Kim, Jung-Mi;Song, Ha-Yeon;Yun, Suk-Hyun;Lee, Hyun-Suk;Ko, Han-Kyu;Kim, Dae-Hyuk
한국균학회소식:학술대회논문집
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2015.11a
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pp.37-37
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2015
dsRNA was found in malformed cultures of Lentinula edodes strain FMRI0339, one of the three most popular sawdust cultivated commercial strains of shiitake, and was also found in healthy-looking fruiting bodies and actively growing mycelia. Cloning of the partial genome of the dsRNA revealed the presence of the RdRp sequence of a novel L. edodes mycovirus (LeV), and sequence comparison of the cloned amplicon showed an identical sequence to known RdRp genes of LeV found in strain HKA. The meiotic stability of dsRNA was examined by measuring the ratio of the presence of dsRNA among sexual monokaryotic progeny. More than 40% of the monokaryotic progeny still contained the dsRNA, indicating the persistence of dsRNA during sexual reproduction. Comparing the mycelia growth of monokaryotic progeny suggested that, although variations in the growth rate existed among progeny and virus infection was observed in highly actively growing progeny, there appeared to be a tendency toward a lower frequency of virus incidence in actively growing progeny. This study attempted to cure the edible mushroom L. edodes strain FMRI0339 of the L. edodes mycovirus (LeV) in order to obtain an isogenic virus-free fungal strain as well as a virus-infected strain for comparison. Mycelial fragmentation, followed by being spread on a plate with serial dilutions resulted in a virus-free colony. Viral absence was confirmed with gel electrophoresis after dsRNA-specific virus purification, Northern blot analysis, and PCR using reverse transcriptase (RT-PCR). Once cured, all of fungal cultures remained virus-free over the next two years. Interestingly, the viral titer of LeV varied depending on the culture condition. The titer from the plate culture showed at least a 20-fold higher concentration than that grown in the liquid culture. However, the reduced virus titer in the liquid culture was recovered by transferring the mycelia to a plate containing the same medium. In addition, oxygen-depleted culture conditions resulted in a significant decrease of viral concentration, but not to the extent seen in the submerged liquid culture. Although no $discernable phenotypic changes in colony morphology were observed, virus-cured strains showed significantly higher growth rates and mycelial mass than virus-infected strains. We were also explored effects of LeV on fruiting body formation and mushroom yield. The fruiting body formation yield of virus-free L. edodes was larger than virus-infected L. edodes. These results indicate that LeV infection has a deleterious effect on mycelial growth and fruiting body formation. In addition, we have been investigated host-parasite interaction between L. edodes and its mycovirus interaction to study viral mechanism by establishment of proteomics.
This study was carried out to investigate the feeding effects of the dietary supplementation of fermented spent mushroom (Pleurotus eryngii) substrates with Bacillus amyloliquefaciens CS47 and Saccharomyces cerevisiae (F-SMS) on growth performance and carcass characteristics of Hanwoo steers. Thirty two Hanwoo steers were allocated into two feeding groups and assigned equally to two dietary treatments; Control (commercial formula feed for Hanwoo steers and rice straw) and TMR including 30% F-SMS. The nutritional values of TMR including 30% F-SMS was higher crude protein (11.67%) and TDN (72.11%) than rice straw, but not significantly different from commercial formula feed (p<0.05). Feed intake was significantly greater in the TMR including 30% F-SMS than the control (p<0.05), but body weight gain and carcass grades were not influenced by the experimental diets. Based on this study, fermented spent mushroom (Pleurotus eryngii) substrate with Bacillus amyloliquefaciens CS47 and Saccharomyces cerevisiae is may be used as an ingredient of feed in TMR for Hanwoo steer.
Lentinus lepideus, known as train wrecker fungus, has been used for nutritional and medicinal purposes. Recently, commercial cultivation technique and a new cultivar of the mushroom were developed. To investigate the genetic diversity and phylogenetic relationship for identifying the mushroom strains and cultivar, one commercial and 13 strains of Lentinus lepideus from different geographical regions of Korea were analyzed by ITS regions of rDNA and RAPD of genomic DNA. Three strains of Lentinus edodes were also used for the analysis. The size of the ITS1 and ITS2 regions of rDNA from the different strains varied from 173 to 179 bp and 203 to 205 bp, respectively. The sequence of ITS1 was more variable than that of ITS2, while the 5.8S sequences were identical with 156 base pairs. A phylogenetic tree based on the ITS region sequences indicated that selected strains could be classified into four clusters, while 3 strains of L. edodes was divided into a new cluster. Ten primers out of 20 arbitrary primers used in the RAPD-PCR efficiently amplified the genomic DNA. The numbers of amplified DNA bands varied with the primers and strains, with polymorphic DNA fragments in the range from 0.2 to 2.6 kb. The results showed that phylogenetic relationship among Korean strains of Lentnus lepideus is high, but genetic diversity is low.
Park, Hye-Sung;Min, Gyong-Jin;Lee, Eun-Ji;Lee, Chan-Jung;Kong, Won-Sik
Journal of Mushroom
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v.17
no.4
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pp.205-210
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2019
This study was conducted to elucidate the optimal nitrogen content for each variety of oyster mushroom (Pleurotus ostreatus) by investigating the change in the characteristics of fruiting body according to the nitrogen content of the sawdust media, and to use the results as the basic data for cultivation of high quality oyster mushroom. The nitrogen content was adjusted to 1.3%, 1.6%, 1.8% and 2.3%, and at each condition, mycelial growth was observed, which showed that the nitrogen content did not affect the rate of mycelial growth and density substantially. In the investigation of the characteristics of fruiting body, at the 1.8% nitrogen content, Chunchu No.2 showed the pileus diameter of 27 mm, and the stipe diameter and length of 11 mm and 61 mm, respectively, and the measurement of its color values revealed that the brightness of the pileus and the stipe was 31 and 80, respectively, offering the best commercial value, and yielding 25 valid stipes, which was the largest number. Likewise, at the 1.8% nitrogen content, Heuktari also showed the excellent growth characteristics including the pileus diameter of 29 mm and the stipe diameter and length of 10 mm and 68 mm, respectively, and the superb color values of the brightness of 37 at the pileus and 78 at the stipe. Moreover, the number of valid stipes was also found to be the highest with 19. In terms of morphological characteristics such as the pileus diameter and color, Soltari also produced the best mushrooms at the 1.8% nitrogen content and the number of valid stipes was high with 22. In summary, irrespective of varieties of oyster mushroom, high quality products could be cultivated at the nitrogen content of 1.8%.
Seo, Kyoung-In;Jang, Kab-Yeul;Yoo, Young-Bok;Park, Soon-Young;Kim, Kwang-Ho;Kong, Won-Sik
The Korean Journal of Mycology
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v.39
no.1
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pp.22-30
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2011
Weonhyeong is one of important commercial strains. It has good characteristics of bundle formation, grey colored pilei and high productivity. We previously reported grouping of 70 strains of Pleurotus ostreatus in which one group contained 35 strains including Weonhyeong. Four strains in that group showed same profiles implicating no variety distinction for mushroom cultivation. Now we developed a specific marker for identification of Weonhyeong. Sequence Characterized Amplified Region (SCAR) marker was developed from the RAPD amplicon. SCAR marker 'S-OPO5' produced only one band specific to 2183, 2240, 2595 and 2725 strains showing similar banding patterns to Weonhyeong in RAPD-PCR results. The sequence of 'S-OPO5' marker was unknown when compared with the data in the Genbank using BLASTN. BLASTX results indicated that the marker showed significant alignment with the protein sequences in Tricholoma bakamatsutake reverse transcriptase. The results indicate that this new SCAR marker ('S-OPO5') will be valuable to distinguish the Weonhyeong similar strains from Pleurotus spp.
Seo, Kyoung-In;Yoo, Young-Bok;Jang, Kab-Yeul;Shin, Pyung-Gyun;Oh, YounLee;Kim, Kwang-Ho;Kong, Won-Sik
The Korean Journal of Mycology
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v.41
no.1
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pp.14-20
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2013
We already reported four groups which contains some similar strains based on URP-PCR in the previous paper. The objective of this study was to confirm those strains by the amplified fragment length polymorphism (AFLP) and vegetative compatibility group (VCG). AFLP analysis showed no difference among these strains except ASI 2595 and 2183 in Weonhyeong group and ASI 2829 in Suhan group. They showed specific DNA bands only in the result of P + AG/M + AAG and P + GT/M + ATG primer combinations out of eight different combinations. The AFLP primers produced a total of 330 fragments between 80 and 1000 bp in length for 31 Pleurotus ostreatus strains. At a genetic similarity of 0.96, the UPGMA analysis separated the isolates into four distinct clusters. Each group was classified by similar strains. Confrontation test by vegetative compatibility groups (VCGs) also showed distinct line between strains from different groups, but no line between similar strains within the cluster. Our results indicate that most of similar strains was not distinctness. Thus, similar strains are considered to be very close on the genealogy of their parent or same strain with different name.
This study aimed to assess the feasibility of composting spent mushroom substrate (SMS) materials of Lentinula edodes (Le), Hericium erinaceus (He), and Pleurotus ostreatus (Po). The different SMSs were composted for 7 to 10 days at high temperatures over 50℃; the composting procedure was completed in 30 days. A maturity test was conducted using the radish seed germination index and CoMMe-100. The composted SMS (CSMS) from Le and He showed gemination indices of 130% and 81%, respectively, that satisfied the criteria of maturity standard (gemination index over 70%) and the CoMMe-100 analysis. The physicochemical changes of CSMSs included an increase in the pH range from 4-5 to 6-7, slight reduction in the EC to 1-1.4 dS/m, and an organic content of 36.9% in LeCSMS. In LeCSMS, the contents of N, P, and K were 1.2%, 2.3%, and 0.77%, respectively, and heavy metals were detected below the standard value in all CSMSs; the Ca and Mg contents in the CSMSs were increased from 30% to 60% when compared to those in the SMSs. The C/N ratio (from 26-33) in LeSMS and HeSMS decreased to 15.3-15.9 in CSMSs. The growth effect of LeCSMS treatment on pepper seedlings was 60% higher than that in the control groups, one of which was treated with commercial organic compost; the former showed a superior growth effect on the leaf width, leaf length, and leaf number compared to other control groups. In conclusion, LeCSMS and HeCSMS could be utilized as compost resources capable of efficient soil amendment and plant growth promotion.
Kim, Min-Kook;Lee, Hong-Gu;Park, Jeong-Ah;Kang, Sang-Kee;Choi, Yun-Jaie
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.24
no.4
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pp.493-499
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2011
The objective of this study was to find the way to prolong the storage time of sawdust-based oyster mushroom (Pleurotus osteratus) spent substrate (OMSS) by fermenting with potential probiotic microorganisms to recycle the otherwise waste of mushroom farms. To this purpose, lactic acid bacteria (LAB) were screened to select the best lactic acid-producing strains. Three strains of LAB (Lactobacillus plantarum Lp1', Pediococcus acidilacticii Pa193, L. plantarum Lp2M) were selected and in mixture they lowered the pH of the fermented OMSS to 3.81. fOMSS (fermented sawdust-based oyster mushroom spent substrate) could be stored at room temperature for at least 17 days without any deterioration of feed quality based on the pH, smell, and color. In dry matter disappearance rate in situ, commercial TMR (total mixed ration), OMSS and OMMM (oyster mushroom mycelium mass) showed no significant differences between the samples after 6, 12 and 24 h incubation except for 48 h. Two separate field studies were performed to test the effects of fOMSS supplement on the growth performance of postweaning Holstein calves. Field trials included groups of animals feeding calf starter supplemented with: Control (no supplement), AB (colistin 0.08% and oxyneo 110/110 0.1%), fOMSS (10% fOMSS) and fConc (10% fermented concentrate) and DFM (direct-fed microbials, average $10^9$ cfu for each of three LAB/d/head). Growth performance (average daily gain and feed efficiency) of the fOMSS supplement group was higher than that of AB followed by fConc and DFM even though there was no statistically significant difference. The Control group was lower than any other group. Various hematological values including IgG, IgA, RBC (red blood cell), hemoglobin, and hematocrit were measured every 10 days to check any unusual abnormality for all groups in trial I and II, and they were within a normal and safe range. Our results suggest that sawdust-based OMSS could be recycled after fermentation with three probiotic LAB strains as a feed supplement for post-weaning calves, and fOMSS has the beneficial effects of an alternative to antibiotics for a growth enhancer in dairy calves.
This study was carried out to develop the best medium of new oyster mushroom for bottle culture. The new oyster mushroom cv. Miso is a Pleurotus ostreatus developed at the Chungnam Agricultural Research & Extension Services. For the bottle culture media, poplar sawdust+beet pulp+cottonseed meal (5:3:2), poplar sawdust+wheat husk meal (8:2), poplar sawdust+beet pulp+cottonseed meal (6:2:2), poplar sawdust+beet pulp+cottonseed meal (4:4:2), and poplar sawdust+beet pulp+wheat husk meal (7:1:2) were used in 850cc PP bottle. The pH was 5~6 and the C/N ratio 19.7~28.3 in bottle culture media. The time of pinhead formation was 5 to 6 days. For the fruiting body formation after inoculation took 29~31 days. The yield of fruiting body of poplar sawdust+beet pulp+wheat husk meal (7:1:2) medium was the highest at 110.4g/bottle compared to other media. Therefore, such cultivation medium would be appropriate for the commercial production of bottle culture in the new oyster mushroom 'Miso'.
The lignocellulytic enzymes including a-amylase (EC 3.2.1.1), lignin peroxidase (EC 1.11.1.14), laccase (EC 1.10.3.2), xylanase (EC 3.2.1.8), ${\beta}$-xylosidase (EC 3.2.1.37), ${\beta}$-glucosidase (EC 3.2.1.21) and cellulase (EC 3.2.1.4) were extracted from spent mushroom compost (SMC) of Pleurotus eryngii. Different extraction buffers and conditions were tested for optimal recovery of the enzymes. The optimum extraction was shaking incubation (200 rpm) for 2 h at $4^{\circ}C$. ${\alpha}$-Amylase was extracted with the productivity range from 1.20 to 1.6 Unit/SMC g. Cellulase was recovered with the productivity range from 2.10 to 2.80 U/gf. ${\beta}$-glucosidase and ${\beta}$-xylosidase productivities showed lowest recovery producing 0.1 U/g and 0.02 U/g, respectively. The P. eryngii SMCs collected from three different mushroom farms showed different recovery on laccase and xylanse, cellulase. Furthermore, the water extracted SMC was compared to commercial enzymes for its industrial application in decolorization and cellulase activity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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