Oyeyipo, Ibukun P.;van der Linde, Michelle;du Plessis, Stefan S.
Toxicological Research
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v.33
no.4
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pp.315-323
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2017
Preconceptual sex selection is still a highly debatable process whereby X- and Y-chromosome-bearing spermatozoa are isolated prior to fertilization of the oocyte. Although various separation techniques are available, none can guarantee 100% accuracy. The aim of this study was to separate X- and Y-chromosome-bearing spermatozoa using methods based on the viability difference between the X- and Y-chromosome-bearing spermatozoa. A total of 18 experimental semen samples were used, written consent was obtained from all donors and results were analysed in a blinded fashion. Spermatozoa were exposed to different pH values (5.5, 6.5, 7.5, 8.5, and 9.5), increased temperatures ($37^{\circ}C$, $41^{\circ}C$, and $45^{\circ}C$) and ROS level ($50{\mu}M$, $750{\mu}M$, and $1,000{\mu}M$). The live and dead cell separation was done through a modified swim-up technique. Changes in the sex-chromosome ratio of samples were established by double-label fluorescent in situ hybridization (FISH) before and after processing. The results indicated successful enrichment of X-chromosome-bearing spermatozoa upon incubation in acidic media, increased temperatures, and elevated $H_2O_2$. This study demonstrated the potential role for exploring the physiological differences between X-and Y-chromosome-bearing spermatozoa in the development of preconceptual gender selection.
As a part of the Chromosome-centric Human Proteome Project (C-HPP), we have developed a few algorithms for accurate identification of missing proteins, alternative splicing variants, single amino acid variants, and characterization of function unannotated proteins. We have found missing proteins, novel and known ASVs, and SAAVs using LC-MS/MS data from human brain and olfactory epithelial tissue, where we validated their existence using synthetic peptides. According to the neXtProt database, the number of missing proteins in chromosome 11 shows a decreasing pattern. The development of genomic and transcriptomic sequencing techniques make the number of protein variants in chromosome 11 tremendously increase. We developed a web solution named as SAAvpedia for identification and function annotation of SAAVs, and the SAAV information is automatically transformed into the neXtProt web page using REST API service. For the 73 uPE1 in chromosome 11, we have studied the function annotaion of CCDC90B (NX_Q9GZT6), SMAP (NX_O00193), and C11orf52 (NX_Q96A22).
The frequencies of chromosome aberrations and sister chromatid-exchanges in peripheral blood lymphocyte of 44 nurses handling anticancer drugs were compared with those in 44 age-match controls. The frequencies of dicentric chrdmosome were $2.4\times 10^{-3}$ in the exposed and $0.5\times 10^{-3}$ in the control. The frequencies of sister cromatid exchanges in the exposed were slightly higher (5.68 SCEs/cell) than those in the control (5.04 SCEs/cell). The frequencies of chromosome aberrations and sister cromatid exchanges were not associated with duration of drug handling and types of anticancer drugs, but associated with use of safety cover.
Cheung, Hyon Pae;Chon, Sang Kun;Kim, Mal Sook;Kim, Chung Suk
Journal of Korean Society of Forest Science
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v.45
no.1
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pp.51-61
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1979
The chromosome behavior and it's synapsis in the meiosis of pollen mother cell were studied on Populus alba L. as a female parent tree, Populus glandulosa Uyeki as a male parent tree and their hybrid, Populus alba x glandulosa. 1. At metaphase I, the number of nuclear plates with early separation chromosome were observed with the lowest proportion of 11.0% in Populus glandulosa and with the highest proportion of 13.0% in Populus alba${\times}$glandulosa. 2. At metaphase II, early separation chromosomes appeared with the frequency of 11.0% in Populus alba${\times}$glandulosa. But the frequency was not different with those of the parental trees. 3. At anaphase I, lagging chromosomes appeared with some high rate of 11.6% in Populus alba${\times}$glandulosa and yet the number of chromosome bridges in populus alba x glandulosa almost were not different with the partental trees. 4. At anaphase II, lagging chromosomes appeared with some high frequency of 10.2% in Populus alba${\times}$glandulosa and the chromosome bridges in Populus glandulosa appeared with the highest frequency in all studied trees. 5. The frequency of abnormal pollen sporad was the highest value of 8.2% in Populus alba${\times}$glandulosa among the studied trees. With the results, it might be assured that the chromosome segregation and it's synapsis behaved normally in Populus alba, Populus glandulosa and Populus alba x glandulosa, and so all the studied trees could produced normal pollens.
This study was conducted to examine the protein kinase inhibitors, 6-dimethylaminopurine (DMAP) and cycloheximide (CHXM) on the development and chromosome constitution of porcine parthenogenetic embryos. In vitro matured oocytes were activated by electric stimuli (ES) or a combination of ES with culture in 2 mM DMAP or $10{\mu}g/ml$ CHXM for 4 hr. Activated oocytes were cultured in PZM-3 for 6 days. Some 1-cell embryos and blastocysts were fixed by air dry method to analyze the chromosome constitutions and/or total cell number. Blastocyst development of DMAP-treated group (26.7%) was significantly higher (p<0.05) than those of CHXM-treated and ES control groups. Ploidy in 1-cell stage embryos was not different among groups (77.3 to 81.0%), however, proportion of diploid chromosome constitutions was high in DMAP-treated group (61.9%, p<0.05). In the blastocyst stage, proportion of diploid chromosome plates was significantly high in DMAP-treated group (64.2%, p<0.05), and proportion of abnormal chromosome plates was higher in CHXM-treated group (36.6%, p<0.05) than DMAP-treated group (28.3%,). Proportion of embryos with abnormal chromosome constitutions was slightly increased by DMAP (40.0%) and CHXM (42.1%) treatment due to the increasing of mixoploid (47.4 and 52.0%). The present study shows that the DMAP treatment increase the development of porcine parthenotes. However, parthenogenetic activation by ES or combined treatment with ES and DMAP or CHXM detrimentally affects the chromosome constitutions of porcine parthenotes during early embryonic development, leads to increased abnormal ploidy in the blastocyst stage.
Objectives: Cytogenetic investigations were carried out on 770 women with primary (n=560) and secondary amenorrhea (n=210) to determine the frequency of chromosomal or genetic causes of amenorrhea. Materials and Methods: In 770 women with primary amenorrhea (n=560) and secondary amenorrhea (n=210), chromosomal analysis were performed. Results: 1) The most prevalent age group is 16-20 years of age group with primary amenorrhea and 26-30 years of age group with secondary amenorrhea. 2) Out of 560 cases of primary amenorrhea, 343 cases (61.3%) had the normal chromosome constitution and 217 cases (38.7%) had the abnormal chromosome constitution including 46,XY. 3) In 217 cases of abnormal chromosome of primary amenorrhea, 57 cases (26.3%) had 45,X and 34 cases (15.8%) had the 46,XY, 24 cases (11.0%) had 45,X/46,X,i (Xq), 23 cases (10.6%) had 45,X/46,X,+mar and 14 cases (6.6%) had 45,X/46,XY. 4) Out of 210 cases of secondary amenorrhea, 181 cases (86.2%) had the normal chromosome constitution and 29 cases (13.8%) had the abnormal chromosome. 5) In 29 cases of abnormal chromosome of secondary amenorrhea, 7 cases (24.1%) had 45,X/46, X,i (Xq), 4 cases (13.8%) had 45,X/46,XX. Conclusion: High percentage of chromosomal abnormalities was diagnosed in primary amenorrhea and most of them were sex chromosome anomalies. In secondary amenorrhea, the prevalence was lower than primary amenorrhea, so a preselection of patients with secondary amenorrhea for cytogenetic investigations seems to be necessary.
Kim, Jin-Woo;Kim, Tae-Jin;Park, So-Yeon;Nam, Sung-A;Jun, Jong-Young
Journal of Genetic Medicine
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v.3
no.1
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pp.5-10
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1999
This is a case report of 46,XY female phenotype (46,XY karyotype, no pubic hair, blind vagina and absence of uterus)in an 18-year-old patient. To confirm whether a Y chromosome has a structural abnormality, fluorescent in situ hybridization (FISH) with the chromosome X/Y cocktail probe was simultaneously performed, and the six loci [PABY, RPS4Y(sy16, sy17), ZFY, DYS14] on the short arm, one locus (DYZ3) on the centromere and one locus (DYZ1) on the long arm were amplified by polymerase chain reaction (PCR). The probes used FISH hybridized to centromere of the X chromosome and heterochromatin region (Yq12) of the Y chromosome, and all PCR related Y chromosome showed positive band like normal male. From the results obtained, it seemed that the Y chromosome from the 46,XY female was structurely normal. Especially, the SRY gene has been equated with the mammalian testis-determining factor, and absence or point mutation in the SRY gene causes XY female. To detect the point mutations of SRY sequences, single-strand conformation polymorphism (SSCP) assay was used. Our results confirm that this patient has no mutation in the SRY gene on the Y chromosome.
The effect of rye B chromosome (rye B) on chromosome association was investigated in meiosis of wheat addition line. The wheat addition line was with one Leymus mollis chromosome and one L. racemosus chromosome which are under homoeologous relationship. Chromosome behavior of the two Leymus chromosomes in wheat genetic background was revealed by genomic in situ hybridization. In the first metaphase, most of the two Leymus chromosomes showed univalent in the wheat addition line without rye B (98.1 ± 0.5%). On the other hand, the wheat addition line with rye B showed higher frequency of bivalent (10.3 ± 0.2%) than wheat addition line without rye B (1.9 ± 0.5%). The wheat addition line without rye B showed abnormal bivalents with abnormal structure while the wheat addition line with rye B showed normal bivalent in low frequency. By rye B, some bivalent was composed of wheat and L. racemosus, and some trivalent was composed of wheat bivalents with L. mollis chromosome. Also, some wheat bivalents showed hyper-crossover, so those wheat bivalents showed abnormal structure compared to other wheat bivalents with normal structure such as ring, rod, and pan.
This was carried out to develop a chromosome-doubled (12x) persimmon that will be used as a crossing parent to select seedless persimmon cultivars with the change of the consumption trend recently. To obtain a chromosome-doubled (12x) persimmon, colchicine was applied at the meristem of seedlings in vitro derived from cross among hexaploid persimmon (Diopyros kaki Thunb.). These were treated with 0.03%, 0.05% and 0.1% colchicine respectively for doubling chromosome, and it was most effective at the concentration of 0.05% colchicine. After colchicine treatment, we conducted tests to elucidate conditions for inducing shoot and root development. As the result, the shoots grew best when cultivated at 1/2MS media plus 10 and $30{\mu}M$ zeatin respectively, and the roots grew best when cultivated at 1/2MS media after dipping for 5 seconds at 10 mM NAA+5% DMSO. We also compared seedlings that have chromosome (6x) do not doubled and crossing parents (6x) and chromosome-doubled seedlings (12x). As the result, these chromosome-doubled seedlings (12x) showed lower stomatal density and larger stomatal size.
The next generation sequencing has significantly contributed to clarify the genome structure of many species of zootechnical interest. However, to date, some portions of the genome, especially those linked to a heterogametic nature such as the Y chromosome, are difficult to assemble and many gaps are still present. It is well known that the fluorescence in situ hybridization (FISH) is an excellent tool for identifying genes unequivocably mapped on chromosomes. Therefore, FISH can contribute to the localization of unplaced genome sequences, as well as to correct assembly errors generated by comparative bioinformatics. To this end, it is necessary to have starting points; therefore, in this study, we reviewed the physically mapped genes on the Y chromosome of cattle, buffalo, sheep, goats, pigs, horses and alpacas. A total of 208 loci were currently mapped by FISH. 89 were located in the male-specific region of the Y chromosome (MSY) and 119 were identified in the pseudoautosomal region (PAR). The loci reported in MSY and PAR were respectively: 18 and 25 in Bos taurus, 5 and 7 in Bubalus bubalis, 5 and 24 in Ovis aries, 5 and 19 in Capra hircus, 10 and 16 in Sus scrofa, 46 and 18 in Equus caballus. While in Vicugna pacos only 10 loci are reported in the PAR region. The correct knowledge and assembly of all genome sequences, including those of genes mapped on the Y chromosome, will help to elucidate their biological processes, as well as to discover and exploit potentially epistasis effects useful for selection breeding programs.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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