• 제목/요약/키워드: Creatine Kinase

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Overexpression, Purification, and Preliminary X-ray Crystallographic Analysis of Human Brain-Type Creatine Kinase

  • Bong, Seung-Min;Moon, Jin-Ho;Jang, Eun-Hyuk;Lee, Ki-Seog;Chi, Young-Min
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제18권2호
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    • pp.295-298
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    • 2008
  • Creatine kinase (CK; E.C. 2.7.3.2) is an important enzyme that catalyzes the reversible transfer of a phosphoryl group from ATP to creatine in energy homeostasis. The brain-type cytosolic isoform of creatine kinase (BB-CK), which is found mainly in the brain and retina, is a key enzyme in brain energy metabolism, because high-energy phosphates are transfered through the creatine kinase/phosphocreatine shuttle system. The recombinant human BB-CK protein was overexpressed as a soluble form in Escherichia coli and crystallized at $22^{\circ}C$ using PEG 4000 as a precipitant. Native X-ray diffraction data were collected to $2.2{\AA}$ resolution using synchrotron radiation. The crystals belonged to the tetragonal space group $P4_32_12$, with cell parameters of a=b=97.963, $c=164.312{\AA},\;and\;{\alpha}={\beta}={\gamma}=90^{\circ}$. The asymmetric unit contained two molecules of CK, giving a crystal volume per protein mass $(V_m)$ of $1.80{\AA}^3\;Da^{-1}$ and a solvent content of 31.6%.

진도견의 creatine kinase 활성치와 isoenzyme (Creatine Kinase and its Isoenzymes in Jindo Dogs)

  • 최석화
    • 한국임상수의학회지
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    • 제15권1호
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    • pp.41-45
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    • 1998
  • This study was performed to investigate the serum creative kinase(CK) activity and CK isoenzyme in Jindo dog. Serum CK activity and CK-isoenzyme were analyzed in 53 Jindo dogs of both sexes. The mean value and normal range of serum CK activity were 24.1 lu/$\ell$ and 7-91 lu/$\ell$, respectively, in 29 female dogs, 24.8 lu/$\ell$ and 8-89 lu/$\ell$ in 24 male dogs. The CK activity of the Puppy showed a tendency to be higher than that of the adult. There was no significance between Puppy and adult. Three isoenzymes (CK-MM, CK- BB, and CK-MB) were recognized in serum. The mean percentages of female and male were as follows: 48.31fp and 48.1% for CK-MM, 35.49) and 33.61fp for CK-BB, and 8.2% and 10.1% for CK-MB in the puppy and 46.21% and 46.1 % for CK-MM, 36.3% and 37.6% for CK-BB and 10.5% and 9.5% for CK-MB in the adult.

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랫드 간장에서 Creatine 섭식에 의한 metabolites의 변화 (Effects of Dietary Creatine on Tissue Metabolite Contents and Uptakes in Rat Liver)

  • 정규식;박상준;민병길;류시윤;조성환;김무강;김성호;권오덕
    • 한국임상수의학회지
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    • 제14권1호
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    • pp.24-29
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    • 1997
  • 흰쥐 간정맥 및 간문맥에 PE10 튜브를 마취하에 이식시킨 후 5일째부터 고형사료와 10% creatine을 함유한 고형사료를 5일 동안 섭식 시켜 급속 냉동 시켰다. 냉동시킨 흰쥐 간장, 뇌 및 근육에서 creatine을 포함한 간장 metabolites을 조사하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 또한 간장세포내의 water compartment의 변화를 동시에 실시 하였다. Creatine을 섭식시킨 실험군은 정상 대조군과 비교하여 섭식에 의한 간세포내의 water compartment 에 벼노하를 주지 않았고 간장 세포내의 creatine농도에 있어서는 약 43배 이상 세포내 증가를 유도하였으며, 이는 세포외 및 세포내의 creatine의 gradient에 의해 영향을 받고 있음을 알 수가 있었고, 또한 동시에 뇌, 근육 등에서는 섭식에 의해 유의성 있는 농도 변화는 보이지 않았다. 이는 세포 외액속에 함유된 creatine 이 여러 수송기전에 의하여 간세포내로 흡착이 이루어진 것을 알 수 있었으나, 간세포 분리 시험법에로 Creatine Kinase 효소 활성도를 측정한 결과 non-parenchymal hepatocytes에서만 거의 100% 효소 활성도가 있음을 증명 하였다.

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Oxidative Phosphorylation계에 의한 Phosphocreatine의 생성 기작 (Evidences for Functionally Direct Coupling between Mitochondrial Phosphocreatine Formation and Oxidative Phosphorylation)

  • 김일한
    • 자연과학논문집
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    • 제5권2호
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    • pp.3-11
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    • 1992
  • ADP 농도를 증가시킴에 따라 미토콘드리아에 의한 Phosphocreatine의 생성속도는 포화 경향을 보이면서 증진되었다. 이 조건에서 Phosphocreatne 생성 속도를 측정하여 가해준 ADP에 대한 Km값을 구해본 결과 0. 0185 mM 임을 알았고, 이 Km값은 미토콘드리아의 Oxidative Phosphoryla-tion게와 연계되지 않은 (추출한) 미토콘드리아 Creatine Kinase의 ATP에 대한 Km 값인 0. 21mM보다 훨씬 낮음을 알 수 있었다. 이 외에도 ADP 존재하에 Oxidative Phosphorylation에 의한 ATP 생성에 대한 Creatine Kinase의 활성의 영향을 살펴본 결과 이 조건에서 Phosphocreatine은 반응시간에 정비례하게 생성 되었으나, 생성된 ATP는 반응시간에 무관함을 보였다. 또한 Oxidative Phosphorylation에 의해 미토콘드리아 외부 Respiration 용액 내에 이 ATP가 축적되는 속도도 미토콘드리아 Creatine Kinase의 Phosphocreatine 생성과 무관함을 알수 있었다. 이상의 결과들은 Mitochondrial Creatine Kinase가 Oxidative Phosphorylation계와 기능적으로 밀접하게 연계되어 ATP가 아닌 Phophocreatine이 에너지 전달 물질로 직접 이용될 가능성을 시사해준다.

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미세전류신경근자극이 Delayed Onset Muscle Soreness, 혈청 Creatine Kinase, 최대 수의적 등척성 수축에 미치는 영향 (The Effects of Microcurrent Electrical Neuromuscular Stimulation on Delayed Onset Muscle Soreness, Serum Creatine Kinase, and Maximal Voluntary Isometric Contraction: A Preliminary Report)

  • 김태열;최은영;윤희종
    • 대한물리치료과학회지
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    • 제2권3호
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    • pp.587-598
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    • 1995
  • The purpose of this study was to test the microcurrent electrical neuromuscular stimulation on muscle soreness, serum creatine kinase levels and force deficits evident following a high-intensity eccentric exercise bout. 10 volunteer male subjects were randomly assigned to a treatment group or to a control group. Exercise consisted of high-intensity eccentric contractions of the elbow flexors. Resistance was reduced as subjects fatigued, until they reached exhaustion. Muscle soreness rating was determined using a visual analog scale. Serum creatine kinase levels were analyzed using a blood sample. Force deficits were determined by measures of maximal voluntary isometric contraction at $90^{\circ}$ of elbow flexion on a Orthotron II dynamometer. Muscle soreness rating, serum creatine kinase levels and maximal voluntary isometric contraction were determined at the before exercise and again at 24 and 48 hours postexericse. Treatments were applied immediately following exercise. The control group subjects rested following their exercise bout. Statistical analysis showed significant increases in muscle soreness rating and significant decreases in maximal voluntary isometric contraction when the before exercise was compared with 24 and 48 hour measures(p<0.01). No significant effects were observed between groups in muscle soreness rating and maximal voluntary isometric contraction(p>0.05). Highly significants differences in serum creatine kinase levels were found using on Analysis of variance(ANOVA) repeated measures between groups for each time cycles(p<0.001). This modality may have benefits when used early stage in the muscle damage.

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크레아틴의 방해영향을 줄인 크레아티닌 바이오센서 (A Creatinine Biosensor with Reduced Interference from Creatine)

  • 구현우;권기학;임은혜;신재호
    • 전기화학회지
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    • 제15권4호
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    • pp.249-255
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    • 2012
  • 크레아티닌 센서의 생체시료 측정 시 가장 심각한 방해 작용을 발생하는 물질인 크레아틴을 효과적으로 제거하기 위하여 creatine kinase와 adenosine triphosphate를 사용한 두 번째 효소층을 도입하여 크레아틴에 대한 방해작용을 현저히 감소시켰다. 또한 평면형 소형 크레아티닌 센서를 개발하기 위해 탄소전극 표면에 Pt black(Pt-B)을 도입하여 표면적을 증가시킴으로써 전기화학적 감응 특성을 증가시킨 스크린 프린팅 방식의 Pt-B/C 전극을 제작하였다. 최적화된 소형 크레아티닌 센서를 흐름계 카트리지에 장착하여 미지시료를 측정한 결과 5% 이내의 오차 범위 내에서 우수한 측정 정확성과 재현성을 보임을 확인하였다.

유도선수들의 반복운동이 혈중 코티졸과 지질과산화 및 creatine kinase 활성에 미치는 영향 (The Effects of Repetitive Exercise on the Blood Cortisol, MDA, and Creatine Kinase Activity in Judoist.)

  • 백일영;곽이섭;이문열
    • 생명과학회지
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    • 제14권4호
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    • pp.573-576
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    • 2004
  • The purpose of the present study is to investigate the lipid peroxidation, creatine kinase activity and cortisol hormone levels following the training intensity in elite judo players. Six elite Judo players participated in the experiments (3h repetition judo program), which include stretching, judo skill practice and cool down without recess. Blood sampling were taken at the judo gymnasium at the time of resting, 1h training, 2h training, 3h training, 2h recovery, and 24h recovery time and this were analyzed for CK, MDA and Cortisol levels. The results obtained were analyzed via repeated measures of ANOVA using SPSS package program (ver.10.0) and a value of p<.05 was considered statistically significant. The results from this study were as follows. In the CK levels, which reflect the contribution of creatine phosphate and muscle damage degree, there was a significant difference (p<.05) after judo training in every period. Recovery 24h showed the highest level. In the MDA levels, which reflect lipid peroxidation, there was a significant difference (p<.05) after judo training. Recovery 2h showed the lowest level. In the cortisol hormone levels, which reflect stress status, there was a significant difference (p<.05). In this study, we can conclude that For the trained athletes, MDA level was lower at the time of exercise compare to the other period, this is caused by the increased antioxidant defence mechanism.

Rotavirus 위장관염에서 혈청 Creatine Kinase의 증가 (Elevated Serum Creatine Kinase Level in Rotavirus Gastroenteritis)

  • 배원태;김재희;박은실;서지현;임재영;박찬후;우향옥;윤희상
    • Pediatric Gastroenterology, Hepatology & Nutrition
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    • 제8권2호
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    • pp.117-121
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    • 2005
  • 목 적: 로타바이러스에 의한 급성위장관염이 있는 환아들에서 AST/ALT가 증가되어 있는 경우 중 CK가 증가된 경우가 있어 이들 환아들의 임상 양상이나 검사에서 특이 소견이 있는지 확인하고자 하였다. 방 법: 2001년 1월부터 2005년 3월까지 본원에서 로타바이러스 위장관염으로 진단된 환아들 중 AST/ALT가 증가해 있고, CK가 증가해 있는 환아들의 의 무기록을 통하여 임상 양상과 검사결과를 종합하였으며, 통계학적 유의성에 대해서 조사하였다. 결 과: 총 14명의 환아가 AST나 ALT가 증가되어 있으면서 CK가 증가되어있었다. 평균 연령은 1년 5개월이었으며, 연도별 빈도는 차이가 없었다. 동반 증상으로 설사, 구토, 열, 경련, 감기 증상의 유무에 따른 차이는 없었으며, 탈수의 정도가 CK 농도 증가에 영향을 미치지 않았으며, 설사의 기간도 연관성은 없었다. 14명 모두에서 CK가 증가될 수 있는 질환의 증거는 없었으며, 회복기에 정상화되는 것을 확인하였다. AST나 ALT, LDH의 농도가 높을 수록 CK의 농도가 증가하는지 확인하였으나 연관성은 없었다. 3명의 환아에서는 CK가 1,000 IU/L이상 증가되어 있었는데, 이들에서 급성 신부전이나 경련, 근육통 등의 소견은 없었다. 결 론: 로타바이러스 위장관염 환아들에서 AST/ALT가 증가할 수 있음은 이미 알려져 있으나 그 기전은 아직 이해되지 않고 있다. 본 연구에서는 AST 나 ALT의 증가 외에도 CK가 증가될 수 있음을 확인하였으나 어떤 기전에 의하는지, CK가 증가할 수 있는 특정 조건이 있는지는 알 수 없었다.

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토끼 자궁근충에서 분리한 상피세포의 배양 분리 : 크레아틴 카이네이스와 플래스민 활성인자의 분포 (Isolation of Epithelial Like Cells from the Rabbit Myometrium: the Distribution of Creatine Kinase and Plasminogen Activator)

  • 이정화
    • 대한수의학회지
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    • 제24권2호
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    • pp.137-147
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    • 1984
  • 가토 자궁 근충에서 분리한 상피세포를 10% 송아지혈청, 3mM glutamine이 함유한 Basal Eagle 배지에서 배양한 결과 세포 성장 시간은 53시간이 소요되었고, estrogen에 insulin을 첨가했을 때는 40시간으로 감소하였다. Creatine kinase 활성 단위는 단백질 mg당 0.019 unit이었다. 활성의 30%가 이온상태가 높은 완충액에서 추출되었고, plasminogen 활성 인자는 세포 백만당 140 CTA unit였다.

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심근 손상에 있어서 Lactate Dehydrogenase, Creatine Kimase 및 Troponin T 진단적 유용성 비교 (Diagnostic Efficiency of Lactate Dehydrogenase, Creatine Kinase and Troponin T in Acute Myocardial Infarction)

  • 이채훈;김경동;김정숙
    • Journal of Yeungnam Medical Science
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    • 제12권1호
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    • pp.48-55
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    • 1995
  • 1995년 1월에서 1995년 3월까지 심근 손상이 의심되는 환자 및 정상대조군에 대한 TnT, 총 LD, 총 CK 및 각 동위효소에 대한 고찰에서 다음과 같은 결과를 얻었다. Tropohin T는 정상인에서 $0.01{\pm}0.02{\mu}g/L$, 급성심근경색환자에서 최고치는 4.7-24.2 ${\mu}g/L$로 나타났으며, 초기검사에서 정상범위에 속한 환자에서 6시간 후 추적조사에서는 모든 증례에서 1.0 ${\mu}g/L$이상으로 나타났다. 총 LD는 1-3일경에 최고치를 보인 후 점차적으로 감소되었으나, LD1/LD2 비율은 대부분의 환자에서 10일 이상 1.0이상으로 유지되므로, 상대적으로 늦은 시간에 내원한 경우 총 LD와 LD1/LD2 비율이 진단에 유용할 것으로 사료되었다. 총 CK 및 CK-MB인 경우 대부분의 환자에서 3-4일 후 정상 범위로 떨어지므로, 조기진단에는 도움이 되나, 장기간의 추적조사에는 유용성이 없는 것으로 사료되었다. 총 Lactate Dehydrogenase, LD1/LD2 비율, 총 Creatine Kinase, CK-MB와 Troponin T의 상호비교에서 Troponin T가 상대적으로 초기 혹은 장기간 경과된 경우에도 유용한 지표로 사료되었다.

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