• 한국식품영양과학회지
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• 제26권1호
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• pp.148-153
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• 1997

본 연구는 전보의 영지버섯으로부터 분리 배양한 균 사체를 알카리추출하여 얻은 다당체의 일반성분과 당분석 및 항암작용에 관한 연구에 이어, 이들과 ATCC의 마우스 유래 탐식 세포주 TIB 71 및 BALB/c 마우스의 복강내 대식세포를 이용하여 영지버섯 다당체가 면역계 전체의 기능을 조정하는 대식세포의 면역기능에 미치는 영향을 연구하였다. 그 결과를 요약하면 다음과 같다 1. 대식세포의 환성에 영향을 미치는 영지 버섯 다당체의 효과를 알아보기 위하여 세포의 유사분 열능을 측정한 결과, 다당체의 처리 농도가 0.5mg 실험군에서부터 유의한 증가를 나타내었다(p<0.001). 2. 영지버섯 다당체가 대식 세포 활성에 미치는 효과를 알아보기 위해 대식세포의 표면에 존재하는 IL-2 수용체를 anti-mouse IL-2-FITC 단크론항체를 이용하여 측정한 결과는 PSG 0.05mg 실험군을 제외한 실험군 모두에서 대조군 37.6% 보다 현저한 발현증가(p<0.001)를 보였으며 PSG 0.1mg 실험군까지는 수용체가 증가 하나 그 이상 처리군 사이에서는 상호간 유의한 차이는 없었다. 3. 영지버섯 다당체는 대식 세포에서 유래하는 세포간물질 즉 IL-1, IL-6 및 TNF의 생성에 유의성 있는 관여는 하지 않는 것으로 생각되나 부분적으로 영지버섯 다당체와 BCG및 IFN-${\gamma}$를 모두 함께 병용 투여함으로써 각각 영지버섯 다당체와 BCG또는 영지버섯 다당체와 IFN-r을 투여하는 경우에 비하여 IL-1의 분비증가를 보였으며 TNF의 분비 역시 현저한 증가를 보여 영지버섯 다당체가 초기 감염시 숙주의 1차 방어기능에 관여함을 알 수 있었다.

• 한국수정란이식학회지
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• 제13권3호
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• pp.227-233
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• 1998

난관상피세포와 그 배양액에서 분비된 고분자 분획이 소정자의 수정능력에 어떠한 영향을 미치는지 알아보고자 실시한 실험에서 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 난관상피세포배양액으로부터 MW 5 kDa cut-off bucket을 사용하여 탈염 및 농축을 실시, 단백질/고분자분획을 회수하고 이를 체외수정용 배양액에 첨가하고 난관상피세포 monolayer와 공배양을 통해 체외수정을 실시한 결과 고분자분획첨가 및 난관상피세포 공배양(OM+OEC)군이 고분자분획첨가(OM) 군에 비하여 유의적으로 높은 분할율을 나타내었으며 난관상피 세포 공배 양(OEC)군 및 OM 군 모두 대조군에 비해서는 유의적으로 높은 분할율을 나타내었다(p〈0.01). 2. 난관상피세포와 전배양한 정자의 체외수정능을 조사한 결과 정자와 OEC를 4시간 동안 전배양한 후 체외수정한 군이 난자와 정자를 동시에 배양한 군에 비하여 유의적으로 높은 분할율을 나타내었다(p〈0.01). 이상의 결과에서 소 정자의 체외수정능은 난관 상피세포와의 접촉 및 분비액유래 고분자단백분획의 공동효과에 의한 것으로, 난관상피세포와의전배양은 체외에서 수정능획득을 유도하는 것으로 판단된다.

• 한국어병학회지
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• 제18권3호
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• pp.277-285
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• 2005

홍삼추출물을 다양한 농도 (1-50 mg/kg)로 어체의 복강내에 주입하여 3일 후 어체를 희생시켜서 Ht, lysozyme, TIC 및 NBT reduction을 측정한 바, 10 ㎍/㎎ 이상의 처치군에 유의성 있는 증가를 보였다. 한편, in vitro에서 홍삼 추출물을 처리시 림프구의 증식능에 미치는 영향은 PHA 혹은 Con A와 혼합처리 경우에는 10 ${\mu}g/m{\ell}$농도에서 가장 높은 증가를 보였으나, 고농도 (100 ${\mu}g/m{\ell}$)에서는 억제되었다. 그렇지만, RGE 단독 혹은 LPS혼합 처리군에서는 증가효과가 유의성 있게 나타나지 않았다. 한편, 백혈구의 유주능 및 발생기산소 (ROI)의 생성은 10 ${\mu}g/m{\ell}$이상의 처리군에서 유의성 있는 증가를 보였다. 이러한 결과는 홍삼추출물을 복강내로 처리시 림프구의 증식 및 탐식세포의 기능을 증가시키는 것을 알 수 있었으며, 향후 면역보조제로 사용하기 위해서는 경구투여에 따른 실행이 수행되어져야 할 것으로 사료된다.

• 미생물학회지
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• 제42권4호
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• pp.306-312
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• 2006

음식물쓰레기의 효과적인 처리를 위해 발효소멸기를 제작하고 유기물 분해능이 우수한 균주들을 접종하여 음식물쓰레기의 감량과 악취제거능을 조사하였다. 먼저 Bacillus subtilis (cellulase 생성), Bacillus cereus (amylase 생성), Sphingobacterium faecium (protease 생성)를 분리하여 효소의 활성을 조사한 결과 각각 최대 153, 219, 412 unit/ml의 우수한 활성을 나타냈다. 미생물에 의한 음식물쓰레기의 처리효과를 확인하기 위해 먼저 간헐적 통기시의 감량효율을 검토한 결과 15일 후 접종시료가 약 11%, 비접종시료가 3.4%의 분해율을 나타내었다. 간헐전 통기시 pH가 급격히 낮아지면서 처리효율이 낮아지는 문제를 해결하기 위해 지속적으로 통기시키면서 음식물 쓰레기 처리 효율을 측정한 결과 간헐적 통기에서의 처리 효율에 비해 약 10% 정도 분해율이 증가했고, 교반기 내부의 pH가 5$\sim$7 수준에서 유지되었다. 음식물 쓰레기 처리에 가장 적합한 조건을 찾기 위해 pH와 온도를 조절하면서 분해효율을 조사한 결과 pH 7, $30^{\circ}C$에서 15일 후 가장 우수한 35%의 분해효율을 나타냈다. 한편 음식물 쓰레기가 분해되면서 발생하는 악취를 저감시키기 위해 biofilter를 제작, 장착함으로써 제어하고자 하였다. 황 화합물을 산화시키는 홍색비유황세균을 함유한 biofilter를 장착함으로써 5$\sim$6배 정도로 복합악취를 저감시킬 수 있었으며, 악취 원인물질 중 중요한 황 화합물인 methylmercaptan은 213 ${\mu}g/L$에서 158.6 ${\mu}g/L$으로, hydrogen sulfide 또한 2473.8 ${\mu}g/L$에서 1262 ${\mu}g/L$로 크게 감소하였다. 이 연구 결과는 음식물쓰레기의 효율적인 처리 및 악취제거에 기여할 수 있을 것으로 판단되며, 음식물쓰레기 처리에 이용할 수 있는 미생물자원의 확보 측면에서도 큰 의의가 있다고 할 수 있다.

• 미생물학회지
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• 제52권3호
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• pp.365-374
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• 2016

고위도에서의 온도 상승은 $0.6^{\circ}C$/10 년으로, 이는 토양 유기 탄소에 대한 미생물의 분해 활성 증가를 유도한다. 게다가, 분해된 토양 유기 탄소는 이산화탄소 또는 메탄 같은 온실가스로 전환, 방출되어 기후 변화를 가속화시킨다. 따라서, 토양 유기 탄소 분해와 관련된 미생물의 다양성 및 기능 이해를 위한 토양 해동 모델 연구가 필요하다. 이러한 연구를 위하여 Alaska Council의 두 깊이의 토양(SPF와 PF라 각각 명명한 30-40와 50-60 cm 깊이의 토양)을 $0^{\circ}C$에서 108일 동안 배양하였다. 환경 모사 실험 동안 pyrosequencing을 수행하였고, metagenome을 분석하여 총 111,804개의 미생물 sequence를 얻었다. 이 중, 574-1,128개의 세균 operational taxonomic unit (OTU)과 30-57개의 고세균 OTU를 확인하였다. 토양 배양에 따라 두 토양 모두에서 Crenarchaeota phyla의 상대적 분포가 증가하였으며, Actinobacteria와 Firmicutes phyla의 분포가 SPF와 PF에서 각각 크게 증가하였다. 추출한 토양 유기 탄소에 대한 무게 측정 및 gel permeation chromatography를 통해, 환경 모사 실험이 진행되는 동안 토양 유기 탄소의 주요 구성 성분인 부식산(humic acids)이 중합화(humification)되는 것을 확인하였다. 결론적으로, 냉대 툰드라 동토의 해동은 Crenarchaeota, Actinobacteria 및 Firmicutes phyla의 증가를 야기시키며, 미생물에 의한 토양 유기 탄소 분해 및 이용을 야기시키는 것으로 예측된다.

• 한국수정란이식학회지
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• 제27권1호
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• pp.57-62
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• 2012

Efficient oocyte activation is a key step for the success of nuclear transfer in cloning. Ionomycin sequentially combined with 6-DMAP is now widely used to activate normal oocytes for analytical studies of oocyte activation and to activate reconstructed oocytes after nuclear transfer. The present study investigated sources of oocytes, duration of ionomycin and 6-DMAP, laser and electric stimulation in goat oocyte activation in order to optimize the protocols. Goat ovaries were collected in individual abattoirs during the breeding season and were delivered to the laboratory within 6 h in saline with 100 IU/ml streptomycin and 0.05 mg/ml penicillin. The oocytes were denuded from the cumulus cell by pipetting with 0.2% hyaluronidase in PBS at 20~22 hr post maturation. Oocytes with the polar body were selected and assigned to four groups for parthenogenetic activation. To examine the effect of duration of ionomycin treatment, oocytes after 20~22 hr of maturation were treated with 2.5 uM ionomycin for 1 or 5 min times and then cultured in 2 mM 6-DMAP for 2 or 4 hr. The activated oocytes were cultured in mSOF at $38.5^{\circ}C$ in $CO_2$ 5%, $O_2$ 5% and $N_2$ 90% multi incubator. Cleavage and blastocyst development was observed at 48 hr and day 8 of culture $in$ $vitro$, respectively. Activation rates of oocytes exposed to ionomycin for 1 min(86.4%) were significantly higher than those treated for 5 min(74.3%) duration. This indicated that 1 min ionomycin treatment was most suitable for activation of goat oocytes. The duration of 6-DMAP treat duration was in 2 mM 6-DMAP for 2 hr after 1 min exposure to 2.5 uM ionomycin. The activation rate of oocytes incubated in 6-DMAP for 2 hour(82.5%) was significantly higher than those in oocytes treated with 4 hr(75.5%).

• 생명과학회지
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• 제20권11호
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• pp.1718-1724
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• 2010

누에분말을 과일(키위, 파파야, 파인애플 및 배) 단백질 분해 효소로 반응시켜 생리활성작용 및 이화학적 특성을 조사하기 위하여 pH, 산도, 단백질 함량, 미네랄 함량, 지방산 조성, 단백질 패턴, 항산화 및 혈전용해 활성을 측정하였다. 누에분말은 각 과일 단백질 분해 효소로 $60^{\circ}C$에서 24시간 반응시켰다. 단백질 농도는 과즙액 처리 누에분말에서 약간 높은 것으로 나타났다. 누에분말의 주요 미네랄은 칼륨, 마그네슘, 칼슘 및 아연이였으며, 주요 지방산 조성은 linolenic acid, oleic acid 및 palmitic acid 였다. SDS-PAGE상의 단백질 패턴 분석에서 66-97 kDa 정도 크기의 누에 단백질 밴드가 파인애플, 파파야 및 배 반응에 의해서는 대부분 분해가 일어났지만, 키위 반응에 의해서는 거의 분해가 일어나지 않은 것으로 관찰되었다. 혈전용해 활성은 파파야 및 배 반응에 의한 누에분말에서만 나타났다. 항산화 활성은 0.1% 처리 농도에서 과일 단백질 분해 효소 반응에 의한 누에분말에서 미반응 누에분말 보다 증가하였으나, 시판 항산화제 BHT 처리보다는 활성이 많이 낮았다. 따라서 과즙액 처리 누에분말의 경우 반응 전 누에분말 보다 생리활성작용 및 이화학적 특성이 강화됨으로써 건강기능식품 소재로서의 가치가 증가된 것으로 사료되어 진다.

• Journal of Periodontal and Implant Science
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• 제28권1호
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• pp.133-143
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• 1998

Diabetes mellitus is a systemic disease with profound effects on oral health and periodontal wound healing. Uncontrolled diabetes adversely affects surgical wound healing and is often associated with abnormal proliferation of fibroblasts. Human gingival fibroblasts and PDL cells were chosen because they are intimately involved in periodontal therapy and are important for the success of surgical procedure such as guided tissue regeneration. The aim of the present study was to elucidate whether cellular activity and collagen synthesis by glucose pre-treated human gingival fibroblasts and PDL cells are influenced by insulin, and whether healthy cells differ from glucose treated cells. Cells were cultured with DMEM at $37^{\circ}C$, 5% $CO_2$, 100% humidified incubator. To evaluate the effect of glucose on gingival fibroblasts and periodontal ligament cells, the cells were seeded at a cell density of $1{\times}10^4\;cells/well$ culture plates and treated with 20 and 50mM of glucose for 5 days. Then MTT assay was carried out. To evaluate the effect of insulin on glucose-pretreated cells, the cells were seeded at a cell density of $1{\times}10^4\;cells/well$ culture plates and treated with 20 and 50mM of glucose for 5 days. After incubation, $10^3$, $10^4$ and $10^5mU/l$ of insulin were also added to the each well and incubated for 2 days, respectively. Then, MTT assay and collagen synthesis assay were carried out. The results indicate that cellular activity of gingival fibroblasts significantly increased by glucose while periodontal ligament cells were unaffected and cellular activity of gingival fibroblasts and periodontal ligament cells were unaffected by insulin. Collagen synthesis of gingival fibroblast with 20mM glucose and insulin unaffected, but 50mM glucose and insulin increased than control. Collagen synthesis of periodontal ligament cell with 20mM glucose and $10^5mU/l$ insulin significantly increased than other groups and 50mM glucose pretreated PDL cells significantly increased at $10^3mU/l$ insulin but decreased at $10^4mU/l$ insulin. Our findings indicated that these cell types differed in their growth response to glucose, and the increase in collagen synthesis was significantly raised at insulin level of $10^3mU/l$ in gingival fibroblasts and periodontal ligament cells except 20mM glucose pretreated periodontal ligament cells.

• Journal of Periodontal and Implant Science
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• 제27권1호
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• pp.1-17
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• 1997

Tetracycline is known to be effective in eliminating periodontopathogens and have collagenolytic activity. This study was performed to observe the desorption kinetics and structural changes of tetracycline-treated barrier membranes for guided tissue regeneration. Four kinds of barrier membranes were tested : $Tefgen^{(R)}$(American Custom Medical, USA) and $Gore-Tex^{(R)}$(W.L. Gore & Associates Inc., USA) as nonresorbable membranes ; Resolut(polyglycolide & polylactide copolymer, W.L. Gore & Associates Inc., USA) and $Biomend^{(R)}$(collagen, Collatec Co., USA) as resorbable membranes. The membranes were cut into discs(diameter : 4mm) and were immersed in 5% tridodecylmethylammonium chloride(TIMAC) ethanol and air-dried. The membrane discs were absorbed with $100{\mu}g/ml tetracycline solution(pH8) for one minute and dried. For desorption kinetics, TC treated discs were immersed in phosphate buffered saline solution (PBS, pH 7.4). PBS was exchanged daily and TC concentration was measured by absorbance at 276nm on UV spectrophotometer. To measure remaining antibacterial activity, discs of 1 day to 4 weeks after desorption were placed on Mueller Hinton agar containing Bacillus cereus and incubated aerobically in $37^{\circ}C$ for twelve hours and the inhibition diameters were measured. To observe the structural change of membranes after TIMAC treatment or immersion in PBS, the membrane discs were examined under SEM. The results were as follows : 1. Total amounts of TC absorbed into membrane discs($0.7536mm^2$) were $2000{\mu}g$, $1800{\mu}g$, $2625{\mu}g$ and $2499{\mu}g$ for $Tefgen^{(R)}$, $Gore-Tex^{(R)}$, $Biomend^{(R)}$ and $Resolut^{(R)}$. 2. The concentration of TC released from barrier membrane discs was maintained over $4{\mu}g/ml$ until the fifth day in nonresorbable membranes and $Resolut^{(R)}$, but until the fourth day in $Biomend^{(R)}$, Until the ninth day in nonresorbable membranes and until the seventh day in resorbable membranes, the TC concentration was maintained over $1{mu}g/ml$. 3. The four membrane discs in the first day showed similar size of inhibition zone. One to four weeks later, the inhibition zone was much smaller in resorbable membrane discs than nonresorbable membrane discs. 4. Any structural change due to treatment of TIMAC was not observed on the nonresorbable membranes. $Resolut^{(R)}$ did not show any structural change except fibrillar loosening during immersion period, but Biomend showed destruction of membrane structure from the first week of immersion. This study indicates that tetracycline treated barrier membranes lead to the sustained release of tetracycline for over 7 days. This slow release pattern of tetracycline may contribute to the favorable clinical outcome of guided tissue regeneration.

• 대한본초학회지
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• 제23권1호
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• pp.75-83
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• 2008

Objectives : The present study was carried out to investigate the effect of Hyperici Japonici Herba on the proliferation and activation of eosinophils which were prepared from lung cells of asthma-induced mice by ovalbumin(OVA) treatment. Methods : C57BL/6 mouse was exposed to OVA three times a week for 6 weeks. The mouse lung tissues were dissected out, chopped and dessiciated with collagenase(1${\mu}g$/ml). Eosinophils were activated by rIL-3/rmIL-5 co-treatments. The lung cells were treated with extract of Hyperici Japonici Herba(EHH), incubated for 48 hr at $37^{\circ}C$, and analyzed by flow cytometer. ELBA, RT-PCR, immunocytochemistry stain. Results : The cell number ratio of granulocyte, $CD3e^-$/$CCR3^+$, $CD3e^+$/$CD69^+$, $CD4^+$, $CD23^+$/$B220^+$ cells was increased in rmIL-5/rIL-3 treated control group compared to the normal group. Cells numbers in the experimental animal group treated with EHH was all decreased. In ELISA analysis, IL-4, IL-5, IL-13 protein levels and histamine release level were greatly increased in the control group compared to the normal animal group, then significantly decreased in the experimental group with 100 ${\mu}g$/ml of EHH treatment. In RT-PCR analysis, the HT value of IL-4, IL-5, IL-13, CCR3, Eotaxin were increased in the control group compared to the normal animal group, then decreased in the experimental group with 100 ${\mu}g$/ml of EHH treatment. And eosinophil proliferation levels were 18847${\pm}$1527(cpm) in the control group, 4676${\pm}$972(cpm) in the positive control group, and 8675${\pm}$159(cpm), 11352${\pm}$1005(cpm), 14325${\pm}$677(cpm) in the experimental group with 100 ${\mu}g$/ml, 10 ${\mu}g$/ml, 1 ${\mu}g$/ml of EHH treatment. Conclusions : The present data suggested that Hyperici Japonici Herba may have an effects on the inhibition of parameters associated with asthma responses in eosinpophils, and thus implicate the possibility for the clinical application of EHH.