The full-genome sequences of fourteen isolates of Broad bean wilt virus 2 (BBWV2), collected from broad bean, pea, spinach, bell pepper and paprika plants in Korea during the years 2006-2012, were determined and analyzed comparatively along with fifteen previously reported BBWV2 genome sequences. Sequence analyses showed that RNA-1 and RNA-2 sequences of BBWV2 Korean isolates consisted of 5950-5956 and 3568-3604 nucleotides, respectively. Full-length genome sequence-based phylogenetic analyses revealed that the BBWV2 Korean isolates could be divided into three major groups comprising GS-I (isolates BB2 and RP7) along with isolate IP, GS-II (isolates BB5, P2, P3 and RP3) along with isolate B935, and GS-III including 16 BBWV2 Korean isolates. Interestingly, GS-III appears to be newly emerged and predominant in Korea. Recombination analyses identified two recombination events in the analyzed BBWV2 population: one in the RNA-1 of isolate K and another one in the RNA-2 of isolate XJ14-3. However, no recombination events were detected in the other 21 Korean isolates. On the other hand, out of 29 BBWV2 isolates, 16 isolates were found to be re-assortants, of which each RNA segment (i.e. RNA1 and RNA2) was originated from different parental isolates. Our findings suggested that reassortment rather than recombination is a major evolutionary force in the genetic diversification of BBWV population in Korea.
Chung, Han Young;Lee, Kyu-Ho;Ryu, Sangryeol;Yoon, Hyunjin;Lee, Ju-Hoon;Kim, Hyeun Bum;Kim, Heebal;Jeong, Hee Gon;Choi, Sang Ho;Kim, Bong-Soo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.26
no.12
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pp.2030-2035
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2016
Bacillus cereus causes food-borne illness through contaminated foods; therefore, its pathogenicity and genome sequences have been analyzed in several studies. We sequenced and analyzed B. cereus strain FORC_021 isolated from a sashimi restaurant. The genome sequence consists of 5,373,294 bp with 35.36% GC contents, 5,350 predicted CDSs, 42 rRNA genes, and 107 tRNA genes. Based on in silico DNA-DNA hybridization values, B. cereus ATCC $14579^T$ was closest to FORC_021 among the complete genome-sequenced strains. Three major enterotoxins were detected in FORC_021. Comparative genomic analysis of FORC_021 with ATCC $14579^T$ revealed that FORC_021 harbored an additional genomic region encoding virulence factors, such as putative ADP-ribosylating toxin, spore germination protein, internalin, and sortase. Furthermore, in vitro cytotoxicity testing showed that FORC_021 exhibited a high level of cytotoxicity toward INT-407 human epithelial cells. This genomic information of FORC_021 will help us to understand its pathogenesis and assist in managing food contamination.
Most, if not all, aphids harbor intracellular bacterial symbionts, called Buchnera, in their bacteriocytes, huge cells differentiated for this purpose. The association between Buchnera and aphids is so intimate, mutualistic and obligate that neither of them can any longer reproduce independently. Buchnera are vertically transmitted through generations of the host insects. Evidence suggests that Buchnera were acquired by a common ancestor of aphids 160-280 million years ago, and have been diversified, since then, in parallel with their aphid hosts. Molecular phylogenetic analyses indicate that Buchnera belong to the g subdivision of the Proteobacteria. Although Buchnera are close relatives of Escherichia coli, they contain move than 100 genomic copies per cell, and their genome size is only one seventh that of E. coli. The complete genome sequence of Buchnera revealed that their gene repertoire is quite different from those of parasitic bacteria such as Mycoplasma, Rickettsia and Chlamydia, though their genome sizes have been reduced to a similar extent. Whereas these parasitic bacteria have lost most genes for the biosynthesis of amino acids, Buchnera retain many of them. In particular, Buchnera's gene repertoire is characteristic in the richness of the genes for the biosynthesis of essential amino acids that the eukaryotic hosts are not able to synthesize, reflecting a nutritional role played by these symbionts. Buchnera, when housed in the bacteriocyte, selectively synthesize a large amount of symbionin, which is a homolog of GroEL, the major stress protein of E. coli. Symbionin not only functions as molecular chaperone, like GroEL, but also has evolutionarily acquired the phosphotransferase activity through amino acid substitutions. Aphids usually profit from Buchnera's fuction as a nutritional supplier and, when faced with an emergency, consume the biomass of Buchnera cells as nutrient reserves.
Lee, Ji Hee;Kang, Joo Won;Kim, Eun Mi;Seong, Chi Nam
Korean Journal of Microbiology
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v.54
no.2
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pp.161-163
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2018
The genome of Flavivirga eckloniae $ECD14^T$ isolated from a seaweed Ecklonia cava was sequenced. The genome comprises a single circular 5,665,358 bp chromosome with a G + C content of 33.9%, 4,647 total genes, 4,595 protein-coding genes, 44 pseudo genes, and 52 RNA genes. CRISPER genes and sequences were not found and there were some phage remnants and transposons. This strain contains alginate lyase and ${\beta}$-glucosidase genes responsible for the degradation of seaweed polysaccharides.
Jeong, Haeyoung;Choi, Sanghaeng;Park, Gun-Seok;Ji, Yosep;Park, Soyoung;Holzapfel, Wilhelm Heinrich;Mathara, Julius Maina;Kang, Jihee
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.47
no.1
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pp.25-33
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2019
Lactobacillus rhamnosus BFE5264, isolated from a Maasai fermented milk product ("kule naoto"), was previously shown to exhibit bile acid resistance, cholesterol assimilation, and adhesion to HT29-MTX cells in vitro. In this study, we re-annotated and analyzed the previously reported complete genome sequence of strain BFE5264. The genome consists of a circular chromosome of 3,086,152 bp and a putative plasmid, which is the largest one identified among L. rhamnosus strains. Among the 2,883 predicted protein-coding genes, those with carbohydrate-related functions were the most abundant. Genome analysis of strain BFE5264 revealed two consecutive CRISPR regions and no known virulence factors or antimicrobial resistance genes. In addition, previously known highly variable regions in the genomes of L. rhamnosus strains were also evident in strain BFE5264. Pairwise comparison with the most studied probiotic strain L. rhamnosus GG revealed strain BFE5264-specific deletions, probably due to insertion sequence-mediated recombination. The latter was associated with loss of the spaCBA pilin gene cluster and exopolysaccharide biosynthetic genes. Comparative genomic analysis of the sequences from all available L. rhamnosus strains revealed that they were clustered into two groups, being within the same species boundary based on the average nucleotide identities. Strain BFE5264 had a sister group relationship with the group that contained strain GG, but neither ANI-based hierarchical clustering nor core-gene-based phylogenetic tree construction showed a clear distinctive pattern associated with the isolation source, implying that the genotype alone cannot account for their ecological niches. These results provide insights into the probiotic mechanisms of strain BFE5264 at the genomic level.
Soybean mosaic virus (SMV) is the predominant viral pathogen that affects the yield and quality of soybean. The natural host range for SMV is very narrow, and generally limited to Leguminosae. However, we found that SMV can naturally infect Pinellia ternata and Atractylodes macrocephala. In order to clarify the molecular mechanisms underlying the cross-family infection of SMV, we used double-stranded RNA extraction, rapid amplification of cDNA ends polymerase chain reaction and Gibson assembly techniques to carry out SMV full-length genome amplification from susceptible soybeans and constructed an infectious cDNA clone for SMV. The genome of the SMV Shanxi isolate (SMV-SX) consists of 9,587 nt and encodes a polyprotein consisting of 3,067 aa. SMV-SX and SMV-XFQ008 had the highest nucleotide and amino acid sequence identities of 97.03% and 98.50%, respectively. A phylogenetic tree indicated that SMV-SX and SMV-XFQ018 were clustered together, sharing the closest relationship. We then constructed a pSMV-SX infectious cDNA clone by Gibson assembly technology and used this clone to inoculate soybean and Ailanthus altissima; the symptoms of these hosts were similar to those caused by the virus isolated from natural infected plant tissue. This method of construction not only makes up for the time-consuming and laborious defect of traditional methods used to construct infectious cDNA clones, but also avoids the toxicity of the Potyvirus special sequence to Escherichia coli, thus providing a useful cloning strategy for the construction of infectious cDNA clones for other viruses and laying down a foundation for the further investigation of SMV cross-family infection mechanisms.
Sim, Mi-Ok;Jang, Ji Hun;Jung, Ho-Kyung;Hwang, Taeyeon;Kim, Sunyoung;Cho, Hyun-Woo
The Korea Journal of Herbology
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v.34
no.6
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pp.91-97
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2019
Objective : To establish a reliable tool between for the distinction of original plants of Sanguisorbae Radix, we analyzed the complete chloroplast genome sequence of Sanguisorbae Radix and identified single nucleotide polymorphisms (SNPs). Materials and methods : The chloroplast genome sequence of Sanguisorba officinalis, Sanguisorba tenuifolia f. alba (Trautv. & Mey.) Kitam and Sanguisorba tenuifolia Fisch. ex Link obtained using next-generation sequencing technology were described and compared with those of other species to develop specific markers. Candidate genetic markers were identified to distinguish species from the chloroplast sequences of each species using Modified Phred Phrap Consed and CLC Genomics Workbench programs. Results : The structure of the chloroplast genome of each sample that had been assembled and verified was circular, and the length was about 155 kbp. Through comparative analysis of the chloroplast sequences, we found 220 nucleotides, 158 SNPs, and 62 Indel (insertion and/or deletion), to distinguish Sanguisorba officinalis, Sanguisorba tenuifolia f. alba (Trautv. & Mey.) Kitam and Sanguisorba tenuifolia Fisch. ex Link. Finally, 15 specific SNP genetic markers were selected for the verification at positions. Avaliable primers for the dried herb, which is used as medicine, were used to develop the PCR amplification product of Sanguisorbae Radix to assess the applicability of PCR analysis. Conclusion : In this study, we found that Fendel-qPCR analysis based on the chloroplast DNA sequences can be an efficient tool for discrimination of Sanguisorba officinalis, Sanguisorba tenuifolia f. alba (Trautv. & Mey.) Kitam and Sanguisorba tenuifolia Fisch. ex Link.
Na Ra Jeong;Dagyeong Jeong;Gwan-Seok Lee;Wonhoon Lee
Korean journal of applied entomology
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v.62
no.4
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pp.347-354
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2023
Mythimna loreyi (Duponchel, 1827) (Lepidoptera: Noctuidae) is a pest that damages agricultural plants, such as rice, wheat, and maize. We sequenced the entire 15,314-bp mitochondrial genome of this species. It has a typical set of genes (13 protein-coding genes, two ribosomal RNA genes, and 22 transfer RNA genes) as well as one major non-coding A+T-rich region. Using concatenated sequences of 13 protein-coding genes and two rRNAs (13,376 bp, including gaps), phylogenetic analysis demonstrated that the sister relationship between M. loreyi and M. separata had the highest nodal support. The monophyly of each family (Noctuidae, Euteliidae, Nolidae, Erebidae, and Notodontidae) of the superfamily Noctuoidea was supported by the highest nodal support.
Jo, Yeonhwa;Choi, Hoseong;Bae, Miah;Kim, Sang-Min;Kim, Sun-Lim;Lee, Bong Choon;Cho, Won Kyong;Kim, Kook-Hyung
The Plant Pathology Journal
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v.33
no.5
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pp.478-487
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2017
Soybean is the most important legume crop in the world. Several diseases in soybean lead to serious yield losses in major soybean-producing countries. Moreover, soybean can be infected by diverse viruses. Recently, we carried out a large-scale screening to identify viruses infecting soybean using available soybean transcriptome data. Of the screened transcriptomes, a soybean transcriptome for soybean seed development analysis contains several virus-associated sequences. In this study, we identified five viruses, including soybean mosaic virus (SMV), infecting soybean by de novo transcriptome assembly followed by blast search. We assembled a nearly complete consensus genome sequence of SMV China using transcriptome data. Based on phylogenetic analysis, the consensus genome sequence of SMV China was closely related to SMV isolates from South Korea. We examined single nucleotide variations (SNVs) for SMVs in the soybean seed transcriptome revealing 780 SNVs, which were evenly distributed on the SMV genome. Four SNVs, C-U, U-C, A-G, and G-A, were frequently identified. This result demonstrated the quasispecies variation of the SMV genome. Taken together, this study carried out bioinformatics analyses to identify viruses using soybean transcriptome data. In addition, we demonstrated the application of soybean transcriptome data for virus genome assembly and SNV analysis.
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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2003.10a
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pp.117.3-118
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2003
We tested for the presence of double-stranded RNA (dsRNA) mycovirus in 827 Fusarium graminearum isolated from diseased barley and maize. dsRNA mycoviruses with various sizes were isolated. Of them, it was previously reported that dsRNA from DK2l isolate had pronounced morphological changes, including reduction in mycelial growth, increased to red pigmentation, reduced virulence and sporulation. (Chu et al., Appl. Environ. Microbiol. 2002). For better understanding of this hypovirulence associated with DK2l dsRNA virus, we determined the complete nucleotide sequence of dsRNA genome and named Fusarium hypovirus DK2l strain (Fhv-DK2l ). Genomic RNA of Fhv-DK2l was determined to be 6625 nucleotides in length excluding the poly (A) tail and contained three putative open reading frame. RNA-dependent RNA polymerase (RdRp) and helicase domain were expected in ORF A, 54 to 4709 nucleotide position. ORE B, 4752 to 5216 nucleotide position, and ORF C, 5475 to 6578 nucleotide position, were predicted to encode 16.7kDa and 41.3kDa protein respectively each. We could not detect any conserved domains from these two proteins. Phylogenetic analysis showed Fhv-DK2l was related to Cryphonectria hypovirus 3. Ten additional isolates were found that were infected with dsRNA mycoviruses. These mycoviruses contain 2 to 4 different segments of dsRNAs with the size range of approximately 1.7 to 10-kbp in length. The presence of dsRNAs isolates did not affect colony morphology and were transmissible through conidia and ascospore with incidence of 30-100%. These results indicate that there is genomic diversity of dsRNA mycoviruses that infect F. graminearum isolates and that impact of virus infection on host's morphology and virulence is determined by the interaction between dsRNAs and the fungal host, not by the mere presence of the dsRNAs
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[게시일 2004년 10월 1일]
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