The phase and times on the development of dormancy bud in seedling, and those of flower organs in 2-year-old ginseng are different to those of over 2-,3-year-old plant, respectively. The growing aspects of dormancy bud in seedling were investigated from rooting stage (April, 8) to Mid-June, and those of flower organs in 2-year-old plant had done once in two days late in April after compound leaves were unfolded. Firstly, the formation of dormancy bud in seedling was begun on Mid-late in March. This is early about one month compare with those of over 2-year-old plant. Fine bud in seedling was formed between cotyledons, at W spot under young shoot. Secondly, development of flower organs in 2-year-old plant was completed from late of April to early of May after compound leaves of transplanted plant were unfolded. In tare, this is very different characteristics because plants of any other ages form the flower organs one year ago. Thirdly, flower organs of ginseng plant, over 3-year-old plant, always develop in the rhizome formed one year ago, but those of 2-year-old plant develop in apical shoot meristem.
Cucumber (Cucumis sativus L.) plants were regenerated through organogenesis and somatic embryogenesis in cotyledon and hypocotyl cultures. The shoots were efficiently formed on the basal region of cotyledons cultured on MS medium containing 1.0㎎/L zeatin and 0.1㎎/L IAA in all cultivars used. Embryogenic calli were formed on hypocotyl segments cultured on MS medium containing 1.0㎎/L 2,4-D in cv. group 'Nakhab' and maintained by consecutive subculture on the same medium every 2-3 weeks without loss of embryogenic ability. Upon transfer to MS basal medium, high frequency somatic embryogenesis was achieved easily from embryogenic callus. Regenerated plantlets through organogenesis and somatic embryogenesis were transplanted to pots and gradually acclimatized to greenhouse condition where they subsequently produced fruits.
The patterns of adventitious root formation from cotyledons for each cultivar of soybeans were compared. The results of adventitious root formation in cultivars are classified as two groups; the first group showed the direct adventitious root formation, and the second group resulted in the callus and adventitious root formation. The cultivars that have much callus formation had less the adventitious root formation. The adventitious root formation in the cotyledonary explants was occured only at the inoculation of adaxial side. When adaxial and abaxial side was inoculated simultaneously, the adventitious roots were formed at the adaxial side. Thus, it suggests that there must be direction to some extent. Starch in the cotyledonary explants were more abundant at the 4 days after induction than at the early stage of the adventitious root formation, but the starch was not observed after 7 days, that the growth stage of adventitious roots.
The ubiquitin E3 ligase COP1 (Constitutive Photomorphogenesis 1) is a protein repressor of photomorphogenesis in Arabidopsisplants, and it found in various organisms, including animals. The COP1 protein regulates the stability of many of the light-signaling components that are involved in photomorphogenesis and in the developmental processes. To study the effect of COP1 on flowering in a short day plant, we have cloned a full-length of PnCOP1 (Pharbitis nil COP1) cDNA from Pharbitis nil Choisy cv. Violet, and we examined its transcript levels under various conditions. A full-length PnCOP1 cDNA consists of 2,280 bp nucleotidesthat contain 47 bp of 5'-UTR, 232 bp of 3'-UTR including the poly (A) tail, and 1,998 bp of the coding sequence. The deduced amino acid sequence contains 666 amino acids, giving it a theoretical molecular weight of 75 kD and a isolectric point of 6.2. The PnCOP1 contains three distinct domains, an N-terminal $Zn^2+$-binding RING-finger domain, a coiled-coil structure, and WD40 repeats at the C-terminal, implying that the protein plays a role in protein-protein interactions. The PnCOP1 transcript was detected in the cotyledon, hypocotyls and leaves, but not in root. The levels of the PnCOP1 transcript were reduced in leaves that were a farther distance away from the cotyledons. The expression level of the PnCOP1 gene was inhibited by light, while the expression was increased in the dark. During the floral inductive 16 hour-dark period for Pharbitis nil, the expression was increased and it reached its maximum at the 12th hour of the dark period. The levels of PnCOP1 mRNA were dramatically reduced upon light illumination. These results suggest that PnCOP1 may play an important function in the floral induction of Pharbitis nil.
In order to investigate the effect of cytokinins on the cotyledonary variability of somatic embryos in Heracleum moellendorffii Hance., somatic embryos were induced from the immature zygotic embryo on MS medium containing 1.0mg/l 2, 4-D, and then transferred to 2,4-D-free and cytokinin-added medium for somatic embryogenesis after 4weeks culture. Polycotyledonary embryos were formed most abundantly(84.9%) on the 0.2mg/l BA medium as compared with the 0.2mg/l 2ip(42.6%) and kinetin(32.9%) media, and it was proportional to BA concentrations(0.01~0.1mg/l). The rate of polycotyledonary embryo formation increased proportional to the period of BA treatment and also increased more at the globular stage than at the heart, torpedo-shaped and cotyledonary stages.
Kim, Euyeon;Yang, So Hee;Park, Hyosun;Koo, Yeonjong
Korean Journal of Environmental Agriculture
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v.40
no.3
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pp.186-193
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2021
BACKGROUND: Before generating transgenic plant using the CRISPR-Cas9 system, the efficiency test of sgRNAs is recommended to reduce the time and effort for plant transformation and regeneration process. The efficiency of the sgRNA can be measured through the transient expression of sgRNA and Cas9 gene in tomato cotyledon; however, we found that the calculated efficiency showed a large variation. It is necessary to increase the precision of the experiment to obtain reliable sgRNA efficiency data from transient expression. METHODS AND RESULTS: The cotyledon of 11th, 15th, 19th, and 23rd-day-old tomato (Solanum lycopersicum cv. Micro-Tom) were used for expressing CRISPR-Cas9 transiently. The agrobacterium harboring sgRNA for targeting ALS2 gene of tomato was injected through the stomata of leaf adaxial side and the genomic DNA was extracted in 5 days after injection. The target gene edition was identified by amplifying DNA fragment of target region and analyzing with Illumina sequencing method. The target gene editing efficiency was calculated by counting base deletion and insertion events from total target sequence read. CONCLUSION: The CRISPR-Cas9 editing efficiency varied with tomato cotyledon age. The highest efficiency was observed at the 19-day-old cotyledons. Both the median and mean were the highest at this stage and the sample variability was also minimized. We found that the transgene of CRISPR-Cas9 system was strongly correlated with plant leaf development and suggested the optimum cotyledon leaf age for Agrobacterium-mediated transfection in tomato.
Zygotic embryo culture was performed to propagate evergreen oak, Quercus myrsinifolia, which has recalcitrant seeds and is difficult to propagate by cuttings. Zygotic embryos appeared in WPM medium after 14 days, and after 56 days, they developed into complete plants with cotyledons and roots. The medium suitable for zygotic embryo culture was 1/4 WPM medium, showing a shoot growth of 2.43 cm and root growth of 8.7 cm after 8 weeks of culture. As a result of investigating the effect of GA3 on the growth of plants germinated from zygotic embryos through GA3 treatment, the best growth was shown in 0.5 mg/l GA3 treatment. The in vitro rooting and growth of IBA-treated zygotic embryo-derived plants were good in the 0.5 mg/l IBA treatment and rooting and shoot growth were not observed at higher concentrations. And the callus induction rate also increased as the concentration of IBA increased. Plants grown in vitro were transferred to a plastic pot containing artificial soil and acclimatized in a greenhouse for about 4 weeks, resulting in more than 90% survival. As a result of this study, the zygotic embryo culture method was confirmed to be effective for mass propagation of Q. myrsinifolia. The results of this study are expected to contribute significantly to the mass propagation of elite Q. myrsinifolia.
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.15
no.1
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pp.19-23
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1995
Cotyledon and leaf development of six important forage legums were compared to study their contribution to the seedling growth, Cotyledons of forage legumes expanded their size rapidly during one week maximum size was reached and entered senescence. Larger seeds produced greater colyledon area, and speed of colyledon expansion was closely associated with seedling growth. Earlier onset leaf production and earlier leaf development were major determinant factor initial seedling growth. Alfalfa and red clover which have larger seeds were good in seedling vigor with larger photosynthetic area. Alsike clover and white clover with small seeds showed also good seedling vigor, as they developed leaves early with relatively high photosynthetic rate. On the other hand, though lespedeza has heavy seeds, its seedling vigor was very poor with slow photosynthetic area development and low photosynthetic rate.
Kim, Chang-Seok;Chung, Young-Jae;Lee, In-Yong;Cho, Jung-Lai;Oh, Se-Mun;Park, Jae-Eup
Korean Journal of Weed Science
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v.30
no.1
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pp.1-16
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2010
This study was conducted to develope identification method with major broad leaved weed seedlings. Characteristics of weed seedlings were investigated at two to four true leaf stage. Qualitative characteristics were more useful to identification of weed species than quantitative characteristics at the seedling stage. Many species were elliptic and broadly elliptic type in their cotyledon shape. Cotyledon shape of Cassia nomame and Calystegia sepium were broadly oblong. Four species were transverse broadly elliptic in their cotyledon shape. Rumex japonicus, Persicaria hydropiper, Euphorbia supina and Acalypha australis have three or more types in their cotyledon shape. Cotyledons of Vigna angularis var. nipponensis remained below ground after its germination. Many species were round in apex and were cuneate in base of cotyledon. Humulus japonicus and Polygonum aviculare were sessile in cotyledon base. The second true leaf shape of some species changed after first leaf stages. Glycine soja, V. angularis var. nipponensis and Kummerowia striata were broadly ovate, heart-shaped, orbicular or broadly obovate in their first true leaf, respectively, but the second true leaf shape of them were tripalmately compound. Aeschynomene indica and Cassia nomame were paripinnately compound leaf in their first and second true leaves. Margin of true leaves were entire in many species but six species including Xanthium occidentale were dentate in their true leaf margins. Margin of Euphorbia supina was entire in first true leaf and dentate in second true leaf. Margin of Chenopodium album and C. serotinum were entire in their first true leaf stage and erose in their second true leaf stage. The key for weed seedling identification of major weed species were made based on quantitative and qualitative morphological characteristics.
To investigate the effects of light intensity on the growth, and the critical minimum light intensity for growing of Cornus controversa seedlings at the stage of cotyledon, hypocotyl elongation, cotyledon expansion, the times of leaves appearance, dry weights of each organ, and specific leaf area(SLA) were measured on a growth chamber with several light intensity gradients(385, 32, 17, 8, and $5{\mu}mol\;m^{-2}s^{-1}$). There was a positive correlationship between the size of cotyledon and the biomass of cotyledon and total seedling. Hypocotyl was more elongated under relatively low light intensities, such as 32, 17, 8, and $5{\mu}mol\;m^{-2}s^{-1}$ than under $385{\mu}mol\;m^{-2}s^{-1}$ light intensity, however, dry weight of the hypocotyl was adverse. As the light intensities decreased, the leaf appearance was delayed and the number of leaves decresed. In addition, leaves did not appear under $8{\mu}mol\;m^{-2}s^{-1}$ and $5{\mu}mol\;m^{-2}s^{-1}$ light intensity. Although cotyledons were more fully expanded under 32 and $17{\mu}mol\;m^{-2}s^{-1}$ light intensities than $385{\mu}mol\;m^{-2}s^{-1}$ light intensity, the dry weights of cotyledons were greater under the high light intensity. The dry weight of cotyledon, hypocotyl, root and leaves showed a decreased pattern with decreasing light intensities, but root to shoot(hypocotyl+leaves) ratio rapidly increased. Roots did not develop below $8{\mu}mol\;m^{-2}s^{-1}$ light intensity. In conclusion, the results showed that the critical minimum light intensity for growing of Cornus controversa seedlings was above $17{\mu}mol\;m^{-2}s^{-1}$ light intensity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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