항산화 활성이 우수한 풋귤 식초를 개발하기 위하여 풋귤의 수확 시기(7월-9월)에 따른 총 페놀 및 플라보노이드 함량 및 항산화 활성을 측정하고, 3가지 원료 조건(풋귤 분쇄액, 10% 건조 청피 첨가 풋귤 분쇄액, 10% 로스팅 청피 첨가 풋귤 분쇄액)으로 제조된 풋귤 식초의 발효 특성, 항산화 성분 및 항산화 활성을 비교하였다. 7월에 수확된 풋귤 착즙액은 1.02±0.02 ㎍ GAE/mL의 가장 높은 총 페놀 함량이 확인되었으며, 플라보노이드 함량은 수확시기에 따른 유의적인 차이가 존재하지 않았다. 항산화 활성은 7월-8월에 수확된 풋귤 착즙액이 9월에 수확된 풋귤 착즙액보다 유의적으로 높은 DPPH 라디칼 소거능 및 환원력을 나타내었으며, 이러한 결과를 바탕으로 7월에 수확된 풋귤 착즙액을 식초 원료로 선정하였다. 원료 조건을 달리하여 제조된 식초의 최종 산도는 풋귤 식초가 6.0%, 건조 청피 첨가 풋귤 식초가 6.3%, 로스팅 청피 첨가 풋귤 식초가 6.7%로 모두 85%의 높은 발효 효율을 보였다. 건조 또는 로스팅 청피가 첨가된 풋귤 식초는 발효 13일차에 5% 산도에 도달하였으며, 풋귤 식초보다 발효 기간이 단축되고 높은 산 생성능을 나타내었다. 원료조건에 따라 색도의 변화가 확인되었지만 유의적인 차이는 없었다. 유기산 함량은 건조 청피가 첨가된 풋귤 식초가 acetic acid를 비롯한 총 유기산 함량이 30,201 mg/L으로 가장 높았으며, 특히 풋귤 식초보다 1.4배 높았다. 총 페놀 함량은 로스팅 청피 첨가 풋귤 식초에서 0.62±0.02 ㎍ GAE/mL으로 풋귤 식초와 약 2배 이상의 차이를 보였으나, 총 플라보노이드 함량은 풋귤 식초가 3.00±0.15 ㎍ CE/mL로 가장 높았다. DPPH 라디칼 소거능의 EC50 값은 건조 및 로스팅 청피 첨가 풋귤 식초가 각각 5.83±1.66 nL/mL, 4.71±0.07 nL/mL으로 풋귤 식초(9.16±0.87 nL/mL)보다 유의적으로 높은 활성을 나타냈으며, 환원력에서는 로스팅 청피 첨가 풋귤 식초가 7.47±0.28 nL/mL으로 활성이 가장 높았다. 이상의 결과로부터 7월에 생산된 풋귤 착즙액을 원료로 로스팅 청피를 첨가한 풋귤 식초는 초산 발효가 우수하고 높은 유기산 및 페놀 함량으로 우수한 항산화 활성을 나타내어 기존 풋귤 식초보다 항산화능이 강화된 기능성 식초로 활용될 수 있을 것으로 사료된다.
Objective:Gagam-Gongjin-dan (GGD) is an oriental medicinal prescription composited with Cervi parvum Cornu, Corni Fructus, Angelica Gigantis Radix, Lycii Fructus, Dioscoreae Rhizoma, Citri Pericarpium, Gastrodiae Rihzoma, Agastachis Herba, Cassiae cortex, Scutellariae Radix and Schisandrae Fructus. The purpose of this study was to investigate the effects of GGD extract against acetaminophen (APAP)-induced liver injury in mice. Methods:GGD extract was prepared by extracting with methanol for 7 days. The extract was freeze-dried following filtration through vacuum distillation system. The first, we investigated the antioxidant effects of GGD extract on electronic donating ability (DPPH), nitrite (NO) scavenging and superoxide dismutase (SOD)-like activity. The next, we investigated the possible hepatoprotective effect of GGD extract administration against acetaminophen-induced liver injury in mice. Mice were orally administrated with or without GGD extract of different doses (25-100 mg/kg/day) one times per day for 6 days. After 3 days, APAP was orally applied with a single dose (400 mg/kg). Results:GGD extract increased DPPH, NO and SOD-like activities in dose dependant. APAP treatment significantly increased aspartate aminotransferase (AST) and alanine aminotransferase (ALT) activities in plasma. Also, APAP treatment significantly evaluated lipid peroxidation product thiobarbituric reacting substances (TBARS) and depleted some antioxidant enzymes (superoxide dismutase, catalase, d-aminolevulinate dehydratase and gluthathione peroxidase activities) in liver homogenates compared to the control group. However, the orally administration of GGD extract was able to counteract these effects. Histological studies provided supportive evidence for biochemical analysis Conclusions:These results suggest that GGD extract has a potential antioxidant and hepatoprotective effect against APAP-induced liver injury, these properties may contribute to liver disease care.
Ekongsan (EKS) was expected to have inhibitory effects on angiogenesis, considering the fact that its constituents such as Ginseng Radix, Glycyrrhizae Radix and Citri Pericarpium were reported to inhibit angiogenesis. Moreover, recently several metabolites transformed by the human intestinal microflora were reported to enhance effectiveness compared to their crude drugs. Based on these data, this study was designed to confirm whether the EKS metabolites (EKS-M) can significantly exert the anti-angiogenic and anti-metastatic activites. Hence, with EKS and EKS-M, viability assay, proliferation assay, in vitro tube formation assay, gelatin zymogram assay, in vitro invasion assay were carried out. EKS showed less toxicity in ECV304 and HT1080 cells than EKS-M. EKS-M inhibited the proliferation of HT1080 cells by 30% at 200 ${\mu}g/m{\ell}$ and 42% at 400 ${\mu}g/m{\ell}$ respectively. Also, EKS-M degraded the tube network at 200 ${\mu}g/m{\ell}$. EKS and EKS-M inhibited the expression of MMP-9 at 200 and 400 ${\mu}g/m{\ell}$in HT1080 cells. EKS reduced the invasive activity of HT1080 cells through matrigel coated transfilter at the concentration of 200 ${\mu}g/m{\ell}$ more effectively than EKS-M. These data suggest that EKS and EKS-M has anti-angiogenic and anti-metastatic activities.
Objective : Although management of asthma has become increasingly effective, its cure remains elusive, necessitating a new modality to prevent or eliminate causes triggering clinical progress. Based in the clinical experiences, a novel decoration Cheongsangbiyeum (CSB), has been developed to treat asthma, which consists of Polyporus, Semen Myristicae, Pericarpium citri Reticulatae, Rhizoma Cimicifugae, Cortex Albizziae, Fructus Rubi, Rhizoma Zedoariae, and Rhizoma Rhei. In the current study, its anti-asthmatic efficacy was evaluated using a mouse model of asthma. Methods : Experimental allergic asthma was induced by repeated intraperitioneal sensitization and intranasal challenge of ovalbumin (OVA). Water extract of CSB (1 mg/mouse/day) was administrated orally whereas control mice on given with identical volume of phosphate-buffered saline (PBS) for 5 days during the course of antigen challenge. When airway hyperreactivity(AHR) measured by ${\bata}-methacoline-induced$ airflow obstruction was compared, AHR of CSB-treated mice was significantly lower than those of control mice, indicating that CM extract can attenuate an asthmatic symptom. Airway recruitment of leukocytes and eosinophils was also markedly reduced by CSB treatment suggesting that oral treatment of CSB can alleviate the airway inflammation. For a better understanding of possible mechanisms underlying anti-asthmatic effet of CSB, cytokine (IL-4, IL-5, IL-13 and $IFN{\gamma}$ levels in bronchoalveola lavage fluid (BALF) and lung tissues were determined. Results : The results showed that cytokine levels were significantly lowered by CSB treatment. Additionally, number of draining lymph node cells was significantly lower than those of control mice. These data indicate that CSB suppress in vivo allergen-specific response. However, notably, levels of type 2 cytokines such as IL-5 and IL-13 were more profoundly influenced. Moreover, in vitro OVA-specific proliferative response and type 2 cytokine (IL-4, IL-5 and IL-13) production lymph node cells was markedly decreased in CSB-treated mice, whereas their $IFN{\gamma}$ production was not significantly altered Thrse data clearly showed a preferential inhibition of type 2 T cell (Th2) response by CSB treatment. This finding was also supported by serum antibody data showing that levels of OVA-specific type 2 antibodies, IgE and IgG1, in CSB-treated mice were significantly lower than in control mice, while type 1 antibody, IgG2a level m rather higher than controls, although the difference was in significant. Conclusions : In conclusion, oral administration of CSB attenuates asthmatic manifestations including AHR ad airway recruitment of eosinophils in a mouse model which possibly results from selective inhibition of Th2 cell response to allergen. Our data suggest a potential clinical application of CSB for control of allergic asthma.
국내에 유통되고 있는 국산과 수입산 한약재 11종 116건을 대상으로 잔류이산화황에 대한 모니터링을 수행한 결과 108건(93.1%)은 불검출이었고 6건(5.2%)는 이산화황 허용기준치 30 mg/kg을 초과하였고 2건은 30 mg/kg 미만으로 검출되었다. 116건의 이산화황 평균함량은 $17.6{\pm}144.2mg/kg$이고 최대 검출량은 구기자(1,546.3 mg/kg)이었고 중국산 현호색(66.6%)의 이산화황 검출 빈도가 가장 높게 나타났다. 국내산 한약재는 71건 중 1건(1.4%), 수입산 한약재는 45건 중 7건(15.6%)에서 이산화황이 검출되었고 국내산 1건(36.7 mg/kg)과 수입산 5건(118.1 mg/kg)이 허용기준치를 초과하여 국내산보다 수입산 한약재에 이산화황 잔류량이 많았다. 본 연구를 통해 이산화황 허용기준을 초과하는 부적합율은 다소 낮아지고 있지만 이산화황 허용기준을 초과하는 한약재들 중 일부 한약재에서는 잔류이산화황 함량이 높게 나타났고, 특히 국내산 약재에 비해 수입산 약재는 부적합율이 높게 나왔다. 한약재는 일반적으로 수세 및 가열과정을 거치므로 실제 섭취하는 형태의 탕액에서는 원재료보다 이산화황의 잔류량이 크게 감소하지만 완전히 제거되지는 않으므로 유통되는 한약재의 안전성 확립이 절실히 요구되어진다. 강화된 기준이 정착하여 안전한 한약재가 유통될 수 있도록 수입통관시 특별관리가 요구되며, 보다 적극적인 검사 요주의 품목에 대한 지속적인 잔류이산화황 모니터링이 필요할 것으로 사료된다.
본 연구에서는 진피-황금 혼합물 (CS)이 급성 역류성 식도염에 미치는 식도 점막 보호 효과를 평가하기 위하여 CS를 경구투여한 후 수술을 통해 역류성 식도염을 유발하였으며, 실험 종료 후 혈액 채취 및 식도 조직을 적출하였다. 동물에게서 적출한 식도 점막의 손상 정도를 육안으로 확인한 결과 CS투여군에서 식도 점막의 손상이 유의하게 감소하였으며, H&E staining을 통해 관찰한 결과 마찬가지로 CS투여군에서 식도 상피의 탈락 및 염증세포의 침윤이 현저하게 감소한 것을 확인하였다. 혈액을 이용하여 역류성 식도염의 원인으로 유효하다고 알려진 ROS의 수치를 확인한 결과, CS투여군에서 ROS 수치가 유의적으로 감소하였으며, western blotting을 통해 NADPH oxidase인 NOX4, p47phox, p22phox의 발현을 확인한 결과, 마찬가지로 CS 투여군에서 유의하게 감소하였고, 특히 CS200투여군에서 Normal군과 비슷한 수치를 나타냈다. 또한, CS투여는 염증성 단백질인 MAPK와 NF-κB 경로를 유의적으로 억제하였을 뿐 아니라 tight junction 단백질인 claudin-1과 claudin-4의 발현을 유의하게 조절한 것을 확인하였다. 이상의 결과를 종합해보면 진피-황금 추출물은 산화적 스트레스를 억제함으로써 염증성 단백질의 발현을 조절할 뿐 아니라 tight junction 단백질의 발현을 조절하여 식도 점막을 보호하는 것으로 판단되나 역류성 식도염은 음식물의 섭취와 밀접한 관련이 있는 만큼 추후 동물의 식이 섭취량을 조사하는 등 세부적인 추가 연구가 필요할 것으로 보인다.
Objectives : The purpose of this study was to determine the anti-obesity effect and molecular mechanism of YY312, a herbal extract composed of Imperatae Rhizoma, Citri Unshius Pericarpium Immaturus, and Evodiae Fructus, on a high-fat diet-induced animal model and on 3T3-L1 cells. Methods : C57BL/6 mice were fed for 6 weeks with a normal diet or a high-fat diet (HFD). Then they orally administered daily with 300 mg/kg YY312 for next 10 weeks. Body weight and food consumption were recorded weekly and daily, respectively. Tissue weights, serum lipid, and glucose levels were analyzed at the end of the study. Additionally, the effects of YY312 on adipocyte differentiation in 3T3-L1 cells were examined. After differentiating 3T3-L1 cells were treated with YY312, Oil-red O staining, RT-PCR, and Western blotting were performed for lipid accumulation, mRNA expression of adipogenesis gene, and AMP-activated protein kinase (AMPK) phosphorylation, respectively. Results : YY312-administered mice showed a significant reduction of body weights and abdominal adipose tissue weights. YY312 also reduced the serum levels of triglycerides and total cholesterol, compared with the HFD group. Treatment with YY312 inhibited lipid accumulation and blocked expression of adipogenic transcription factors and lipogenesis genes, including peroxisome proliferator-activated receptor ${\gamma}$, CCAT/enhancer binding protein ${\alpha}$ and fatty acid synthase. YY312 increased AMPK phosphorylation in 3T3-L1 adipocytes. Conclusions : This study showed that herbal extract YY312 has an anti-obesity effect in vitro and in vivo. Thus, YY312 could be developed as a supplement for reduction of body weight gain induced by an HFD.
Objectives : Gagam-Gongjin-dan (GGD) composited with Cervi parvum Cornu, Corni Fructus, Angelica gigantis Radix, Lycii Fructus, Dioscoreae Rhizoma, Citri Pericarpium, Gastrodiae Rihzoma, Agastachis Herba, Cassiae cortkex, Scutellariae Radix, Schisandrae Fructus has been traditionally used for chronic diseases or weakness after illness in oriental countries. However, little is known about the effects of methanol extract of GGD on immune responses to ovalbumin (OVA) plus alum. Therefore, the purpose of this study was to investigate the effects of GGD on immune responses to ovalbumin plus alum in Balb/c mice. Methods : In this study, the extract of GGD was prepared by extracting with methanol for 7 days. The extract was freeze-dried following filtration through vacuum distillation system. Mice were orally administrated with or without GGD extract of different doses (50-200 mg/kg/day) for 30 days. We examined the effects of GGD extract on the serum levels of total IgE, OVA-specific IgE, IgG1, IgG2a, and CTACK/CCL27 production and CCR10 expression in lymph node cells and body weight change and foot pad swelling responses in ovalbumin treated Balb/c. Results : The oral administration of GGD dose-dependently reduced the serum levels of total IgE, OVA-specific immunoglobulin (IgE, IgG1 and IgG2b) and CTACK/CCL27 production in ovalbumin treated BALB/c mice. The levels of CCR10 expression from lymph node cells of OVA treated mice were markedly suppressed by treatment with GGD in a concentration dependent manner. Furthermore, foot pad swelling responses were also markedly suppressed by GGD. However, body weight were significantly increased dose dependently by GGD treatment. Conclusions : These results suggest that GGD treatment suppresses immune responses to ovalbumin, and these properties may contribute to allergic disease care.
홍마늘과 생약재 5종(생강, 도라지, 모과, 진피, 박하)이 혼합된 조성물의 항염증 활성을 검증하고자 홍마늘 50%와 천연식물류 5종을 각각 10%씩 혼합한 조성물을 물과 에탄올로 $70^{\circ}C$ 및 $95^{\circ}C$에서 3시간 동안 추출하여 각각의 추출물을 제조하였다. 총 페놀화합물은 $70^{\circ}C$에서 에탄올로 추출 시 608.60 mg/100 g으로 가장 높은 함량이었으며 물 추출물에서는 이보다 낮은 함량이었다. 홍마늘의 유효성분인 alliin과 SAC는 $70^{\circ}C$에서 물로 추출하였을 때 각각 1.29 mg/g과 2.60 mg/g으로 에탄올 추출물에 비해 유의적으로 높은 함량이었다. 홍마늘과 5종 천연식물류 복합추출물의 DPPH와 ABTS 라디칼 소거활성은 $70^{\circ}C$에서 에탄올로 추출하였을 때 각각 15.96-73.65%와 5.71-77.19%로 가장 높았다. NO 생성억제 활성은 물 추출물 보다는 에탄올 추출물에서 더 높았으며 $70^{\circ}C$ 보다는 $95^{\circ}C$에서 추출하였을 때 더 활성이 높았다. ROS 생성은 에탄올 $95^{\circ}C$ 추출물이 $1,000{\mu}g/mL$ 농도에서 대조군 대비 약 64.92%로 가장 활성이 높았다. iNOS와 $IL-1{\beta}$의 발현량은 $1,000{\mu}g/mL$ 농도의 $95^{\circ}C$ 에탄올 추출물에서 LPS 단독처리군에 비해 유의적으로 감소되었다. 이상의 결과를 종합하여 볼 때 홍마늘 및 생약재 복합 추출물의 항산화와 항염증 활성은 서로 다른 유용물질의 영향으로 발현이 되며, 이들 유용물질은 추출용매와 온도에 따라 함량이나 구성이 서로 상이하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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