Conjugated linoleic acid (CLA) consists of several geometric isomers of linoleic acid. CLA is found in foods derived from ruminants and exhibits strong anticarcinogenic effects in a variety of animal models. Matrix metalloproteinases (MMPs) play a key role in cancer progression. Specifically, MMP-2 and -9, which hydrolyze the basal membrane type IV collagen, are involved in the initial breakdown of collagen and basement membrane components during tumor growth and invasion. However, the effects of CLA on cancer cell motility and MMP expression and activity are not currently well known. Therefore, the present study examined whether CLA reduces the activity of MMP and cell motility in SW480 and SW620 cells, the human colon cancer cell lines. Gelatin zymography and Western blot analysis revealed that phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) induced the activity and protein expression of Mr 92,000 MMP-9 in both cell lines. To examine whether CLA inhibits the MMP activity, cells were incubated with 100 ngfmL PMA in the presence of various concentrations of CLA. PMA-induced MMP-9 activity was decreased by 20 $\mu$ M CLA in SW480 cells, and by 10 $\mu$ M and 20 $\mu$ M CLA in SW620 cells. Results from the Hoyden chamber assay showed that cell motility was increased by PMA and that PMA-induced cell motility was significantly decreased by 20 $\mu$ M CLA in SW480 cells. These results indicate that CLA may reduce the motility and MMP activity in human colon cancer cells.
This study was performed to evaluate the effect of Kangwhal-Sokdan tang(KS) on osteoblast function and gene expression. The osteoblast separated from the murine calvariae and MG-63 cell were cultivated to evaluate the cell function and gene expression. The results were summarized as followes. 1) KS increased cell proliferation of murine calvarial cell. 2) KS increased protein synthesis, collagen synthesis and ALP activity of murine calvarial cell. 3) KS increased the survival rate of murine calvarial cell. 4) KS increased the expression of calcitonin receptor and PTH receptor. 5) KS increased the expression of PKA and PKC. 6) KS decreased the expression of $PLA_2$, COX, $PGE_2$ synthase, but increased prostacyclin synthase. 7) KS increased the expression of collagen(type IV) gene. It is concluded that KS might improve the osteoporosis resulted from augumentation of osteoblast proliferation and gene expression.
혈관형 엘러스-단로스 증후군은 상염색체 우성 유전질환으로 COL3A1 유전자의 돌연변이로 인해 제 3형 콜라겐 합성이 결핍되면서 피부, 관절, 혈관, 폐, 내장 등에서 증상이 나타나는데 생명에 위협이 되는 합병증인 동맥 파열이나 장 천공과 같이 발생한 뒤에 진단이 늦게 내려지는 경우가 많다. 본 증례는 11세에 장천공 및 복막염의 수술력이 있는 16세 남아가 각각 운동과 경미한 손상 이후 발생한 두 차례의 근혈종으로 내원하여 시행한 COL3A1 유전자 검사에서 새로운 돌연변이 c.2931+2dupT가 발견되어 보고하는 바이다.
Electrical stimulation among several factors that influence bone remodeling has been studied by many investigators with great enthusiasm in orthodontic field. The action mechanisms of Pulsed Electromagnetic Field (PEMF) are different from those of the conventional electrode application method in that PEMF induces endogenous current in the living tissues. PEMF is known to have the healing effect in nonunion of bone and osteoporosis. It is widely used in orthopaedic scopes and the possibility of using the method in clinical orthodontics Is also conceivable. But the exact mechanisms by which the PEMF exerts its effects are not clearly understood. Therefore, the author wanted to see the effect of PEMF on five groups of rat calvarial cells obtained by sequential enzyme digestion method, and observed the changes in enzyme activation, collagen synthesis and $^3H-thymidine$ incorporation. The results were as follows: 1. Under the effect of PEMF, there were no changes in the alkaline phosphatase activity in five groups of cell populations. 2. Both the PEMF group and the PTH with PEMF group shelved no changes in acid phosphatase activities and there were no differences between two experimental groups. 3. Under the effect of PEMF, there was significant increase of collagen synthesis in the group V cell population. 4. Under the effect of PEMF, there were significant increases of $^3H-thymidine$ incorporation in the group IV and V cell populations.
Purpose: The purpose of this study was to assess the adhesiveness and cytotoxicity of 3, 4-dihydroxyphenylalanine (DOPA), and to evaluate the role of collagen membrane with DOPA in the guided bone regeneration. Materials and Methods: Peel resistance and cell cytotoxicity test were performed. Four defect types in nine rabbit calvaria were randomly allocated: i) control, ii) membrane, iii) deproteinized porcine bone mineral (DPBM) covered by membrane with DOPA, and iv) DPBM covered by membrane with cyanoacrylate. Animals were sacrificed at 2 (n=4) and 8 weeks (n=5) for microcomputed tomography and histomorphometric analysis. DOPA showed low peel resistance but high cell viability. Result: Cyanoacrylate and DOPA groups showed significantly higher mineralized tissue volume (MTV) compared to control and membrane groups at 2 weeks (P<0.05). At 8 weeks, DOPA group showed the highest MTV. Significantly higher new bone area was found in DOPA group at 8 weeks (P<0.05). Bone formation increased from 2 to 8 weeks in DOPA group (P<0.05). Conclusion: DOPA showed high cell viability and in vivo study revealed predictable performance in bone regeneration.
Src family kinases (SFKs), an important group of non-receptor tyrosine kinases, are suggested to be excessively activated during various types of tissue fibrosis. The present study investigated the effect of KF-1607, an orally active and a newly synthesized Src kinase inhibitor (SKI) with proposed low toxicity, in preventing the progression of renal interstitial fibrosis. Unilateral ureteral obstruction (UUO) surgery was performed in 6-week-old male C57BL/6 mice to induce renal interstitial fibrosis. Either KF-1607 (30 mg/kg, oral gavage) or PP2 (2 mg/kg, intraperitoneal injection), a common experimental SKI, was administered to mice for seven days, started one day prior to surgery. UUO injury-induced SFK expression, including Src, Fyn, and Lyn kinase. SFK inhibition by KF-1607 prevented the progression of tubular injury in UUO mice, as indicated by decreases in albuminuria, urinary KIM-1 excretion, and kidney NGAL protein expression. Renal tubulointerstitial fibrosis was attenuated in response to KF-1607, as shown by decreases in α-SMA, collagen I and IV protein expression, along with reduced Masson's trichrome and collagen-I staining in kidneys. KF-1607 also inhibited inflammation in the UUO kidney, as exhibited by reductions in F4/80 positive-staining and protein expression of p-NFκB and ICAM. Importantly, the observed effects of KF-1607 were similar to those of PP2. A new pan Src kinase inhibitor, KF-1607, is a potential pharmaceutical agent to prevent the progression of renal interstitial fibrosis.
In order to develop a suitable secondary renal disease model and diagnostic markers of renal disease in the rat, the change of PIIIP (aminoterminal procollagen III peptide) in serum and hydroxyproline levels in the renal tissue that reflect the synthesis of extracellular matrix (ECM) during development of experimental renal diseases were observed. Two types of experimental primary diseases, diabetes mellitus administrated by streptozotocin (STZ, 75 mg/kg, i.p.) and liver cirrhosis produced by bile duct ligation/scission (BDL/s) operation, were induced. The hydroxyproline level increased according to the high PIIIP and NCl(carboxyterminal procollagen IV peptide) in Western blot analysis as early as 1 week in the STZ treated-rat kidney. Increased renal ECM was observed at 15 weeks in STZ and BDL/s model under the microscopic examination. High PAS positive reaction was found in capillary basement membrane in STZ treated-rats and mesangium in BDL/s operated rats at this time, showing the histological characteristics of diabetic nephropathy and cirrhotic glomerulonephritis in human, respectively. Such secondary renal failure were supported by additional tests including urinalysis and renal function test. The serum PIIIP detected by ELISA was a useful parameter to estimate synthesis rate of renal ECM during development of renal disease without extrarenal fibrosis i.e. liver cirrhosis in rats. This study is proposed that STZ treatment or BDL/s operation may be a suitable experimental animal model for the induction and development of chronic secondary renal diseases. Morover, it was found that hydroxyproline level in renal tissues was a good parameter of the change of renal ECM at the early stage of the diseases without apparent histological changes. Especially, serum PIIIP could be a choice as a diagnostic or prognostic marker during the development of renal diseases in rats.
본 실험에서는 치주질환 발병에 위험인자이고 창상치유에 위해한 영향을 미치는 흡연이 치주조직에 미치는 반응을 규명하기 위해 치은 섬유아세포의 중요한 기능인 교원질 합성과 분비된 단백질 분해에 영향을 주는 효소활성도를 중심으로 Nicotine과 NNK가 이 세포에 미치는 영향을 관찰하고 또한Nicotine이 NNK로 대사되어 작용을 나타내는 것인지, Nicotine과 NNK가 서로 다른 경로를 통하여 치은 섬유아 세포에 영향을 주는지를 규명하고자 이들 화합물의 돌연변이성 실험, 세포 증식을 보기위한 MTT test와 교원질과 collagenase의 mRNA 수준 및 교원질 분해 효소의 효소활성들을 실험하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. Nicotine은 대사 활성계의 존재 여부와 상관없이 돌연변이성을 나타내지 않았고 NNK 의 경우에는 그 자체로는 돌연변이성이 없었으나, 대사활성계가 존재하는 경우에 농도의존적으로 돌연변이성을 나타내었다. 2. 증식능 실험에서 흡연자의 세포증식능은 비흡연자에 비해 감소되었다. 3. 비흡연자의 치은 섬유아세포에 Nicotine 과 NNK를 처리한 경우에 대조군에 비해농도 의존적으로 세포 증식능이 감소되었으며, 고농도에서 Nicotine의 경우 세포 독성을 나타내었으나, NNK는 세포독성을 나타내지 않았다. 4. 교원질 분자의 mRNA 수준에 대한 Nicotine의 효과는 proa1과 pro ${\alpha}2$ 모두에 영향을 주지 않았고, NNK는 pro ${\alpha}1$의 경우에는 감소하였으나, proa2에는 영향을 주지 않았다. 5. Collagenase의 mRNA 수준에 대한 효과에서 Nicotine은 없었으나 NNK는 감소하였다. 6. 교원질 분해 효소에 대한 Nicotine과 NNK의 효과는 I형 교원질의 분해 효소를 알기 위한 collagenase 효소 활성의 경우에는 효과가 모두 증가되었으나, IV형 교원질의 분해 효소인 gelatinase 효소 활성에는 영향을 주지 않았다. 또한 흡연자의 collagenase 효소활성은 비흡연자의 치은 섬유아세포에 Nicotine이나 NNK를 처리한 경우와 비슷한 수준으로 증가되었다. 이상의 결과로 보아 Nicotine과 NNK는 모두 치은 섬유아세포에 영향을 주어 교원질의 양을 감소시키며, 그 기전은 서로 다른 경로를 통하여 일어나는 것으로 사료된다.
극심하고 지속적인 자외선에의 노출은 정상적인 피부구조를 파괴하는 다양한 피부 광노화 과정을 야기한다. 자외선은 인체 피부에서 세포외기질의 구성성분을 분해시키는 기질 분해효소인 matrix metalloproteinases(MMPs)의 발현을 활성화시키고, 콜라겐 합성은 감소시킴으로써 피부의 탄력과 구조적 치밀도를 약화시켜 궁극적으로 피부주름을 생성한다. 본 연구에서는 이러한 피부 광노화 현상을 완화시키는 소재로서 영실의 효능을 검증하고자 하였다. 먼저 인간 섬유아세포주인 Hs68을 이용하여 영실의 세포증식 촉진효능을 확인하였다. 여기에 더해 영실이 activator protein (AP)-1 전사인자의 억제를 통해 MMP의 발현을 감소시킴을 mRNA 및 단백질 수준에서 검증하였다. 또한, 진피층을 구성하는 타입 I형 콜라겐과 표피-진피 경계부를 단단히 고정시키는 역할을 하는 타입 IV형 콜라겐 역시 영실에 의해 발현이 증가하며, 자외선에 의한 염증반응의 억제에도 영실이 효과적으로 작용하는 것을 확인할 수 있었다. 결론적으로 본 연구를 통해 영실이 자외선에 의한 피부노화와 주름생성을 효과적으로 개선할 수 있는 가능성을 가짐으로써 항노화, 항염증 및 항주름 소재로서 화장품에 응용될 수 있을 것으로 기대된다.
The aim of the study was to investigate recovery effects of Rehmannia, which has been used clinically for chronic renal failure therapy. Mice had 5/6 nephrectomy to induce chronic renal failure. The results were as follows: 1. The protein amount in urine per 24hrs of the Rehmannia-treated group was significantly reduced compared to the control. 2. The albumin amount in the blood of the Rehmannia-treated group significantly increased compared to the control. The creatinine. total-cholesterol, LDL-cholesterol and triglyceride levels in serum of the Rehmannia-treated group as compared to the control were significantly inhibited. 3. The structural change in kidney of the Rehrnannia-treated group was significantly inhibited compared to the control. 4. The factor (macrophage/monocyte antigen (ED-1), type IV collagen and angiotensin II type 1 ($AT_1$) receptor) of the Rehmanala-treated group was significantly inhibited compared to the control, which induced the structural change in kidneys. The above results suggest that Rehmannia partially improved kidney function.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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