수용성 식이섬유의 섭취는 혈청 콜레스테롤 저하효과가 있으며 , 그 작용기 작으로는 수용성 식이섬유의 점성으로 인한 콜레스테롤과 담즙산 흡수저해, 대장내 미생물 발효로 생성 된 단쇄지방산에 의한 콜레스테롤 합성률 변경 및 담즙산 합성증가 등으로 설명되어진다. 그러나 명확한 작용기전은 규명 되지 않았다. 본 연구에서는 간세포 핵내의 CYP7A1의 발현에 호르몬과 식이섬유의 발효로 생성된 단쇄지방산이 미치는 영향을 알아보았다. 사람의 간세포(HepG2 세포)의 배양배지에 insulin, dexamethasone 및 triiodothyronine을 각각 $1\;{\mu}M$ 투여하고 24시간 배양하였다. Semi-quantitative RT-PCR기법에 의해 CYP7A1 mRNA발현을 측정한 결과, dexamethasone에서 가장 높아 $173\%$의 증가를 나타내었고, 그 다음으로 insulin에서 $150\%$, triiodothyronine 에서 $141\%$의 증가를 나타내었다. 이처럼 transient transfection을 하지 않은 HepG2 세포에서 생리적 조절자로 알려진 insulin, dexamethasone 및 triiodothyronine이 CYP7A1의 발현을 모두 증가시킨다는 결과는 본 연구에서 처음으로 규명하며, rat gene and/or human gene 발현이 다르게 조절됨을 제안한다. 단쇄지방산에 의한 HepG2 세포에서의 CYP7A1 유전자의 발현 정도를 측정하기 위해서 actetate, propionate 및 butyrate를 각각 1 M농도로 24시간 동안 배양한 결과, 모든 단쇄지방산이 CYP7A1의 발현을 증가시켰다. Acetate와 propionate는 유사한 효과를 나타내어 대조군에 비하여 1.8배의 증가를 나타내었으며 , butyrate는 1.5배의 증가를 보였다. 이상의 결과는 수용성 식이섬유 섭취시 나타나는 콜레스테롤 저하 효과는 수용성 식이섬유의 대장 발효가 대장을 자극함으로써 내인성 호르몬의 변화를 통해서 나타나거나 대장내 발효산물인 actetate, propionate 및 butyrate 등이 흡수되어 간에서의 CYP7A1의 up-regulation에 의한 담즙산 배설증가에 따른 결과로 설명할 수 있을 것이다. 단쇄지방산의 CYP7A1 발현에 미치는 작용은 acetate와 propionate가 butyrate보다 큼을 알 수 있었다.
당 및 지질 대사 조절의 이상으로 인한 대사성 질환 중의 하나인 고지혈증은 현대사회에서 급격하게 증가하고 있다. 이러한 문제를 해결하기 위하여 부작용이 적은 천연물을 사용하는 사례들이 급증하고 있는데, 특히 이 연구에서는 초미세 분말을 첨가한 홍삼을 이용하여 지방세포 및 쥐 혈액, 간, 그리고 지방조직에서 지질, 콜레스테롤, 당, 과산화 수치를 확인함으로써 홍삼의 효능을 관찰하였다. 세포 실험 결과, 특정한 홍삼 농도($50{\mu}g/mL$)에서 지질 형성을 미세하게 억제하고 있음을 알 수 있으며, 동물 실험에서도 마찬가지로 저농도의 홍삼을 처리하였을 때 혈중 총 콜레스테롤 수치가 가장 감소하였고 HDL-콜레스테롤 수치 또한 증가하는 것으로 밝혀졌으며, 이는 심혈관위험지수 및 동맥경화지수를 낮춰준다. 그뿐만 아니라 저농도 홍삼 식이법 시행군에서 지질대사 관련 단백질인 AMPK의 발현량이 증가하였는데, 이는 특정 농도의 홍삼이 AMPK 활성화를 높임으로써 지방 및 콜레스테롤 합성 억제를 돕는 것으로 판단된다. 따라서 본 연구는 홍삼이 대사성 질환인 고지혈증 치료 및 예방에 도움을 주는 천연물 후보임을 시사하는 바이다.
인슐린 저항성에 기인하여 발병되는 제 2형 당뇨를 유발시킨 흰쥐로부터 8주간 B. sarmienti 열수추출물 급여 후 혈당 및 혈중지질 변화를 알아보았다. 시험기간 동안 음수량, 사료 섭취량, 혈당 모두 정상군과 비교하여 당뇨실험군에서 8주동안 유의적으로 높게 지속되었다. 따라서 제 2형 당뇨모델에서 B. sarmienti 열수추출물의 혈당개선효과는 나타나지 않는 것으로 조사되었다. 그러나 혈중 총콜레스테롤, HDL-콜레스테롤, LDL-콜레스테롤 함량 변화를 측정한 결과 정상군과 비교할 때 당뇨대조군에서는 상대적으로 증가하였으나, B. sarmienti 열수추출물 급여로 유의적인 감소현상과 함께 정상군과 비슷한 수준을 유지 하였다. 특히 B. sarmienti 열수추출물 급여에 따른 혈중 총콜레스테롤 변화는 BW1 34.3%, BW2 43.8%로 평균 39.0%의 감소효과를 나타내었다. 또한 혈중 중성지방 변화는 BW1 48.5%, BW2 47.2%로 평균 47.9%의 감소현상을 나타내었다. 따라서 B. sarmienti 열수추출물의 농도 의존적인 변화는 관찰할 수 없었으나, 혈중 지질 개선효과가 있는 것으로 조사되었다. 본 연구에서 제 2형 당뇨모델에서 8주 동안 B. sarmienti 열수 추출물을 투여하면서 당뇨병의 주요증세인 다갈(polydipsia), 다뇨(polyuria), 다식(polyphagia), 고형당의 혈당조절 효과는 관찰할 수 없었으나, 고혈당을 중심으로 지질대사 이상과 함께 합병증 유발이 문제시 되고 있는 당뇨환자의 체내 지질대사 개선에는 효과를 기대할 수 있을 것으로 사료된다.
단백질의 종류 및 급여수준이 고콜레스테롤혈증 흰쥐의 체내 지질대사에 미치는 영향을 구명학자 1% 콜레스테롤과 0.25%의 콜산나트륨을 첨가하여 고콜레스테롤 혈증을 유도토록 조제한 실험식이에 대두단백질과 카제인의 공급수준을 달리하여 급여하고 혈청내 지질대사를 관찰하였다. 혈중 총지질 함량은 콜레스테롤 투여시 정상군에 비해 유의적으로 증가되었으며 단백질 급여로 증가가 억제되는 것으로 나타났으며 대두단백질이 더 유의적으로 억제되었다. 트리글리세라이드는 콜레스테롤 투여군이 정상군에 비해 유의적으로 증가되었으며 단백질 급여로 증가가 억제되었으며, 단백질의 종류에 따른 차이는 관찰되지 않았고 인지질 함량은 콜레스테롤 투여군이 정상군에 비해 유의적으로 감소되었다. 총 콜레스테롤 함량과 유리 콜레스테롤 함량은 정상군에 비해 골레스테롤 투여군 모두에서 유의적으로 증가되었으며, 카제인 급여군에 비해 대두단백 급여시 유의적으로 증가가 억제되는 것으로 나타났다. VLDL- 및 LDL-콜레스테롤 함량은 정상군에 비해 콜레스테롤 투여시 유의적으로 증가하였으며, 단백질 급여 수준이 증가할수록 그 증가가 억제되는 것으로 나타난 반면, HDL-콜레스테롤 함량은 콜레스테롤 투여로 인해 유의적으로 감소되었으며 대두단백질이 카제인에 비해 감소 정도가 유의적으로 억제되었다. 이상의 결과에서 단백질의 종류와 급원이 지질함량에 영향을 미치므로써 고콜레스테롤 혈증을 예방·치료하기 위하여 단백 급여, 특히 대두단백 급여가 중요한 요인으로 작용할 것을 사료된다.
고지혈증은 체내 지질대사에 이상이 생겨 혈중의 지질이 비정상적으로 높아진 상태로서, 지질이 필요 이상으로 혈액내 존재하게 되면 혈관벽에 쌓이고 굳어지게 되면서 동맥경화증, 고혈압, 뇌졸중 등의 심혈관계 질환을 일으키기도 한다. 본 연구에서는 고콜레스테롤 식이로 고지혈증을 유도한 생쥐의 동물모델에서 복분자 추출물의 유효성분인 protocatechuic acid(PCA)를 경구 투여하여 PCA의 간손상 보호 효과와 지질 대사함량 변화를 분석함으로써 PCA의 고지혈증 치료에 대한 유의적인 임상 효과를 제시하였다. PCA의 투여는 고콜레스테롤 식이에 의한 간무게 증가, 비장무게의 증가, 흉선의 위축, 신장의 위축 등 장기무게변화에 대하여 회복 효과를 보였고, 혈청 내 간세포 손상 마커 GPT 및 GOT의 회복 효과를 나타내었으며, 혈청 내 총콜레스테롤, 중성지방, HDL, LDL의 지질대사산물의 profile에서도 유의적인 회복효과를 보였다. 특히, PCA의 투여군에서는 혈중 HDL의 농도를 정상식이군 수준으로 높이고, LDL의 농도를 크게 낮추는 효과를 나타냄으로써 HDL/LDL의 균형유지에 역할을 나타내는 것으로 보이며 이러한 효과는 simvastatin의 HDL/LDL 조절 효과와는 다른 패턴을 보이고 있다. 따라서 PCA는 단독으로 고지혈증 치료의 기능성 소재로써의 개발 가능성뿐만 아니라, 합성의약품 simvastatin 등의 스타틴계 약물의 보조제로써의 개발 가능성을 제시한다.
폐경 후 여성의 비만은 독특한 생리적 현상으로 음식물 섭취가 촉진되고, 몸무게와 지방조직이 증가되고, 정상 여성보다 혈류 관련 질환 발병이 높아지는 것으로 알려져 있다. 이에 본 연구에서는 갱년기를 유도한 흰쥐에 다시마 추출물을 투여하여 체내 지질 함량 변화에 대해 그 효과를 검토하였다. 그 결과 난소를 절제한 OVX-control군이 난소를 절제하지 않은 Sham군보다 체중이 뚜렷이 증가하는 경향을 보였으며, 다시마 추출물이 체중감소에는 크게 영향을 미치지 않았다. GOT 활성에서는 난소를 절제한 OVX-control군이 난소를 절제하지 않은 Sham군에 비해 GOT 활성이 증가하였으나, 난소를 절제한 후 다시마 추출물 투여에 의해 난소를 절제하지 않은 Sham군보다 GOT활성이 더 감소하는 결과가 나타났다. GPT 활성에서는 난소를 절제 한 후 다시마 추출물을 투여한 군에서는 OVX-control군에 비해 감소하는 경향을 보였는데, 특히 OVX-ST200군에서 감소하는 결과가 나타났다. 난소 절제 후 다시마 추출물 투여는 난소 절제로 인해 야기되는 혈중 총 콜레스테롤의 함량 및 혈청 지질 농도의 증가를 감소시켰다. 또한, HDL-콜레스테롤은 난소절제 군에 비해 난소절제 후 다시마 추출물을 투여하였을 때 혈중 함량이 증가하였다. 이상의 결과에서 다시마 추출물이 갱년기 장애 시 발생할 수 있는 혈 중 지질 함량 변화에 효과가 있는 것으로 나타나 혈류 관련 질환에 대한 개선 식품으로의 활용이 기대된다.
배아줄기세포를 이용한 치료법 개발을 위해서는 배아줄기세포의 자가재생산 및 분화과정을 조절하는 분자적 기전을 이해하는 것이 매우 중요하다. 지질합성경로(Mevalonate pathway)에 작용하는 HMG-CoA 환원효소(Hydroxymethylglutaryl-coenzyme A reductase)의 억제제인 스타틴은 콜레스테롤 저하제로 잘 알려져 있으며, 콜레스테롤 이외에 단백질 isoprenylation의 기질로 작용하는 아이소프레노이드(Isoprenoids)(Farnesyl pyrophosphate(FPP), Geranylgeranyl pyrophosphate(GGPP))의 생성을 억제하는 효능을 가지고 있다. 스타틴에 의해 매개되는 표적단백질의 isoprenylation 억제는 다양한 세포내 신호전달과정에 영향을 미치게 되며, 결과적으로 세포기능을 조절하는데 핵심적인 역할을 하게 된다. 스타틴이 첨가된 배양배지에서 배양된 배아줄기세포는 자가재생산능이 억제되고 분화가 촉진되는데, 특히 지방/골세포 직계열로의 분화가 촉진된다. 배아줄기세포에서의 스타틴의 효과 및 작용기전에 대한 이해가 아직은 미비한 수준이나, 최근 우리 연구팀에서는 스타틴이 콜레스테롤 작용과는 무관하게 RhoA G-단백질의 세포내 분포 및 활성을 억제함으로써 배아 줄기세포의 자가재생산능을 억제하고 있음을 규명하였다. 스타틴 다면효과와 그 작용에 대한 이해는 배아줄기세포의 미분화 및 분화상태를 조절하는데 관여하는 분자적 조절기전을 이해하는데 중요한 모델이 될 수 있을 것으로 추정된다.
The effects of dried leaf powders and water and ethanol extracts of persimmon and green tea on lipid metabolism, lipid peroxidation and antioxidative enzyme activity were investigated in 12-month-old rats. Forty-nine male Sprague-Dawley rats weighing 520$\pm$19g were blocked into seven groups according to body weight. Rats were raised for four weeks with control(no tea leaf powder or extracts) and experimental diets containing either 5%(w/w) dried leaf powders of persimmon(Diospyros kaki Thunb) or green tea(Camellia sinensis O. Ktze), or water or ethanol extract from equal amounts of each dried tea powder. Food intakes of all tea diet groups were higher than that of control. Weight gains and food efficiency ratios of all tea diet groups were not significantly different from those of control. All tea diets decreased plasma triglyceride level, especially, green tea powder and persimmon ethanol diets were more effective than other diet. All the tea diet groups showed decrease in liver triglyceride level, and persimmon powder and ethanol extract increased fecal triglyceride excretion. Plasma cholesterol levels of all the tea diet groups were not significantly different from the control, but control. Fecal cholesterliver cholesterol concegroups were significantlntrations of all tea y lower than that of ol excretions of persimmon powder, green tea ethanol extract, persommon ethanol extract and green tea ethanol extract groups were significantly higher than that of control. Plasma and liver thiobarbituric acid reactive substance(TBARS) concentrations of all the tea diet groups were lower than that of control. Especially, plasma TBARS concentrations of green tea powder and persimmon ethanol extract groups were sinificantly low. Red blood cell(RBC) superoxide dismutase(SOD) activities of persimmon ethanol extract and green tea water extract groups were increased, and RBC catalase activities of all experimental groups were not significantly different. RBC glutathione peroxidase(GSH-px) activities of persimmon ethanol extract, persimmon water extract and green tea powder groups were increased. Liver SOD activities of all the tea diet groups except green tea ethanol extract group were higher than that of control. Liver catalase activities of all experimental groups were not significantly different, and liver GSH-px activity of green tea powder group was significantly higher than that of control. In conclusion, dried leaf powders, and water and ethanol extracts of persimmon and green tea were effective in lowering lipid level, inhibiting lipid peroxidation and increasing antioxdative enzyme activities in 12-month-old rat. Green tea leaf powder with high contents of flavonoids and water soluble dietar fiber was most effective in lowering plasma triglyceride, cholesterol and TBARS level. (Korean J Nutrition 34(3) : 285~298, 2001)
한국식품영양과학회 2001년도 International Symposium on Food,Nutrition and Health for 21st Century
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pp.74-87
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2001
Evidence shows that the serum level of cholesterol (CH) is decreased with increasing green tea (GT) consumption. This presentation summarizes our recent findings on the effect of GT extract on intestinal absorption of [$^{14}C$-labeled CH and phosphatidylcholine (PC). Ovariectomized (OX) adult rats were infused intraduodenally with lipid emulsions containing radiolabeled lipids [$^{14}C$-CH or $^{14}C$-phosphatidylcholine (PC)] in the presence of GT extract or catechins to determine the rates and amounts of CH absorption and the intestinal hydrolysis and lymphatic output of PC. During lipid infusion, lymph was collected hourly for 8 h. The lymphatic absorption of $^14C$-CH was drastically lowered by infusion of GT extract at two dosage levels (GTl =5.4 mg catechins/h and GT2 = 15.1mg catechins/h). The cumulative lymphatic absorptions of $^{14}C$-CH in rats infused with GT1 and GT2 were 20.7$\pm$4.3 and $4.8{\pm}4.1{\%}$ dose, respectively, whereas the absorption of $^{14}C$-CH in rats infused with no GT extract (GT0) was $36.3{\pm}1.1{\%}$ dose. GT extracts also significantly lowered the absorption of-tocopherol (TP) in a dose dependent manner ($29.6{\pm}4.9{\%}$ dose in GT0, $20.8{\pm}5.8{\%}$ dose in GTl, and $7.9{\pm}5.4{\%}$ dose in GT2 groups). Both (+)-catechin and EGCG significantly lowered the lymphatic outputs of $^{14}C$-radioactivity after intraduodenal $^{14}C$-PC infusion. A significantly higher amount of $^{14}C$-PC remained unhydrolyzed in the intestinal lumen of the EGCG rats ($22.8{\%}$) compared with the (+)-catechin ($15.8\%$) and control groups ($11.9\%$). GT extracts, (+)-catechin, and EGCG significantly reduced the absorption of TP. The inhibitory effect of GT extract and catechins on lipid absorption may be mediated in part through the inhibition of pancreatic PLAz. The findings provide the first direct evidence that green tea and catechins have a profound inhibitory effect on the intestinal absorption of CH in OX rats. Results suggest that green tea and catechins may be used as a dietary or pharmacological means of lowering cholesterol absorption.
본 연구에서는 선행연구에서 우량 콩나물로 선별된 이소 플라본을 다량 함유한 콩나물의 투여가 실험적으로 유발된 고지혈증 흰쥐의 지질대사에 미치는 효과를 조사하였다. 고지혈증은 SD계 흰쥐에 cholesterol 0.5%, lard 9.3%, sodium cholate 0.2%를 함유한 AIN standard식이에 의해 유발되었다. 실험군은 정상 대조군, 고지혈증 대조군, 고지혈증 유발식이에 1%, 5% 콩나물 분말, 또는 0.2% 대두 이소플라본 추출물 보충군으로 하였다. 실험식을 4주간 투여한 후 혈장 지질과 과산화물 수준, 간조직의 항산화효소 활성도, 혈장 항산화 영양소 수준을 측정하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 콩나물 분말의 보충 투여는 고지혈증 동물의 식이효율$(0.33{\sim}0.34)$에 영향을 미치지 않았으며 고지혈증 쥐에서 혈장 중성지질의 저하 경향을 보였으며 총 콜레스테롤 농도의 유의적인 저하효과를 나타내었다. 또한 콩나물 분말 투여는 고지혈증 동물들에서 투여량에 관계없이 혈장과 간, 신장, 심장 등 조직 중의 지질과산화물 수준을 낮추는 경향을 보였으나 그 저하효과는 대두 이소플라본 추출물의 효과보다는 낮았다. Catalase와 glutathione peroxidase 등 항산화효소들의 활성도는 고이소플라본콩나물의 투여로 대조군에 비해 유의적이지는 않았지만 증가되는 경향을 나타냈으며 혈장의 vitamin A수준은 5% 콩나물 투여군에서 유의적으로 높았고 vitamin E 수준은 유의적인 차이가 없었다. 이상의 결과로부터 이소플라본이 풍부한 콩나물의 투여는 고지혈증 동물에서 혈중지질 개선효과가 대두 이소플라본 추출물의 효과와 유사하거나 더 높은 것으로 나타났으며, 유의적이지는 않았으나 조직중 지질과산화물생성을 억제하고 항산화영양소 수준을 높이는 경향을 나타내었다. 이와 같은 결과는 본 실험에서 사용한 콩나물 시료가 높은 이소플라본 함량 이외에도 식이섬유를 다량 함유하고 있으므로 섬유에 의한 부가적인 효과에 의한 것으로 추정되며 콩나물의 영양적 우수성을 일부 입증한 결과로 평가된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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