Gaja, A.;Meng, C.L.;Sato, M.;Nakajima, T.;Kubota, Chikara;Kojima, T.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제23권1호
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pp.25-32
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2010
The present study aimed to examine the effects of ${\gamma}$-linolenic acid (GLA) supplementation to in vitro culture (IVC) medium on in vitro developmental competence, freezability and morphology of in vitro matured and fertilized bovine embryos. In vitro produced (IVP) bovine zygotes were cultured in IVC medium supplemented with 0 (negative control), 15, 31, 62, 125, 250, 500 or 1,000 ppm GLA, 250 ppm linoleic acid albumin (LAA) and without any supplement as a control. Day 6 blastocysts derived from culture control were cultured in IVC medium containing either 62, 250 GLA or 250 LAA for 24 h, and at Day 7 were subjected to freezing or morphological examination by electron microscope. GLA 15 showed a tendency to have a higher cleavage rate at Day 2 (70.3%) than other groups. The hatching rate at Day 9 in LAA (38.2%) was significantly higher than the control and all treatment groups (p<0.05), while the blastocyst rate in LAA (32.4%) did not differ from those of 15 (30.5%), 31 (27.1%), and 62 GLA (33.1%) or the control (35.1%). GLA in concentrations of 125, 250, 500, and 1,000 ppm had significantly detrimental effect on the blastocyst rate compared to 15, 31 and 62 ppm GLA, LAA, and control groups (p<0.05). In contrast, the highest post-thaw survival rate (100%) was observed in the control group (p<0.01). Large lipid droplets were observed in the cytoplasm of trophoblastic cells, even in the control, but were abundant in GLA groups. Taking the results of the study into consideration, the addition of GLA to the culture medium for IVP bovine embryos at the dose of 15 ppm increased the developmental competence of zygotes and enhanced the cleavage rate up to Day 2. However, blastulation rate and post-thaw survival were not increased when GLA was added to the culture media.
Aliphatic alkenals having 6 to 13 carbons were evaluated for antifungal activity against Saccharomyces cerevisiae. The activity was gradually increased with chain length, e.g., (E)-2-decenal and (E)-2-undecenal exhibited maximum potency, while (E)-2-dodecenal and (E)-2-tridecenal were completely inactive. Alkenals showed increasing inhibitory activity with chain length, as in the case of antifungal activity, towards glucose-induced medium acidification by the plasma membrane $H^+$-ATPase of S. cerevisiae. The group including (E)-2-nonenal, (E)-2-decenal, and (E)-2-undecenal exhibited maximum potency, but the potency of (E)-2-dodecenal and (E)-2-tridecenal demonstrated a sudden drop with respect to the former group. (E)-2-Nonenal revealed dose-responsive inhibition to the medium acidification and inhibited over 90% at a concentration of 1.25 mM ($175.3{\mu}g$/ml). In contrast to (E)-2-undecenal whose inhibitory efficiency increased with incubation time, inhibition by (E)-2-dodecenal was reversed with time. Of the tested alkenals, (E)-2-heptenal and (E)-2-octenal most highly inhibited ATP hydrolytic activity by the plasma membrane $H^+$ ATPase, while (E)-2-heptenal at 10 mM ($1121.8{\mu}g$/ml) showed an inhibitory efficacy of 93.2%.
Targeting the cystine/glutamate exchange transporter, system xc-, is a promising anticancer strategy that induces ferroptosis, which is a distinct form of cell death mediated by iron-dependent lipid peroxidation. The concentration of ⳑ-cystine in culture medium is higher than the physiological level. This study was aimed to evaluate the effects of ⳑ-cystine concentration on the efficacy of ferroptosis inducers in hepatocellular carcinoma cells. This study showed that treatment with sulfasalazine or erastin, a system xc- inhibitor, decreased the viability of Huh6 and Huh7 cells in a dose-dependent manner, and the degree of growth inhibition was greater in medium containing a physiological ⳑ-cystine concentration of 83 µM than in commercial medium with a concentration of 200 µM ⳑ-cystine. However, RSL3, a glutathione peroxidase 4 inhibitor, decreased cell viability to a similar extent in media containing both ⳑ-cystine concentrations. Sulfasalazine and erastin significantly increased the percentages of propidium iodide-positive cells in media with 83 µM ⳑ-cystine, but not in media with 200 µM ⳑ-cystine. Sulfasalazine- or erastin-induced accumulation of lipid peroxidation as monitored by C11-BODIPY probe was higher in media with 83 µM ⳑ-cystine than in media with 200 µM ⳑ-cystine. In contrast, the changes in the percentages of propidium iodide-positive cells and lipid peroxidation by RSL3 were similar in both media. These results showed that sulfasalazine and erastin, but not RSL3, were efficacious under conditions of physiological ⳑ-cystine concentration, suggesting that medium conditions would be crucial for the design of a bioassay for system xc- inhibitors.
급성기 허혈성 뇌졸중 증상이 있는 뇌 관류 CT 검사를 시행한 환자를 대상으로 장비사가 제시한 고정 시간 기법(Fixed time technique)과 조영제 추적 기법(Bolus tracking technique)을 비교하여 환자의 피폭선량을 분석하고자 하였으며, 조영제 추적 기법의 유용성과 최적의 조영증강 구간을 구현하는 Time graph를 알아보기 위한 것이다. 환자에서는 PCT의 $CTDI_{VOL}$은 고정시간기법에서 431.72mGy, Bolus tracking에서 323.61mGy로 측정되었고, DLP값은 고정시간기법에서 $1243.47mGy{\cdot}cm$, Bolus tracking에서 $932mGy{\cdot}cm$로 측정되었다. Time graph는 고정시간기법에서 다양하게 나타났으나, Bolus tracking 기법에서는 최적의 Time graph를 얻을 수 있었으며, 뇌 관류 CT검사 시 Bolus tracking기법을 적용하여 피폭선량을 25% 정도 감소시킬 수 있었다.
To assay the fertilizing capacity of domestic animal spermatozoa by hamster test, semen were collected from 13 boars(Duroc. Landrace and Yorkshire) which had been proved to be fertile in the past. then, were preserved in BWW medium or in raw state at 18$^{\circ}C$ or at room temperature. The preserved semen were given each different treatment according to the experimental design and coincubated with zona-free hamster ova for 5 hours. The ova were stained by lacmoid and examined under phase contrast microscope to investigate the rates of ova bound with sperm(sperm binding). ova penetrated by sperm(penetration) and formation of a male pronucleus(pronucleus formation) and also numbers of both bound and penetrated sperm per ovum. Between BWW and TBM medium for boar sperm. no difference in the results of hamster test was obtained. The boar spermatozoa in BWW medium, BWW with caffeine, BWW with heparin, and BWW with both caffeine and heparin showed no difference in the results of hamster test. The boar spermatozoa in BWW medium containing both calcium and RSA showed considerably higher rates of sperm binding, penetration and pronucleus formation as well as higher numbers of both bound and penetrated sperm than those not containing calcium with or without BSA( p<0.01) and also the same results higher than that containing calcium without BSA( p< 0.05). The boar spermatozoa irradiated by X-ray(70 KVP, 20mA) for 3 seconds. then, maintained at 18$^{\circ}C$ for 18 hours showed considerably lower rate of sperm binding than all the other groups including the control and X-ray groups irradiated by smaller dose or maintained for shorter period(p<0.01), and also showed lower number of bound sperm than the other groups(p<0.01, p<0.05). All the control groups of both raw and diluted sperm in BWM medium showed higher rates of sperm binding, penetration and pronucleus formation as well as higher number of penetrated sperm than all the X-ray groups irradiated for 3 seconds(70KVP, 20mA) and maintained for either 3 or 18 hours (p<0.01, p<0.05). At the same time the control groups of diluted sperm showed considerably higher rates of sperm penetration and pronucleus formation than the control group of raw sperm( p<0.01). These results indicates that fertile boar sperm showed considerably lower rates In the results of hamster test, when incubated in the medium without calcium and irradiated by X-ray than when incubated in the medium with calcium and not irradiated by X-ray, respectively, to prove consequently that hamster test would be of great value in assaying the fertilizing capacity of boar spermatozoa.
조영증강을 위해 조영제를 정맥내 카테터로 주입하는 과정에서 정맥태 카테터 조각을 검출하고 제거하기 위해 식염수와 18 게이지 테프론 IV 카테터의 1cm 조각을 삽입하여 팬텀을 제작하여 엑스선, 초음파 및 CT 영상을 비교하고자 한다. 엑스선, 초음파 및 CT에서 정맥내 카테터 조각을 임상적으로 유용하게 보였고, 조각의 묘출 능력에는 차이가 유의한 차이가 없었다.(p >.05). 방사선 선량은 엑스선에서 DAP ($0.93{\mu}Gy{\cdot}m^2$) 및 유효선량 ($0.2139mSv{\cdot}Gy^{-1}{\cdot}cm^{-2}$), CT의 DLP ($201mGy{\cdot}cm$), 유효선량은 0.483 mSv로 산출되었다. 엑스선, 초음파 및 CT에서 정맥내 카테터 조각을 임상적으로 검출하였고, 조각의 묘출 능력에는 CT가 우수하였다. 그러나 엑스선 및 CT는 방사선 피폭을 수반하여 정맥내 카테터 조각의 위치 및 정보를 확인하는 데는 초음파 검사를 추천한다.
Objective: To separate/enrich tumor stem-like cells from the human esophageal carcinoma cell line OE-19 by using serum-free suspension culture and to identify their biological characteristics and radiation resistance. Methods: OE-19 cells were cultivated using adherent and suspension culture methods. The tumor stem-like phenotype of CD44 expression was detected using flow cytometry. We examined growth characteristics, cloning capacity in soft agar, and radiation resistance of 2 groups of cells. Results: Suspended cells in serum-free medium formed spheres that were enriched for CD44 expression. CD44 was expressed in 62.5% of suspended cells, but only in 11.7% of adherent cells. The suspended cells had greater capacity for proliferation and colony formation in soft agar than the adherent cells. When the suspended and adherent cells were irradiated at 5 Gy, 10 Gy, or 15 Gy, the proportion of CD44+ suspended cells strongly and weakly positive for CD44 was 77.8%, 66.5%, 57.5%; and 21.7%, 31.6%, 41.4%, respectively. In contrast, the proportion of CD44+ adherent cells strongly positive for CD44 was 18.9%, 14.%, and 9.95%, respectively. When the irradiation dose was increased to 30 Gy, the survival of the suspended and adherent cells was significantly reduced, and viable CD44+ cells were not detected. Conclusion: Suspended cell spheres generated from OE-19 esophageal carcinoma cells in serum-free stem medium are enriched in tumor stem-like cells. CD44 may be a marker for these cells.
Background: To investigate the inhibitory effect and the underlying mechanism of triptolide on cultured human endometrial carcinoma HEC-1B cells and corresponding xenograft. Materials and Methods: For in vitro studies, the inhibition effect of proliferation on HEC-1B cell by triptolide was determined by MTT assay; cell cycle and apoptosis of the triptolide-treated and untreated cells were detected by flow cytometry. For in vivo studies, a xenograft tumor model of human endometrial carcinoma was established using HEC-1B cells, then the tumor-bearing mice were treated with high, medium, and low-dose ($8{\mu}g$, $4{\mu}g$ and $2{\mu}g/day$) triptolide or cisplatin at $40{\mu}g/day$ or normal saline as control. The mice were treated for 10-15 days, during which body weight of the mice and volume of the xenograft were weighted. Then expression of Bcl-2 and vascular endothelial growth factor (VEGF) was analyzed by SABC immunohistochemistry. Results: Cell growth was significantly inhibited by triptolide as observed by an inverted phase contrast microscope; the results of MTT assay indicated that triptolide inhibits HEC-1B cell proliferation in a dose and time-dependent manner; flow cytometry showed that low concentration (5 ng/ml) of triptolide induces cell cycle arrest of HEC-1B cells mainly at S phase, while higher concentration (40 or 80 ng/ml) induced cell cycle arrest of HEC-1B cells mainly at G2/M phase, and apoptosis of the cells was also induced. High-dose triptolide showed a similar tumor-inhibitory effect as cisplatin (-50%); high-dose triptolide significantly inhibited Bcl-2 and VEGF expression in the xenograft model compared to normal saline control (P<0.05). Conclusions: triptolide inhibits HEC-1B cell growth both in vitro and in mouse xenograft model. Cell cycle of the tumor cells was arrested at S and G2/M phase, and the mechanism may involve induction of tumor cell apoptosis and inhibition of tumor angiogenesis.
I-131의 주 에너지는 364 keV이고 이차적으로 637과 723 keV의 감마선을 방출한다. 이런 이유로 I-131 핵종을 이용한 검사에서는 일반적으로 고 에너지 조준기를 사용하고 있다. 반면 중 에너지 조준기는 과도한 격벽 투과의 영향 때문에 사용이 권고되지 않지만 I-131의 낮은 선량에 대해 계수율의 민감도를 향상시키기 위해 중 에너지 조준기를 사용하기도 한다. 이에 본 연구에서는 I-131 SPECT/CT에서 고 에너지와 중 에너지 조준기를 사용하여 조준기 선택에 대한 영상의 영향을 평가하고자 한다. I-131 점 선원과 NEMA NU-2 IQ phantom을 이용하여 Siemens symbia T16 SPECT/CT 장비로 중 에너지 조준기와 고 에너지 조준기를 사용하였다. 영상획득은 단일 에너지 창과 삼중 에너지 창으로 각각 적용하여 영상을 획득하였고, 재구성방법은 반복재구성 기법인 Flash 3D를 이용하여 CTAC, Scatter correction 적용 유무와 Iteration과 subset의 횟수를 변경하여 획득된 영상을 재구성하였다. 획득된 영상을 분석하여 두 조준기의 민감도와 대조도 그리고 잡음을 비교 평가하였다. 민감도는 중 에너지 조준기가 고 에너지 조준기보다 높게 나타났다(중 에너지 조준기: 188.18 cps/MBq, 고 에너지 조준기: 46.31 cps/MBq). 대조도는 삼중 에너지 창과 고 에너지 조준기를 사용하고 CTAC를 적용하여 16 subset 8 iteration을 적용한 재구성영상에서 가장 높은 대조도를 나타냈고(TCQI=190.64), 동일한 조건에서 중 에너지 조준기를 사용하였을 경우는 고 에너지 조준기에 비해 낮은 대조도를 나타냈다(TCQI=66.05). 잡음평가에서는 고 에너지 조준기보다 중 에너지 조준기에서 높게 나타났다 (P<0.001). 적절한 조준기의 선택은 영상의 질에 있어 중요한 사항이다. 본 연구를 통해 고 에너지 감마선을 방출하는 I-131 검사에서는 일반적으로 사용되고 있는 고 에너지 조준기를 사용하는 것이 영상의 질에 있어 가장 권고되는 바이다. 하지만 에너지 창, 매트릭스 크기, 반복 재구성 조건(subset과 iteration 수) 그리고 CTAC 및 scatter correction 여부등과 같은 조건들을 적절히 적용한다면 낮은 선량의 낮은 민감도를 갖는 조건에서는 중 에너지 조준기를 사용할 수 있을 것으로 사료된다.
본 연구는 PET(positron emission tomography) 검사를 위해 내원한 환자를 대상으로 방사성의약품 18F-FDG 동위원소를 주사 할 때, 주사 방법과 생리식염수의 용량에 따른 주사기의 잔량의 차이를 비교하였다. 조영제를 사용하는 CT 혹은 MRI 검사 후, 3-way를 제거하지 않고, PET 검사를 위해 내원한 40명의 환자를 대상으로 18F-FDG를 주사 할 때, 주사기와 3-way에 남게 되는 방사능을 측정하여, 실제 환자에게 투여된 방사능을 확인했다. 이때 20명의 환자들로 나누어 생리식염수의 용량을 달리하였다. 또 다른 주사 방법은 extension을 이용하여 주사 하였을 때, 주사기의 잔량 비교와 생리식염수 용량에 따른 잔량 차이를 비교하였다. 18F-FDG 를 주사 한 후, 주사기와 3-way 또는 extension에 남아 있는 방사능을 검량기로 측정하여 실제 투여된 용량을 확인 했다. 방사성의약품을 투여하기 전의 주사기의 방사능과 투여한 후 주사기와 3-way 또는 extension 의 방사능을 측정한 결과, 생리식염수 10 cc에 3way 의 주입 방식이 잔류량이 가장 낮았고, 생리식염수 10 cc에 extension, 생리식염수 5 cc에 3way 순으로 잔량이 증가하였다. 5 cc의 생리식염수에 extension 주사 방법이 잔량이 가장 많이 남아 있었다. 잔량이 가장 적게 남은 주사 방법과의 잔량 차이는 0.053 mCi이다. PET 검사 시, 3-way와 extension에 남게 되는 방사능을 감안하고, 생리식염수의 투여 용량을 조절함에 따라, 실제 환자에게 투여하고자 하는 목적 용량을 고안한다면 좀 더 정확하게 환자에게 방사성의약품을 투여할 수 있을 것이다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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