Tae Jin Kim;Min Jae Kim;Yun Ji Kang;Ji Yeon Yoo;Jeong Hwan Kim
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.33
no.3
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pp.371-377
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2023
In this study, a pepA gene encoding glutamyl (aspartyl)-specific aminopeptidase (PepA; E.C. 3.4.11.7) was cloned from Tetragenococcus halophilus CY54. The translated PepA from T. halophilus CY54 showed very low similarities with PepAs from Lactobacillus and Lactococcus genera. The pepA from T. halophilus CY54 was overexpressed in E. coli BL21(DE3) using pET26b(+). The recombinant PepA was purified by using an Ni- NTA column. The size of the recombinant PepA was 39.13 kDa as determined by SDS-PAGE, while its optimum pH and temperature were pH 5.0 and 60℃, respectively. In addition, the PepA was completely inactivated by 1 mM EDTA, indicating its metallopeptidase nature. The Km and Vmax of the PepA were 0.98 ± 0.006 mM and 0.1 ± 0.002 mM/min, respectively, when Glu-pNA was used as the substrate. This is the first report on PepA from Tetragenococcus species.
The concentration of phenolics in Phellinus pini (CY001) extracts, expressed as mg of GAEs per g of P. pini fractions, and the EtOAc fraction (436.5 mg GAEs/g) of P. pini had a higher phenolic content than other fractions. Several biochemical assays were used to screen antioxidant properties such as reducing power, 2, 2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging capacity, NBT/XO superoxide system and inhibition of DCF/AAPH peroxyl radicals. Among the six mushroom extracts, the EtOAc fraction from P. pini (CY001) showed the most potent DPPH radical, superoxide radical, and peroxyl radical scavenging activities, with $IC_{50}$ values of $11.49\;{\mu}g/ml$, $8.32\;{\mu}g/ml$, and $1.91\;{\mu}g/ml$, respectively. The EtOAc fraction of P. pini (CY001) significantly inhibited enzymatic lipid peroxidation and effectively attenuated LPS-induced NO production of RAW 264.7 cells without cytotoxicity. We also found that the EtOAc fraction had a significant hepato-protectant effect on tacrine-induced cytotoxicity in HepG2 cells. These findings suggest that P. pini (CY001) may have potential as a natural antioxidant, which contains compound(s) with radical scavenging activity.
Creeping bentgrass (Agrostis palustrics Huds.) is cool season turfgrasse that is used for putting green in golf course. Creeping bentgrass cultivars are difficult to distinguish with the same species because of similar morphological characters and low level of genetic diversity. The SCAR markers using the specific DNA can be useful for differentiating between creeping bentgrass cultivars. Five RAPD primers were used for specific band detection among creeping bentgrass cultivars, penncross, penn A-4, crenshaw, L-93, CY-2, T-1. The pairs of SCAR primers for six cultivers were designed by the specific sequences of the bands that amplified by RAPD. Three of the six SCAR primers could not make the use as SCAR primers because the specific false bands were detected in all cultivars. The remaining pairs of SCAR primer, CY850F/R, T700F/R, L2900F/R, amplified the specific band at expected size for three cultivars, CY-2, T-1, L-93, respectively. The CY850F/R primer amplified a band of 850bp in CY-2 cultivar, the T700F/R primer amplified a band of 700bp in T-1 cultivar, and the L2900F/R primer amplified a band of 2.9kb in L-93 cultivar. In this study we developed the SCAR markers to identify and distinguish the inerseeded creeping bentgrass cultivars in a golf course green.
Objectives: This study is a practice based research conducted to investigate the effectiveness and safety of a 5-day short-term diet program ('Oil-rescue' program) designed to reduce the adverse events and initial dropout rate in obesity treatment. Methods: We retrospectively analyzed 4 Korean medicine clinic patient data who completed 'Oil-rescue' program which is consisting of Gambi-hwan, Bium-hwan, Butgiban-hwan and Jayoon Kyungokgo. The weight change before and after participating 'Oil-rescue' program was primary outcome of our study. Changes in body mass index, body fat mass, skeletal muscle mass, body water content, lean body mass, protein, and minerals were also measured. Results: A total of 35 patients who satisfied the eligible criteria were finally included. The body weight decreased from 69.45±11.86 kg to 67.43±11.58 kg, a total of 2.02±1.03 kg (P<0.001). Body fat mass decreased from 25.77±7.45 kg to 24.98±7.26 kg, a total of 0.78±1.21 kg (P<0.001). Body mass index decreased from 26.39±3.64 kg/㎡ to 25.64±3.49 kg/㎡, a total of 0.75±0.41 kg/㎡. (P<0.001). A total of 15 patients had side effects such as diarrhea, abdominal pain, and insomnia, but all were mild. 16 out of 35 people switched to long-term obesity treatment programs. Conclusions: Through this retrospective practice based research, it was found that the 'Oil-rescue' program effectively reduced body weight, body fat, and body mass index, and the other obesity related parameters. It was a relatively safe and effective short-term obesity treatment program.
Abdel-Fattah, Y.R.;Enshasy, H. El;Anwar, M.;Omar, H.;Abolmagd, E.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.17
no.12
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pp.1930-1936
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2007
A sequential optimization strategy based on statistical experimental designs was employed to enhance the production of cyclosporin A (CyA) by Tolypocladium inflatum DSMZ 915 in a submerged culture. A 2-level Plackett-Burman design was used to screen the bioprocess parameters significantly influencing CyA production. Among the 11 variables tested, sucrose, ammonium sulfate, and soluble starch were selected, owing to their significant positive effect on CyA production. A response surface methodology (RSM) involving a 3-level Box-Behnken design was adopted to acquire the best process conditions. Thus, a polynomial model was created to correlate the relationship between the three variables and the CyA yield, and the optimal combination of the major media constituents for cyclosporin A production, evaluated using the nonlinear optimization algorithm of EXCEL-Solver, was as follows (g/l): sucrose, 20; starch, 20; and ammonium sulfate, 10. The predicted optimum CyA yield was 113 mg/l, which was 2-fold the amount obtained with the basal medium. Experimental verification of the predicted model resulted in a CyA yield of 110 mg/l, representing 97% of the theoretically calculated yield.
Cyclosporin A (CyA) produced by Tolypocladium inflatum is a promising drug owing to its immunosuppressive and antifungal activities. From an industrial point of view, the necessity to obtain a suitable and economic medium for higher production of CyA was the aim of this work. The present study evaluated the effect of different fermentation parameters in solid state fermentation, such as selection of solid substrate, hydrolysis of substrates, initial moisture content, supplementation of salts, additional carbon, and nitrogen sources, as well as the inoculum age and size, on production of CyA by Tolypocladium inflatum MTCC 557. The fermentation was carried out at $25{\pm}2^{\circ}C$ for 9 days. A combination of hydrolyzed wheat bran flour and coconut oil cake (1:1) at 70% initial moisture content supported a maximum production of $3,872{\pm}156\;mg$ CyA/kg substrate as compared with $792{\pm}33\;mg/kg$ substrate before optimization. Furthermore, supplementation of salts, glycerol (1% w/w), and ammonium sulfate (1% w/w) increased the production of CyA to $5,454{\pm}75\;mg/kg$ substrate. Inoculation of 5 g of solid substrate with 6 ml of 72-h-old seed culture resulted in a maximum production of $6,480{\pm}95\;mg$ CyA/kg substrate.
Orchids have been propagated vegetatively for a long time without adequate control measures against virus diseases in Korea. As a result, it is presumed that most of the orchid varieties in Korea may have been degenerated. Nevertheless there has been little work on the virus diseases of orchids in Korea. Therefore studies were initiated to isolate an4 characterize the orchid viruses occurring in Korea. The results obtained are summerized as follows. 1. Symptoms of virus diseases on orchid varieties can be grouped 1) mosaic, 2) necrotic streak with mosaic, 3) ring necrosis, 4) chlorotkc ring and 5) necrotic spot. 2. A total of 102 orchid plants representing 4 genera were investigated on the occurrence of Cymbidium mosaic virus and tobacco mosaic virus by serological agar-gel double diffusion test. The test revealed that approximately $45\%$ of the orchids were infected with Cymbidium mosaic virus. None of the plants were found to be infected with tobacco mosaic virus. 3. Local lesions appeared on the inoculated leaves of Chenopodium amaranticolor Cassia occidentalis and Datura stramonium 7-12 days after mechanical inoculation with Cymbidium mosaic virus. 4. Physical properties of the Cymbidium mosaic virus determined by inoculation on Chenopodium amaranticolor were as follows: Thermal inactivation Point; $75-80^{\circ}C$, dilution end Point; $10^{-5}-10^{-6}\%$ aging in vitro; 8 days. 5. Three different buffers at pH 7.0 and pH 9.0 were compared for the efficiency of agar-gel double diffusion test with Cymbidium mosaic virus. Phosphate, imidazol and tris buffer at pH 7.0 gave equally satisfactory results. 6. Electron microscopic examination of the Cymbidium mosaic virus revealed rod shaped particles measuring 460-580mu.
Field experiments were conducted to evaluate the morphological characteristics and growth rates of 101 medium-leaf type zoysiagrasses (Zoysia spp.) collected at the major sod production area (Jang Seong Gun) in South Korea. Collected lines with distinctive morphology and visual growth rate were planted in plastic pots and measured morphological characteristics under the plastic house conditions. Variation of leaf width, plant height, leaf angle, length of leaf sheath, trichome, stolon length, and color were measured. Six lines were selected by evaluating growth rates from one hundred one collected lines. Eight standard cultivars and three other superior lines previously collected were compared to 7 selected lines form Jang seong area by checking growth rates and morphological characteristics. Average leaf blade width was 3.4 mm, leaf angle was 45.8 degree, plant height was 21.6 cm, height of lowest leaf was 5.0 cm, and length of leaf blade was 14.1 cm. Ground cover rates of selected lines 'CY6097' and 'CY6069' were 70% and 68.3%, respectively. These are believed to be faster than 60% ground cover rate of zoysiagrass 'Anyang', and also, twice as faster than the 31.7% ground cover rate of Z. matrella. Selected line 'CY6069' showed fast growth rate with shorter internode length (5.1 cm) compared to zoysiagrass 'Anyang'. Based on the results of this study, we could select useful fast growing zoysiagrass breeding lines from the major sod production area (Jang Seong Gun) in Korea.
Choi, Heung-Kook;Ntziachristos, Vasilis;Weissleder, Ralph
Proceedings of the KSMRM Conference
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2004.09a
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pp.23-32
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2004
The chemotherapy sensitive Lewis lung carcinoma (LLC) and chemotherapy resistant Lewis lung carcinoma (CR-LLC) tumors concurrently implanted in mice, and compare these findings with histological macroscopic observations against 3D reconstruction of Fluorescence Molecular Tomography (FMT) preformed in vivo on the same animals. For the 3D image reconstruction we used 32 laser source images, a flat image and 3D surface rendering that confused for 3D Fluorescence Molecular Imaging (FMI). A minimum of ten tissue sections were analyzed per tumor for quantification of the TUNEL-positive cells, cell-associated Cy5.5-Annexin and vessel-associated Alexa Fluor-Lectin. These are useful apoptosis and angiogenesis markers, and they serve as validation experiments to data obtained in vivousing a Cy5.5-Annexin V conjugate injected intravenously in chemotherapy-treated animals carrying the tumors studied histologically. We detected higher levels of apoptosis and corresponding higher levels of Cy5.5 fluorescence in the LLC vs. the CR-LLC tumors according to tissue depth and these findings confirm that in vivo staining with the Cy5.5-Annexing conjugate correlates well with in vitro TUNEL staining and is consistent with the higher apoptotic index expected from the LLC line. There appeared to be 1.38% more apoptosis for LLC than CR-LLC. Consequently there is good correlation between the histology results and in vivo fluorescence-mediated optical imaging. In conclusion the apoptotic images of 3D FMI were validated by microscopic histological image analysis. This is a significant result for the continuous progress of fluorescence 3D imaging research.
The electron transfer reactions between cis-[Co(en)2(NO2)2]+ and rac-[Co(Y)]2-(Y=EDTA, PDTA, CyDTA) have been investigated in the presence of hydrogen ion. From the kinetic data, it has been found that electron transfer reactions between cis-[Co(en)2(NO2)2]+ and rac-[Co(Y)]2- proceed via inner-sphere pathway by catalysis of hydogen ion. The stereoselectivity in the electron transfer reactions between optically active △-cis-[Co(en)2(NO2)2]+ and rac-[Co(Y)]2- produced 6.0, 2.9, 3.0% e.e.(e.e.=enantiomeric excess) of △-[Co(EDTA)]-, △-[Co(PDTA)]- and △-[Co(CyDTA)]-, respectively. Based upon this observation, it seems that △-cis-[Co(en)2(NO2)2]+ is associated with rac-[Co(Y)]2- at first, and followed by the electron transfer reaction. Therefore, it was suggested that stereoselective electron transfer reaction between △-cis-[Co(en)2(NO2)2]+ and rac-[Co(Y)]2- proceed through both inner-sphere by the proton catalysis and outer-sphere with ionic association.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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