Aerobic cells are normally protected from the damage of free radicals by antioxidative on , zymes such as superoxide dismutase (SOD), catalase, glutathione (GSH) peroxidase, GSH S- transferase and GSH reductase which scavenge free radicals as well as nonenzymatic antioxidants such as ceruloplasmin, albumin and nonprotein-SH including GSH. The effects of each component (ginsenoside $Rb_1$, $Rb_2$, Rc, Rd, Re, $Rb_1$, Rf, $Rh_1$ and $Rh_2$) of red ginseng on the antioxidative enzyme activities were investigated in the liver in order to screen antioxidative components of red ginseng. Ginsenoside $Rb_1$ and Rc showed a tendency to increase GSH peroxidase activity, while ginsenoside Rc significantly decreased Cu,Zn-SOD activity. Especially, ginsenoside $Rh_2$ significantly increased catalase activity. These results suggest that ginsenoside $Rh_2$ is an important active component among total saponins of red ginseng.
The hot water and mathanol extracts of Artemisia argyi showed considerable cytotoxicities against H9(ATCC HTB 176) cancer cell with IC50 values of $48.6{\;}\mu\textrm{g}/ml$ and $51.9{\;}\mu\textrm{g}/ml$, respectively. These cytotoxicities were found to be dependent on the extract concentrations and culture days. CuZnSOD and MnSOD activities were significantly increased in the cytoplasm and mitochondria fractions of cancer cell, and media in the presence of Artemisia argyi. Such enhanced SOD activities were generally in the range of two to threefolds. In contrast to SOD, catalase and glutathione peroxidase activities were not detected at all. These results suggest that Artemisia argyi have generated $O_2^-$ in the mitochondria and cytoplasm of H9 cancer cell with concurrent induction of CuZnSOD and MnSOD in situ, which dismutate $O_2^-{\}to{\;}H_2O_2$. Without coordinated actions of catalase and/or glutathione peroxidase $H_2O_2$ is easily converted to very toxic OH and these reactive oxygen species together might have induced necrosis and/or apoptosis of H9 cell.
Purpose: The purpose of this study was to examine the effects of Cu/Zn SOD on reduction of hindlimb muscular atrophy induced by cisplatin in rats. Methods: Forty-two rats were assigned to three groups; control group, Cisplatin (CDDP) group and cisplatin with Cu/Zn SOD (CDDP-SOD) group. At day 35 hindlimb muscles were dissected. Food intake, activity, withdrawal threshold, muscle weight, and Type I, II fiber cross-sectional area (CSA) of dissected muscles were measured. Relative SOD activity and expression of MHC and phosphorylated Akt, ERK were measured after dissection. Results: Muscle weight and Type I, II fiber CSA of hindlimb muscles in the CDDP group were significantly less than the control group. Muscle weight and Type I, II fiber CSA of hindlimb muscles, food intake, activity, and withdrawal thresholds of the CDDP-SOD group were significantly greater than the CDDP group. There were no significant differences in relative SOD activities of hindlimb muscles between the CDDP-SOD and CDDP groups. MHC expression and phosphorylated Akt, ERK of hindlimb muscles in the CDDP-SOD group were significantly greater than the CDDP group. Conclusion: Cu/Zn SOD attenuates hindlimb muscular atrophy induced by cisplatin through increased food intake and activity. Increment of phosphorylated Akt, ERK may relate to attenuation of hindlimb muscular atrophy.
Linuron is a pesticide with a weak anti-androgenic property, which impacts male reproductive organs. In this study, to clarify whether linuron affects the cellular antioxidant system of ventral prostate, gene expression patterns of the representative antioxidant enzymes such as glutathione peroxidase (GPx), selenoprotein P (SePP), and superoxide dismutase (SOD) were investigated in the rat ventral prostates exposed to linuron using real-time RT-PCR analyses. Sprague-Dawley rats castrated at 6 weeks old were treated with linuron (25, 50, or 100 mg/kg per oral) daily for 10 days after testosterone propionate administration (0.4 mg/kg) subcutaneously. As compared to normal control animals, mRNA levels of phospholipid hydroperoxide GPx (PHGPx), SePP, and Mn SOD significantly increased in the prostates exposed to linuron (25, 50, and 100 mg/kg). However, cytosolic GPx (100 mg/kg) and Cu/Zn SOD (25, 50, and 100 mg/kg) mRNA levels significantly decreased in the ventral prostates. These results indicate that linuron upregulates the expressions of PHGPx, SePP, and Mn SOD mRNAs, but down-regulates the expressions of cytosolic GPx and Cu/Zn SOD in rat prostates, suggesting that linuron may have dual effects in the cellular antioxidant system of prostate.
Sung, Kyung Yong;Jung, Myunghwan;Shin, Min-Kyoung;Park, Hyun-Eui;Lee, Jin Ju;Kim, Suk;Yoo, Han Sang
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제24권6호
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pp.854-861
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2014
The diagnosis of Brucella abortus is mainly based on serological methods using antibody against LPS, which has diagnostic problems. Therefore, to solve this problem, we evaluated two proteins of B. abortus, Cu/Zn superoxide dismutase (SodC) and outer membrane proteins 2b porin (Omp2b). The genes were cloned and expressed in a pMAL system, and the recombinant proteins, rOmp2b and rSodC, were purified as fusion forms with maltose-binding protein. The identity of the proteins was confirmed by SDS-PAGE and Western blot analysis with sera of mice infected with B. abortus. Production of cytokines and nitric oxide (NO) was investigated in RAW 264.7 cells and mouse splenocytes after stimulation with the proteins. Moreover, cellular and humoral immune responses were investigated in BALB/c mice after immunization with the proteins. TNF-${\alpha}$, IL-6, and NO were significantly inducible in RAW 264.7 cells. Splenocytes of naive mice produced IFN-${\gamma}$ and IL-4 significantly by stimulation. Moreover, number of IgG, IFN-${\gamma}$, and IL-4 producing cells were increased in immunized mice with the two proteins. Production of IgG and IgM with rOmp2b was higher than those with rSodC in immunized mice. These results suggest that the two recombinant proteins of B. abortus may be potential LPS-free proteins for diagnosis.
Gene structure of copper/zinc-superoxide dismutase (Cu/Zn-SOD; sod1) was characterized in Hemibarbus mylodon (Teleostei; Cypriniformes), an endangered freshwater fish species in Korean peninsula. Full-length cDNA of H. mylodon SOD1 consisted of a 796-bp open reading frame sequence encoding 154 amino acids, and the deduced polypeptide sequence shared high sequence homology with other orthologs, particularly with regard to metal-coordinating ligands. Genomic structure of the H. mylodon sod1 gene (hmsod1; 1,911 bp from the ATG start codon to the stop codon) was typical quinquepartite (i.e., five exons interrupted by four introns); the lengths of the exons were similar among species belonging to various taxonomic positions. The molecular phylogeny inferred from sod1 genes in the teleost lineage was in accordance with the conventional taxonomic assumptions. 5'-flanking upstream region of hmsod1, obtained using the genome walking method, contained typical TATA and CAAT boxes. It also showed various transcription factor binding motifs that may be potentially involved in stress/immune response (e.g., sites for activating proteins or nuclear factor kappa B) or metabolism of xenobiotic compounds (e.g., xenobiotic response element; XRE). The hmsod1 transcripts were ubiquitously detected among tissues, with the liver and spleen showing the highest and lowest expression, respectively. An experimental challenge with Edwardsiella tarda revealed significant upregulation of the hmsod1 in kidney (4.3-fold) and spleen (3.1-fold), based on a real-time RT-PCR assay. Information on the molecular characteristics of this key antioxidant enzyme gene could be a useful basis for a biomarker-based assay to understand cellular stresses in this endangered fish species.
Park Nam Sook;Lee Kwang Sik;Lee Sang Mong;Je Yeon Ho;Park Eunju;Sohn Hung Dae;Jin Byung Rae
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제10권1호
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pp.35-43
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2005
We describe here the complete nucleotide sequence and the exon-intron structure of the Cu,Zn superoxide dismutase (SOD1) gene of Paecilomyces tenuipes and Paecilomyces sp. The SOD1 gene of P. tenuipes spans 966 bp, and consisted of three introns and four exons coding for 154 amino acid residues. Three unambiguous introns in P. tenuipes separate exons of 13, 332, 97, and 20 bp, all exhibiting exon sizes identical to Cordyceps militaris SOD1 gene. The SOD1 gene of Paecilomyces sp. contains 946 bp and consisted of four introns and five exons coding for 154 amino acid residues. Five exons of Paecilomyces sp. SOD1 are composed of 13, 180, 152, 97, and 20 bp. Interestingly, this result showed that the total length of exons 2 (180 bp) and 3 (152 bp) of Paecilomyces sp. SOD1 is same to exon 2 length (332 bp) of C. militaris SOD1 and P. tenuipes SOD1. The deduced amino acid sequence of the P. tenuipes SOD1 showed $95\%$ identity to C. militaris SOD1 and $78\%$ to Paecilomyces sp. SOD1. Phylogenetic analysis confirmed that the C. militaris SOD1, P. tenuipes SOD1 and Paecilomyces sp. SOD1 are placed together within the ascomycetes group of fungal clade.
Superoxide dismutase (SOD), an antioxidant enzyme catalyzing the first step for scavenging the reactive oxygen species is important as an early warning indicator to address various biological stresses. For this reason, the monitoring the expressed pattern of SOD gene in fish organs is one of important biomarkers to assess the aquatic pollution caused by many toxic chemicals. Based on the Northern blot hybridization, semi-quantitative and/or realtime RT-PCRs, the alteration of SOD gene transcripts in shark liver was examined during the experimental acute exposures to cadmium. The expression of SOD at mRNA level was up-regulated both by injection (0, 0.5, 1 or 2 mg $CdCl_2/kg$ body weight for 48 hours) and by immersion (0 or $5{\mu}M$ Cd for 0, 1, 4 and 7 days) treatments of cadmium. The transcriptional stimulation of shark SOD gene by cadmium exposure was dependent upon doses and durations: there was a trend toward more increase in higher dose and longer durations of exposure. The hepatic SOD mRNA levels showed also a general agreement with the tissue cadmium concentrations accumulated in immersion exposure. This result may provide useful strategy to develop a fine molecular biomarker at mRNA level for detecting aquatic pollution caused by toxic metals.
The water and methanol extracts of Artemisia argyi showed significant cytotoxicities against J774A.1 cells but not so much against normal leukocytes. The cytotoxicities were found to be dependent on the extract concentration and the incubation time. The concentration of water and methanol extracts inhibiting 50% of cell proliferation ($IC_{50}$) were estimated to be 44.2 mg/ml and 71.6 mg/ml, respectively. In the presence of Artemisia argyi water extract, total superoxide dismutase (CuZnSOD and MnSOD) activities of media, cytoplasmic and mitochondrial fractions of J774A.1 cells increased in accordance with cytotoxicity. MnSOD was found to be the main component of enhanced total SOD activities, particulary in the mitochondrial fraction. In contrast to SOD, catalase and glutathione peroxidase (GPx) were not found in any instance of the current investigation. In addition, substantial amount of $O_2^-$ appeared to be generated in the mitochondrial fraction under the influence of Artemisia argyi. All data put together, it is postulated that Artemisia argyi extracts seem to stimulate $O_2^-$ generation in mitochondria of J774A.1 cells with concomitant increases of SODs. Since $H_2O_2$, the reaction product of SOD on $O_2^-$, is known to be readily converted to very toxic $OH{\cdot}$ in the absence of catalase and/or GPx cooperation, toxicity derived from ROS such as $O_2^-$, $H_2O_2$, and $OH{\cdot}$ may be the main cause of necrosis and/or apoptosis of J774A.1 cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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