Regulation of endoplasmic reticulum(ER) chaperone, ERp29, in traumatized rat spinal cord was investigated. Compared to the control, ERp29 expression was down-regulated at the lesion site 1 d after spinal cord injury. However, ERp29 expression gradually increased from 3 d after the injury and peaked remarkably after 7 d. Two ER chaperones (GRP94 and BiP) showed constantly strong expression levels 1 d after spinal cord injury while the expression levels of the other two (calnexin and PDI) were unchanged. In the case of ERp72, its expression level was increased 1 d after the injury and gradually decreased thereafter. This study suggests that ERp29 expression in the spinal cord after traumatic injury might be associated with the posttraumatic neural survival, playing a role as a molecular chaperone.
별늑대거미의 전측안은 전중안과 함께 전방을 향하여 앞이마 제 1 열에 위치하고 있었으며, 조직학적 조성은 각막, 렌즈, 초자체, 그리고 망막으로 이루어져 있었다. 큐티클성 각막층은 표피의 외큐티클(exocuticle)과 연결되어 있었고, 렌즈는 두개의 볼록렌즈가 내외 양방향으로 연결된 biconvex type이었고, 초자체는 단층의 원주세포로 오목렌즈 모양으로 관찰되었다. 망막을 구성하는 시세포는 단극성 신경세포 (unipolar neuron)로 확인되었으며, 크기가 시세포의 길이에 비하여 큰 세포체가 매우 불규칙 한 크기로 분포하고 있었다. 미세융모로 이루어진 감간체는 세포체 아래에 분포하고 있었으며, 이 부위의 시세포 사이에서는 전자밀도가 높은 색소과립이 관찰되었다. 교질세포는 시세포의 세포체 사이에 분포하였고, 반사층(tapetum)은 감간과 시세포 미부(intermediate segment) 부위 사이에 4-5 정도의 층을 이루어 존재하였다.
The present study was conducted to investigate the structural changes in rat cornea. Sixty eyes from one-day-old uneyed rats, fourty eyes from 4-weeks-old rats, and foully eyes from 10-weeks-old adult rats were used. With the increase of age, the epithelial layer was thickened by the addition of new successive cellular layers. Then, the new-born rat's epithelial cells formed a pentagonal shape, and the quality of decidual cells showed a high electron-density, although the boundary between cells was distinctive. The newly produced cells showed a low electron-density so that there was the distinctive difference between light and darkness. In Bowman's layer, collagen fibrils demonstrate a regularly arranged structure along with the age. In stroma's layer, the density of keratocytes was decreased and thereby Progressively flattened during the development. The collagenous layer of the adult rats was more distinctive than that of the new-born rats in a form of parallel alignment running vertically and horizontally.
Kim Young-Yoon;Kim Beop-Min;Park Hwa-Joon;Im Kang-Bin;Lee Jin-Su;Kim Dong-Youn
대한의용생체공학회:의공학회지
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제27권3호
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pp.125-130
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2006
The number of the living endothelial cells and the shape of those are very import clinical parameters for the evaluation of the quality of cornea. In this paper, we developed the automated endothelial cell counting and shape analysis algorithm for a confocal microscope. Since, the endothelial images from the confocal microscope has a non-uniform illumination and low contrast between cell boundaries and cell bodies, it is very difficult to segment the cells from the endothelial images. To cope with these difficulties, we proposed the new two stage image processing algorithm. At first stage algorithm, we used a high-pass filter and histogram equalization to compensate the non-uniform brightness pattern and a morphological filter and a watershed method are applied to detect the boundary of cells. From this stage, we could count the number of cells in an endothelial image. At second stage algorithm, we used a Voronoi diagram method to classify the shape of cells. This cell shape analysis and the percent of hexagonal cells are very sensitive in detecting the early endothelium damage. To evaluate the performance of the proposed system, we p개cessed seven endothelial images obtained using a confocal microscope. The proposed system correctly counted 95.5% cells and classified 92.0% of hexagonal cell shapes. This result is better than any others in this research area.
The eye irritation potential of drug candidates or pharmaceutical ingredients should be evaluated if there is a possibility of ocular exposure. Traditionally, the ocular irritation has been evaluated by the rabbit Draize test. However, rabbit eyes are more sensitive to irritants than human eyes, therefore substantial level of false positives are unavoidable. To resolve this species difference, several three-dimensional human corneal epithelial (HCE) models have been developed as alternative eye irritation test methods. Recently, we introduced a new HCE model, MCTT HCE$^{TM}$ which is reconstructed with non-transformed human corneal cells from limbal tissues. Here, we examined if MCTT HCE$^{TM}$ can be employed to evaluate eye irritation potential of solid substances. Through optimization of washing method and exposure time, treatment time was established as 10 min and washing procedure was set up as 4 times of washing with 10 mL of PBS and shaking in 30 mL of PBS in a beaker. With the established eye irritation test protocol, 11 solid substances (5 non-irritants, 6 irritants) were evaluated which demonstrated an excellent predictive capacity (100% accuracy, 100% specificity and 100% sensitivity). We also compared the performance of our test method with rabbit Draize test results and in vitro cytotoxicity test with 2D human corneal epithelial cell lines.
6 년령 중성화 암컷 페르시안 고양이가 3개월동안 우안의 재발성 각막궤양, 각막혼탁, 각막 혈관화를 주증상으로 내원하였다. 병변은 그 기간동안 국소적인 항생제와 비스테로이드성 소염제 점안에 치료반응이 없었다. 우안에서 유루증, 안검경련과 같은 안구통증 증상이 확인되었다. 미세 틈새등 현미경 검사에서 우안의 각막 전체에 분홍색에서 흰색을 띄는 부종성의 불규칙한 덩어리와 미약한 결막염을 확인하였다. 임상증상을 통해 고양이 증식성 호산구성 각막염으로 잠정 진단하였다. 각막의 세포학적 검사결과에서 다수의 호산구와 비만세포가 관찰되어 잠정적으로 내렸던 진단을 확진하였다. 본 환자는 국소적인 항생-코르티코스테로이드 합제, 사이클로스포린 연고, 트리플루리딘 점안과 전신적인 L-lysine 의 경구투여로 치료하였다. 치료시작 18일 후 내원 시 병변은 눈에 띄게 호전되었다. 국소적인 코르티 코스테로이드와 사이클로스포린의 병용치료는 고양이 증식성 호산구성 각막염에 유용한 치료법으로 생각된다.
본 연구는 시중에서 유통되고 있는 콘택트렌즈 관리용액인 다목적용액 (multi-purpose solution, MPS)이 세포에 미치는 증식저해정도와 실험용 토끼눈의 각막 상피 및 내피조직에 미치는 손상정도를 비교 관찰하고자 시행하였다. MPS는 $ReNu^{(R)}$ (Baush & Lomb, USA), Opti-free $express^{(R)}$ (Alcon, USA), Free-sol $plus^{(R)}$ (Hanamedicon, Korea)를 사용하였다. 세포증식 저해율은 L929세포주를 배양 후 MTT assay로 검정하였고, 형태학적으로는 광학 현미경과 Hematoxylin & Eosin staining 표본을 제작하여 관찰하였다. In vivo 실험은 백색 가토 9마리 (18안)를 3군으로 분류하여 실험군인 좌안(9안)에는 각 MPS제품을, 대조군인 우안(9안)에는 보존제가 포함되지 않은 멸균생리식염수를 점안하였다. 일정기간 점안 후, 실험용 토끼눈의 각막표면을 Rose bengal로 염색하여 관찰하였고 각막상피 및 내피조직의 변화는 주사전자현미경 (scanning electron microscopy, SEM)으로 관찰하였다. 세포증식 저해율은 각각 54, 73, 36%로 나타났으며, 형태학적 변화는 L929세포주의 일반적인 형태와 달리 타원형 또는 원형으로 위축되었다. Rose bengal 염색 결과, 각 실험군은 대조군과 달리 전반적으로 붉게 염색되었고 주사전자현미경 (SEM)관찰 결과, 각막상피는 다각형 모자이크(polygonal mosaic)형태의 균일도가 감소하였고, 각막내피 또한 형태가 불규칙하였으며 섬유아세포만 국소적으로 관찰되었다. 따라서 MPS의 항미생물의 효과와 더불어 생체세포의 안전성면에서 고려해 볼 때 합성보존제의 농도개선과 세포독성이 없는 새로운 보존제 개발의 지속적인 연구가 필요할 것으로 판단된다.
Limei Wang;Haijing Yan;Xiaomeng Chen;Lin Han;Guibo Liu;Hua Yang;Danli Lu;Wenting Liu;Chengye Che
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제33권1호
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pp.43-50
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2023
Fungal keratitis is a refractory kind of keratopathy. We attempted to investigate the antiinflammatory role of thymol on Aspergillus fumigatus (A. fumigatus) keratitis. Wound healing and fluorescein staining of the cornea were applied to verify thymol's safety. Mice models of A. fumigatus keratitis underwent subconjunctival injection of thymol. The anti-inflammatory roles of thymol were verified by hematoxylin-eosin (HE) staining, slit lamp observation, quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR), and Western blotting. In contrast with the DMSO group, more transparent corneas and less inflammatory cells infiltration were detected in mice treated with 50 ㎍/ml thymol. Thymol downregulated the synthesis of TLR4, MyD88, NF-kB, IL-1β, NLRP3, caspase 1, caspase 8, GSDMD, RIPK3 and MLKL. In summary, we proved that thymol played a protective part in A. fumigatus keratitis by cutting down inflammatory cells aggregation, downregulating the TLR4/ MyD88/ NF-kB/ IL-1β signal expression and reducing necroptosis and pyroptosis.
Copidognathus bengalensis n. sp. is described from Visakhapatnam coast, Bay of Bengal, India. The present species is characterized by posterodorsal plate (PD) with four costae made up of po rose panels, subdivided posterior cornea of ocular plate (OC), and two pairs of basirostral setae in female. This species is related to C. pulcher group, but the nature of po rose panels on anterior areolae of anterior dorsal plate (AD) and the setal ornamentation of legs were different between the members of C. pulcher group and the present new species.
세포내 기록법으로써 메기 망막의 제3열신경원에 대한 동적 특성을 관찰하였다. 메기(channel catfish; Ictalurus punctatus)로부터 안구를 적출한 다음 각막, 홍채, 수정체, 초자체 둥을 차례로 제거함으로써 반구형의 eyecup 표본을 만들었다. 이 표본에 Ringer 용액 또는 실험용액을 관류시키면서 빛자극을 가함에 따라 신경원에서 발생하는 전압변동을 유리 미세전극을 통하여 검출하고 amplifier로써 증폭한 후 penwriter를 이용하여 기록하였다. 빛자극원으로는 컴퓨터 모니터를 이용하였으며, 막대형 자극의 이동속도 및 두께를 조절함으로써 대상 신경원의 위치를 포착하고 방향선택성을 조사하였다. GABA$_{B}$ 수용체 작용제인 baclofen에 의해 제3열신경원의 일종인 ON-지속성 신경원에서 암막전압은 과분극되며 지속성 성분은 억제된 반면 일과성 성분은 증대되었으며, 또한 ON-OFF 일과성 신경원은 특정 방향의 자극에 대한 빛반응이 선택적으로 억제되는 방향선택성을 나타내었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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