of SEPT6 in Hela cells. Therefore, our result showed that the interaction between different septins may affect the septin filament structure.
Background: The STK15 gene located on chromosome 20q13.2 encodes a centrosome-associated kinase critical for regulated chromosome segregation and cytokinesis. Recent studies have demonstrated STK15 to be significantly associated with many tumors, with aberrant expression obseved in many human malignancies. The purpose of this study was to investigate expression of STK15 in esophageal squamous cell carcinomas (ESCCs) in a Mongolian population. Methods: Two non-synonymous single nucleotide polymorphisms in the coding region of STK15, rs2273535 (Phe31Ile) and rs1047972 (Val57Ile) were assessed in 380 ESCC patients and 380 healthy controls. We also detected STK15 mRNA expression in 39 esophageal squamous cell carcinomas and corresponding adjacent tissues by real time PCR. Results: rs2273535 showed a significant association with ESCC in our Mongolian population (rs227353, P allele = 0.0447, OR (95%CI) = 1.259 (1.005~1.578)). Real time PCR analysis of ESCC tissues showed that expression of STK15 mRNA in cancer tissues was higher than in normal tissues (p = 0.013). Conclusions: Our study showed that functional SNPs in the STK15 gene are associated with ESCC in a Mongolian population and up-regulation of STK15 mRNAoccurs in ESCC tumors compared adjacent normal tissues. STK15 may thus have an important role in the prognosis of ESCC and be a potential therapeutic target.
Mitochondrial distribution and abundance were assessed during the growth of apical and subapical cells in the red algae Colaconema caespitosum (J. Agardh) Jackelman, Stegenga and Bolton and Antithamnion cruciatum (C. Agardh) Nägeli after staining with 3,3’-dihexyloxacarbocyanine iodide [DiOC6(3)] and 2,4’-dimethylaminostyryl-Nethylpyridinium iodide (DASPEI). In fully elongate apical cells of C. caespitosum there were 100-120 mitochondria. During apical cell enlargement and division there is a doubling and then halving of the mitochondrial numbers. Apical cells prior to cytokinesis in young filaments are smaller than in mature filaments (ca. 50 and 100 μm long, respectively) and have fewer mitochondria (ca. 100 and 120 mitochondria per cell, respectively). In older vegetative cells mitochondria tend to aggregate at opposite ends of the cells with some mitochondria associated with the central nucleus or at points of apparent branch initiation. There is a greater density of mitochondria in apical cells of smaller versus larger plants (one mitochondrion per 6.3 μm3 and 9.8 μm3, respectively), suggesting that apical cells of younger plants may be more metabolically active. Male and female gametophytic thalli of Antithamnion cruciatum had similar numbers of mitochondria in apical cells of indeterminate axes, as did gametophytic and sporophytic thalli. There were about 40-50 mitochondria in fully elongated apical cells with about half this number in newly divided apical and subapical cells. Apical cells of determinate branches had more mitochondria (60-77) than indeterminate branches (60-70 vs. 40-50). In both species and in all cell types mitochondrial numbers were highly correlated with cell size.
Vanillic acid, a vegetable phenolic compound, is a strong antioxidant. The aim of the present study was to determine its effects on mitomycin C-induced DNA damage in human blood lymphocyte cultures in vitro, both alone and in combination with mitomycin C (MMC). The cytokinesis block micronucleus test and alkaline comet assay were used to determine genotoxic damage and anti-genotoxic effects of vanillic acid at the DNA and chromosome levels. MMC induced genotoxicity at a dose of $0.25{\mu}g/ml$. Vanillic acid ($1{\mu}g/ml$) significantly reduced both the rates of DNA damaged cells and the frequency of micronucleated cells. A high dose of vanillic acid ($2{\mu}g/ml$) itself had genotoxic effects on DNA. In addition, both test systems showed similar results when tested with the negative control, consisting of dimethyl sulfoxide (DMSO) in combination with vanillic acid ($1{\mu}g/ml$)+MMC. In conclusion, vanillic acid could prevent oxidative damage to DNA and chromosomes when used at an appropriately low dose.
Background: Our objective was to evaluate the MTHFR C677T-A1298C polymorphisms in patients with breast cancer and in individuals with no history of cancer, to compare the levels of genetic damage and apoptosis under folic acid (FA) deficiency between patients and controls, and to assess associations with breast cancer. Methods: Genetic damage was marked by micronucleated binucleated cells (MNBN) and apoptosis was estimated by cytokinesis-block micronucleus assay (CBMN). PCR-RFLP molecular analysis was carried out. Results: The results showed significant associations between the MTHFR 677TT or the combined MTHFR C677T-A1298C and breast cancer risk (OR = 2.51, CI = 0.85 to 7.37, p = 0.08; OR = 4.11, CI = 0.78 to 21.8, p < 0.001). The MNBN from the combined MTHFR C677T-A1298C was higher and the apoptosis was lower than that of the single variants (p < 0.05). At 15 to 60 nmol/L FA, the MNBN in cases with the TTAC genotype was higher than controls (p < 0.05), whereas no significant difference in apoptosis was found between the cases and controls after excluding the genetic background. Conclusions: Associations between the combined MTHFR C677T-A1298C polymorphism and breast cancer are possible from this study. A dose of 120 nmol/L FA could enhance apoptosis in cases with MTHFR C677T-A1298C. Breast cancer individuals with the TTAC genotype may be more sensitive to the genotoxic effects of FA deficiency than controls.
Mammalian polo-like kinase 1 (Plk1) acts at various stages in early and late mitosis. Plk1 localizes at the centrosome and maintains this position through mitosis. Thereafter Plk1 moves to the kinetochore and midbody region, important sites during chromosome separation and cytokinesis. The catalytic domain of Plk1 is in the N-terminus region, whereas the non-catalytic region in the C-terminus of Plk1 has a conserved motif, named the Polobox. This motif is critical for Plk localization. EGFP proteins fused with the N-terminus and C-terminus of Plk1 localize in the nucleus and centrosomes, respectively. The core sequences of the polo-box (50 amino acids) also localize in Plk1 target organelles. To screen for domain-specific target proteins of Plk1, we constructed an N-terminal domain and a tandem repeat polo-box motif, and used them as templates in a yeast two-hybrid screen. The HeLa cell cDNA library indicated several proteins including the centrosome/kinetochore components or regulators, to be characterized as positive clones. Through in vitro protein binding analyses, we confirmed an interaction between these proteins and Plk1. The data reported from this study indicate that the N- and C- termini of Plk1 may function through recruitment and/or activation of domain-specific target proteins in dividing cells. Additionally, tandem repeats of the conserved core motif of the polo-box are sufficient for targeting and may be useful as a centrosome/kinetochore-specific targeting peptide.
Initial subcellular responses in susceptible (PI 274420) and resistant (cv. Hartwig) soybeans infected with the soybean cyst nematode (SCN) were examined 2 and 4 days after inoculation (DAI). Subcellular features common to both soybeans at 2 DAI included hypertrophied initial syncytial cells (ISCs) and syncytium-component cells (SCs) with a dense cytoplasm containing proliferated rough and smooth endoplasmic reticulum (RER and SER), a hypertrophied nucleolus, and reduced vacuoles, suggesting that the nematode-infected cells were dedifferentiated. In the resistant soybean, a striking initial subcellular difference from the susceptible soybean was the dilation of the RER, indicating ER dysfunction and leading to cell death. This disturbed nematode feeding, as evidenced by disrupted feeding tubes. In PI 274420, the ISC cytoplasm was depleted, with the exception of ER membranes, at 4 DAI, while the SC cytoplasm was dense with proliferation of starch-containing plastids around multiple nuclei that might be derived from the congregation of nuclei in the neighboring SCs and in part by nuclear division without cytokinesis. In cv. Hartwig, syncytia were necrotized with secondary cell wall thickening outside the plasma membrane and an extremely dense cytoplasm containing a nucleus with an electron-lucent nucleolus, accompanied by the proliferation of closely stacked parallel RER and ribosomes. These results suggest that syncytia develop continuously in PI 274420 to produce and store nutritional substances in SCs, providing for the nematode through ISC until maturation, but in cv. Hartwig, syncytia degenerate early due to excessive metabolism, blocking nematode feeding and cytoplasmic connections with adjacent intact cells.
Rapid production of nitric oxide (NO) and reactive oxygen species (ROS) has been implicated in the regulation of innate immunity in plants. A potato calcium-dependent protein kinase (StCDPK5) activates an NADPH oxidase StRBOHA to D by direct phosphorylation of N-terminal regions, and heterologous expression of StCDPK5 and StRBOHs in Nicotiana benthamiana results in oxidative burst. The transgenic potato plants that carry a constitutively active StCDPK5 driven by a pathogen-inducible promoter of the potato showed high resistance to late blight pathogen Phytophthora infestans accompanied by HR-like cell death and $H_2O_2$ accumulation in the attacked cells. In contrast, these plants showed high susceptibility to early blight necrotrophic pathogen Alternaria solani, suggesting that oxidative burst confers high resistance to biotrophic pathogen, but high susceptibility to necrotrophic pathogen. NO and ROS synergistically function in defense responses. Two MAPK cascades, MEK2-SIPK and cytokinesis-related MEK1-NTF6, are involved in the induction of NbRBOHB gene in N. benthamiana. On the other hand, NO burst is regulated by the MEK2-SIPK cascade. Conditional activation of SIPK in potato plants induces oxidative and NO bursts, and confers resistance to both biotrophic and necrotrophic pathogens, indicating the plants may have obtained during evolution the signaling pathway which regulates both NO and ROS production to adapt to wide-spectrum pathogens.
Unreduced (2n) gametes are meiotic products (pollen or egg) having a sporophytic (somatic) chromosome number, resulting from abnormalities during either microsporogenesis or megasporogenesis. They occur naturally at a low frequency in many plant species. Unreduced (2n) gametes in plants can be identified for four possible ways as follow i) pollen size and/or shape differences between haploid (n) and diploid (2n) pollen, ii) ploidy analysis (chromosome number) of progeny or meiotic analysis (presence of dyads andlor triads at the microspore stage), iii) progeny performance and fertility and iv) dosage of isozyme and DNA markers. Unreduced (2n) gametes can be an effective breeding tool in synthesizing new cultivars, providing a unique method to maximizing heterozygosity, i.e., transferring a large proportion of the non-additive genetic effects (intra- and inter- locus interactions) h m parent to offspring and can also be used to overcome infertility of interploidy crosses. Sexual polyploidization through 2n gametes has been a major route to the formation of naturally occurring polyploids. The three mechanisms of 2n pollen formation in potato have been discovered as follow: i) parallel spindles (ps) or tripolar spindles (ts), ii) premature cytokinesis (pc-I, pc-2) and iii) synaptic mutants (sy-2, sy-3, sy-4). Genetic analysis indicated that the mechanisms of 2n gamete formation were controlled by single recessive gene in potato, alfalfa, red clover, etc., and by two recessive genes in wheat. The use of 2n gametes which can efficiently transfer germplasm fiom wild relatives to cultivated species, especially fiom diploid to tetraploid could make a contribution to the improvement of germplasm base in breeding programs.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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