• Journal of Animal Science and Technology
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• 제58권9호
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• pp.33.1-33.7
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• 2016

Background: The continuing growth of the ethanol industry has generated large amounts of various distillers grains co-products. These are characterized by a wide variation in chemical composition and ruminal degradability. Therefore, their precise formulation in the ruminant diet requires the systematic evaluation of their degradation profiles in the rumen. Methods: Three distillers grains plus soluble co-products (DDGS) namely, corn DDGS, high-protein corn DDGS (HP-DDGS), and wheat DDGS, were subjected to an in situ trial to determine the degradation kinetics of the dry matter (DM) and crude protein (CP). Soybean meal (SBM), a feed with highly degradable protein in the rumen, was included as the fourth feed. The four feeds were incubated in duplicate at each time point in the rumen of three ruminally cannulated Hanwoo cattle for 1, 2, 4, 6, 8, 12, 24, and 48 h. Results: Wheat DDGS had the highest filterable and soluble A fraction of its DM (37.2 %), but the lowest degradable B (49.5 %; P < 0.001) and an undegradable C fraction (13.3 %; P < 0.001). The filterable and soluble A fraction of CP was greatest with wheat DDGS, intermediate with corn DDGS, and lowest with HP-DDGS and SBM; however, the undegradable C fraction of CP was the greatest with HP-DDGS (41.2 %), intermediate with corn DDGS (2.7 %), and lowest with wheat DDGS and SMB (average 4.3 %). The degradation rate of degradable B fraction ($%\;h^{-1}$) was ranked from highest to lowest as follows for 1) DM: SBM (13.3), wheat DDGS (9.1), and corn DDGS and HP-DDGS (average 5.2); 2) CP: SBM (17.6), wheat DDGS (11.6), and corn DDGS and HP-DDGS (average 4.4). The in situ effective degradability of CP, assuming a passage rate of $0.06h^{-1}$, was the highest (P < 0.001) for SBM (73.9 %) and wheat DDGS (71.2 %), intermediate for corn DDGS (42.5 %), and the lowest for HP-DDGS (28.6 %), which suggests that corn DDGS and HP-DDGS are a good source of undegraded intake protein for ruminants. Conclusions: This study provided a comparative estimate of ruminal DM and CP degradation characteristics for three DDGS co-products and SBM, which might be useful for their inclusion in the diet according to the ruminally undegraded to degraded intake protein ratio.

• 치위생과학회지
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• 제15권2호
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• pp.209-219
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• 2015

치주질환과 관련된 세균인 S. gordonii, F. nucleatum 및 P. gingivalis의 상호작용이 군집 형성에 미치는 영향을 알아보고자 trypticase soy hemin menadione broth에 단독 및 열처리한 사균과 혼합 분주하여 혐기성 균배양조를 통해 $37^{\circ}C$ $CO_2$ 배양기에서 anearobic gas pack 하에 7일간 배양하였다. 군집 형성 정도를 확인하기 위해 흡광도를 측정하였으며, 군집 구조 및 형태를 확인하기 위해 주사전자현미경으로 관찰하였다. P. gingivalis의 병원성에 미치는 영향을 확인하기 위해 real-time RT-PCR를 통해 gingipain인 HRgpA를 생성하는 rgpA 유전자에 대한 발현 분석을 시행하여 다음과 같은 결론을 얻었다. S. gordonii와 P. gingivalis의 군집 형성은 다른 사균들에 의해 증가하였다. F. nucleatum의 경우 P. gingivalis 사균에 의해 증가하는 양상을 보였으나 S. gordonii 사균에 의해서는 군집 형성이 감소되었다. 따라서 본 실험에 사용된 균주는 군집 형성 시 상호작용 인자뿐 아니라 세균 입자 그 자체 등을 통해서도 서로 영향을 주는 것으로 생각된다.

• Journal of Periodontal and Implant Science
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• 제23권1호
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• pp.77-96
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• 1993

정상치아와 이환치아 및 구연산에 의하여 탈회한 치근면에대한 치주인대세포의 부착상태를 비교관찰 하기 위하여 정상치아와 이환치아를 취하여 정상군, 이환치근의 치근면활택술군 및 구연산처리군으로 분류하고 시험관적 실험을 통하여 관찰하였다. 세포부착실험전 각 군의 치근면의 형태를 주사전자현미경을 이용하여 관찰하였으며, 사람의 정상소구치에서부터 얻어진 치주인대세포를 배야하여 각 군의 절편을 함유한 조직배양기에 ml당 $4.5{\times}\;10^4$개의 세포를 가진 배양액 1ml씩을 넣고 동일조건하에서 30분, 1시간, 2시간, 6시간, 12시간 및 24시간 동안 배양한 후 세포의 부착이 일어난 후 상태를 주사전자현미경을 이용하여 관찰하였고, 세포증식정도를 알아보기 위하여 각 절편에 $5{\times}10^4$개의 세포가 함유된 배양액 1ml씩을 넣고 6시간동안 배양 후, 새 배양기에 옮기고 24, 48, 72시간동안 배양하여 trypsin 처리로 세포를 분리시킨 후 광학위상차 현미경을 이용, 치근단위면적당 증식된 세포수를 측정하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 세포부착실험전 각 군의 치근면 형태를 관찰하였을 때 구연산처리군에서는 교원섬유의 노출부위라고 여겨지는 미세한 돌출구조들을 관찰할 수 있었으며 상아세관의 노출부위라고 여겨지는 함몰양상이 치근활택술군에 비하여 현저하였고 정상치아군에서는 이러한 양상을 관찰할 수 없었다. 실험 각 군 및 대조군 사이에서 세포들의 형태적인 차이점은 분명하지 않았으나 구연산처리군에서 다른 군들보다 초기의 세포부착양상이 다소 빠르게 진행 됨이 관찰되었다. 세포배양 개시 후 6시간이 경과 한 후에는 모든 군에서 공히 세포의 형태가 초기의 구형의 형태에서 편평한 세포의 형태로 변화되기 시작함이 관찰 되었고 24시간 이후에는 모든 군에서 세포들이 치근면에 납작하게 부착되고 일반적인 섬 유아세포의 형태로 변화되어 셰포의 전개가 완성된 양상이 보였다. 세포증식율의 실험에서는 24시간 후 증식된 세포 수는 치근면활택술군에서 가장높게 나타났으며 정상군에서 가장 낮은 수치를 보였으며 48시간 및 72시간후 측정에서는 구연산처리군이 다른 군들에 비해 더 많은 수의 세포증식을 관찰할 수 있었으며 각 군간의 차이는 통계학적으로 유의하였다.

• Journal of Periodontal and Implant Science
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• 제25권3호
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• pp.587-602
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• 1995

치근면처리후 신부착에 관여하는 치주인대 세포의 부착을 비교하기위해 치근활택술만 시행한 군, 치근활택술후 구연산처리한 군, 치근활택술후 테트라사이클린처리한 군으로 분류하여 치주인대세포에 대한 부착양상을 관찰하였다. 세포증식실험에서는 각군의 시편을 조직배양지에 넣고 $1{\times}10^5$ cells/ml 농도의 치주인대세포를 1 ml씩 넣어 6시간 배양후 새 배양기에 옮겨 24시간, 28시간 및 72시간동안 배양하여 세포수를 측정하였고 세포부착후 주사전자현미경 관찰에서는 각각의 조직배양기에 1${\times}$104 cells/ml의 치주인대세포를 가진 배양액 1 ml씩을 넣어 배양하여 세포배양개시 푸 30분, 6시간, 24시간에 고정한후 탈수하고 임계점으로 건조시켜 주사전자현미경을 사용하여 세포부착양상을 관찰하였다. 세포증식실험에서 부착된 세포수가 24, 48, 72시간 모두에서 치근활택군, 구연산처리군, 테트라사이클린처리군순으로 높았고 치근활택군과 테트라사이클린처리군사이에 통계학적 유의성이 있었으며 24, 48시간에서는 구연산처리군과 테트라사이클린처리군사이에 통계학적 유의성이 있어 탈회군이 비탈회군보다 증가된 세포증식을 보였고 테트라사이클린처리군이 구연산처리군보다 증식된 세포수가 많았다. 주사전자현미경관찰에서 모든 군이 24시간 경과 후 전개가 거의 완성되는 양상을 보였고 테트라사이클린처리군의 초기전개가 다소 빠르게 진행됨이 관찰되었으며 테트라사이클린처리군과 구연산처리군이 세포가 부착되는 양상에서 치근활택군보다는 전개가 다소 진전된 양상을 나타내었으나 두 군간에는 유사한 전개가 진행되어 탈회면과 비탈회면의 차이는 나타나나 두 군간의 뚜렷한 차이는 보이지 않았다. 이상의 연구결과 테트라사이클린과 구연산처리가 치근활택술만 시행한 경우보다 치주인대세포의 증식 및 전개에 더 유리하며, 테트라사이클린과 구연산은 치주인대세포의 전개양상은 유사하나 치주인대세포증식에 있어서는 테트라사이클린에서 더 나은 효과가 있었다.

• 대한치과교정학회지
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• 제27권3호
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• pp.503-513
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• 1997

본 연구는 산소 장력이 사람의 치주인대에서 유래된 세포의 활성과 세포외 기질 및 cytokine에 미치는 영향을 알아 보고자 저산소 및 과산소 조건에서 배양한 후 세포의 활성, 총 단백질 합성, 교원질 합성, 그리고 $IL-1{\beta}$, IL-6, $TNF-{\alpha}$를 측정하였다. 교정치료를 위해 발거한 제 1 소구치에서 사람의 치주인대 세포를 채취하여 $37^{\circ}C,\;5\%\;CO_2,\100\%$ 습도의 환경에서 배양한 후 5 내지 6 계대배양하여 실험에 사용하였다. Gaspack system에 $0.2{\mu}m$ Millipore filter를 부착하여 세균 감염을 막았고, 저산소군에는 $10\%\;O_2,\;5\%\;CO_2,\;85\%\;N_2$ 가스를, 과산소군에는 $90\%\;O_2,\;5\%\;CO_2,\;5\%\;N_2$ 가스를 연결하여 산소 장력에 변화를 주었으며 대조군에는 $5\%\;CO_2,\;95\%$ 공기를 공급하였다. $37^{\circ}C$ 에서 2, 4, 6일간 배양한 후에 세포활성을 측정하기 위해 tetrazolium(MTT) assay를 시행하였고 sulforhodamine B(SRB) assay를 이용하여 총 단백질 합성을 알아보았으며, 4-hydroxyproline 측정으로 교원질 합성을 측정해 보았다. 또한 효소면역측정법으로 $IL-1{\beta}$, IL-6, $TNF-{\alpha}$를 측정하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 저산소근에저 세포 활성과 총 단백질 합성은 대조군보다 다소 높거나 같은 정도이었다. 2. 과산소군에서 세포 활성은 대조군보다 낮았으며 총 단백질 합성도 다소 감소되었다. 3. 교원질 합성은 저산소군과 과산소군에서 대조군보다 유의하게 감소되었다가 배양기간이 길어짐에 따라 증가되어 대조군과 유사한 정도에 달했다. 4. 효소면역법 측정 결과 IL-6, $TNF-{\alpha},\;IL-1{\beta}$ 순으로 다량 검출되었다. 5. IL-6, $TNF-{\alpha},\;IL-1{\beta}$는 저산소군과 과산소군에서 배양기간이 길어짐에 따라 대조군에 비해 급격히 증가하였다. 5. IL-6, $TNF-{\alpha}$는 과산소 조건에서 배양 6일 후에는 대조군에 비해 유의하게 증가하였으며 이는 배양 2일 또는 4일 후보다도 유의하게 증가한 것이었다.

• Archives of Pharmacal Research
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• 제25권6호
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• pp.903-909
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• 2002

Research in the cytokine field has grown exponentially in recent years, and the validity of such studies relies heavily on the appropriate measurement of levels of cytokines in various biological samples. Transforming growth factor (TGF)-$\beta$, a hormonally active polypeptide found in normal and transformed tissue, is a potent regulator of cell growth and differentiation. The most widely used bioassay for TGF-$\beta$ is the inhibition of the proliferation of mink lung epithelial cells. Though detection of [$^3$H]thymidine incorporation is more sensitive than the MTT assay, it presents some disadvantages due to the safety and disposal problems associated with radioisotopes. In this study, we attempted to ascertain the experimental conditions which could be used for measuring the in vitro biological activity of TGF-$\beta$ in a safer and more sensitive way compared with the currently available methods. We compared the commonly used method, the MTT assay, to the XTT assay using different parameters including cell number, incubation time and the wave length used for detecting the product. We examined the anti-proliferative activities of TGF-$\beta$ in three different cell lines: Mv-1-Lu mink lung epithelial cells, MCF10A human breast epithelial cells and H-ras-transformed MCF10A cells. Herein, we present an experimental protocol which provides the most sensitive method of quantifying the biological activity of TGF-$\beta$, with a detection limit of as low as 10 pg/ml: Mv-1-Lu or H-ras MCF10A cells ($1{\times}10^5/well$) were incubated with TGF-$\beta$ at $37^{\circ}C$ in a humidified $CO_2$ incubator for 24 hr followed by XTT treatment and determination of absorbance at 450 or 490 nm. Our results may contribute to the establishment of an in vitro bioassay system, which could be used for the satisfactory quantitation of TGF-$\beta$.

• 한국약용작물학회지
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• 제22권3호
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• pp.223-230
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• 2014

This study was performed to enhance contents of low molecular ginsenoside using steaming and fermentation process in low quality fresh ginseng. For increase in contents of Rg2, Rg3, Rh2 and CK in low quality fresh ginseng, a steaming process was applied at $90^{\circ}C$ for 12 hr which was followed by fermentation process at Lactobacillus rhamnosus HK-9 incubated at $36^{\circ}C$ for 72 h. The contents of ginsenoside Rg1, Rb1, Rc, Re and Rd were decreased with the steaming associated with fermentation process but ginsenoside Rg2, Rg3, Rh2 and CK increased after process. It was found that under the steaming associated with fermentation process, low molecule ginsenosides such as Rg2, Rg3, Rh2 and CK were increased as 3.231 mg/g, 2.585 mg/g and 1.955 m/g and 2.478 mg/g, respectively. In addition, concentration of benzo[${\alpha}$]pyrene in extracts of the low quality fresh ginseng treated by the complex process was 0.11 ppm but it was 0.22 ppm when it was treated with the steaming process. This result could be caused by that the most efficiently breakdown of 1,2-glucoside and 1,4-glucoside linkage to backbone of ginsenosides by steaming associated with fermentation process. This results indicate that steaming process and fermenration process can increase in contents of Rg2, Rg3, Rh2 and CK in low quality fresh ginseng.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제18권2호
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• pp.158-164
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• 2005

A practical approach was proposed to produce transgenic chimeric chickens using blastodermal cells (BCs). The chicken BCs were mechanically dissociated and transferred into the recipient eggs that had been exposed to 500 rads irradiation of$^{60}Co$ and windowed on the equatorial plane. Chimeric chickens were generated using two models: the crosses (MXL) from Black Minors (ii,EE,b/b) ♂${\times}$Barred Leghorns (ii,ee,B/-) ♀ as donors and White Leghorns (WL, II) as acceptors (Model 1), or the Black Heifengs (BH, ii,EE,bb) as donors and Hua-xing white (HW, II) as recipients (Model 2). The treated eggs were incubated in their original shells in normal conditions until hatching. Green fluorescent protein (GFP) gene was transferred into the BCs derived from MXL and BH via lipofectamine and the pEGFP-C1, and transfection efficiency into the BCs was examined under a fluorescent microscope. Potential transgenic chimeras were selected based on the proposed methods in this study. Using the fresh BCs, the best rate of phenotypic chimeras was 6.7% and 26.0% in model-1 groups, and model-2 groups, respectively. We also described the optimized conditions for transfection. Although 30% of the BCs transfected in vitro emitted green light under an inverted fluorescent microscope, no embryos injected with the transfected BCs expressed foreign GFP gene at 3-4 days.

• 대한한방내과학회지
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• 제29권4호
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• pp.846-855
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• 2008

Objects : The aim of this study was to investigate the influence of five herbal medicines on cytochrome P450 3A4 drug-metabolizing enzymes in human liver microsomes. Methods : To use human liver microsomes, an extract of five herbal medicines, which are Artemisia princeps Pampan, Sophora jeponica Linne, Panax notoginseng F. H. Chen, Lithospermum Erythrorhizon Sieb., and Cirsium maackii Maxim, which together are called Jihyulyak(止血藥, drugs for arresting bleeding, hemostatics), was co-incubated and measured for relative enzyme activity in incubation condition compared to ketoconazole, a representative inhibitor of CYP 3A4. Results : We showed that all five of the traditional herbal medicines had no inhibition effect of CYP 3A4 at 10, 20, 30, 40, and $50{\mu}g/ml$ doses in human liver microsomes, although Sophora japonica Linne(SJL) showed a little inhibition at about 81% inhibition rate of control. However, this result is not enough to prove that SJL has a CYP 3A4 inhibition effect. Moreover, we can't make sure that those rates had significant induction effect on CYP 3A4. Conclusions : The result of this study could support that those herbal medicines are safer than chemical drugs, even if this is the basic step to prove that result.

• Journal of Ecology and Environment
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• 제35권1호
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• pp.1-7
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• 2012

To calculate and predict soil carbon budget and cycle, it is important to understand the complex interrelationships involved in soil respiration rate (Rs). We attempted to reveal relationships between Rs and key environmental factors, such as soil temperature, using a laboratory incubation method. Soil samples were collected from mature deciduous (MD), mature coniferous (MC), immature deciduous (ID), and immature coniferous (IC) forests. Prior to measure, soils were pre-incubated for 3 days at $25^{\circ}C$ and 60% of maximum water holding capacity (WHC). Samples of gasses were collected with 0, 2, and 4 h interval after the beginning of the measurement at soil temperatures of 5, 15, 25, and $35^{\circ}C$ (at 60% WHC). Air samples were collected using a syringe attached to the cap of closed bottles that contained the soil samples. The $CO_2$ concentration of each gas sample was measured by gas chromatography. Rs was strongly correlated with soil temperature (r, 0.93 to 0.96; P < 0.001). For MD, MC, ID, and IC soils taken from 0-5 cm below the surface, exponential functions explained 90%, 82%, 92%, and 86% of the respective data plots. The temperature and Rs data for soil taken from 5-10 cm beneath the surface at MD, MC, ID, and IC sites also closely fit exponential functions, with 83%, 95%, 87%, and 89% of the data points, respectively, fitting an exponential curve. The soil organic content in mature forests was significantly higher than in soils from immature forests (P < 0.001 at 0-5 cm and P < 0.005 at 5-10 cm) and surface layer (P = 0.04 at 0-5 cm and P = 0.12). High soil organic matter content is clearly associated with high Rs, especially in the surface layer. We determined that the incubation method used in this study have the possibility for comprehending complex characteristic of Rs.