This study presents a sensitive and reliable method for determining tetracycline (TC), oxytetracycline (OTC), and chlortetracycline (CTC) residues in shrimp samples. A two-step process involving liquid-liquid extraction (LLE) followed by solid-phase extraction (SPE) was developed prior to HPLC analysis. The target analytes were effectively extracted using EDTA/McIlvaine buffer (pH 4.0): methanol (80:20, %v/v), with subsequent clean-up using a C18 SPE cartridge. HPLC separation was conducted on a C18 column (250 mm × 4.6 mm i.d., 5 ㎛) at 30 ℃, using 0.01 % trifluoroacetic acid (A) and acetonitrile (B) as the mobile phase. A gradient elution protocol was applied, transitioning from 85(A):15(B) %v/v to 70(A):30(B) %v/v at 7 min, with a 5 min hold, followed by adjustment to 85(A):15(B) %v/v for 13-14 min. The detection was performed using photodiode array (PDA) at 365 nm with a flow rate of 1.0 mL/min. The calibration curves exhibited good linearity within a concentration range of 0.4-6.0 ㎍/mL (R2 > 0.995). The limits of detection (LOD) for TC, OTC, and CTC in shrimp were 0.034, 0.029, and 0.021 ㎍/mL, respectively. The limits of quantitation (LOQ) for TC, OTC, and CTC were found to be 0.114, 0.097, and 0.071 ㎍/mL, respectively. Recoveries of TC, OTC, and CTC from spiked shrimp samples ranged from 91.0 % to 95.5 %, 92.4 % to 97.2 %, and 93.3 % to 96.6 %, respectively. This method was successfully applied to the determination of TC, OTC, and CTC residues in shrimp samples sourced from various local markets.
본 연구는 지황, 천궁, 감초, 오미자, 차전자, 산약, 둥글레, 당귀 그리고 황백 등을 배합한 복합생약제제의 비육돈 사료내 첨가가 성장율과 도체특성에 미치는 영향을 조사하기 위해 실시하였다. 시험 1은 개시시 체중 81.58±3.20㎏의 3원교잡종[(Duroc×Yorkshire)×Landrace]비육돈 80두를 공시하여 45일간 사양시험을 실시하였다. 시험설계는 옥수수-대두박 위주의 사료인 1) NC(negative control; antibiotics-free diet), 2) PC(positive control; NC diet added 0.1% of chlortetracycline), 3) NCM(NC diet added 0.1% of herbal plant mixture) 그리고 4) PCM(PC diet added 0.1% of herbal plant mixture)의 4개의 처리구로 하여 처리당 5반복, 반복당 4두씩 완전임의 배치하였다. 시험 1에서는 사양기간동안 일당증체량에서는 대조구에 비해 생약제 첨가구인 HPM과 PHMP 처리구가 높았으며(P<0.08), 무항생제 처리구(NC)에 생약제를 첨가하므로서 체중의 증가 효과를 보였다. (P<0.01). 사료섭취량과 사료효율에 있어서는 PC처리구와 NCM처리구에서 증가를 보였으나 처리구간의 유의적인 차이는 없었다. Total protein에서는 항생제가 없는 대조구에 생약제를 첨가하므로서 증가 효과가 있었다(P<0.04). 시험 2는 개시시 체중 77.36±2.0l㎏의 3원교잡종[(Duroc×Yorkshire)×Landrace] 비육돈 100두를 공시하여 28일간 사양시험을 실시하였다. 시험설계는 옥수수-대두박 위주의 사료인 1) NC(negative control; antibiotics-free diet), 2) PC(positive control; NC diet added 0.1% of chlortetracycline), 3) PM0.1(NC diet added 0.1% of herbal plant mixture) 그리고 4) PM 0.2(NC diet added 0.2% of herbal plant mixture)의 4개의 처리구로 하여 처리당 5반복, 반복당 5두씩 완전임의 배치하였다. 시험 2에서는 사양기간동안 PM0.1 처리구가 다른 처리구들보다 증체량이 증가 되었으나 유의적인 차이는 보이지 않았다. 도체중에서는 대조구가 다른 처리구와 비교하여 높게 평가되었다(P<0.06). 등지방 두께에서는 PC처리구가 다른 처리구보다 높았지만 유의적인 차이는 보이지 않았다. 하지만 도체 등급에서는 생약제를 첨가한 처리구가 대조구 보다 A등급율이 높게 나타났다(P<0.04). 이상의 결과로 종합하여 볼 때 비육돈 사료내 생약제의 첨가는 성장율이나 혈액 내 면역글로불린에 좋은 영향을 미치는 것으로 보인다.
The effect of ammonium ion concentration on the production of demethyl- chlortetracycline (DMCT) by a DMCT overproducing mutant, Streptomyces aureofaciens 27VR, and the optimal control of pH were studied. The optimum levels of pH control were 6.5-6.6 for 80-120 hr, 6.4- 6.5 for 121-150hr and 6.3-6.4 for 151-190hr. The optimum level of ammonium ion concentration during the pH control was lower than 20 mg%. Under the optimized culture condition, it was possible to produce DMCT with an 18% increase in productivity compared to that of standard culture condition in 190hrs of the fermentor operation.
This study was carried out to compare the residual antibiotic materials in muscles of slaughter cattle and swine from slaughterhouses in Seoul from 2000 to 2001 by EEC-4-plate method, Charm II and HPLC method. 1. Residual antibiotic materials were detected from 95 samples(0.8%) by EEC-4-plate and 57 samples(10.2%) by Charm II. The final HPLC method determined the positives are 43(45.3%) and 27(47.3%) respectively. 2. The detection ratios were 45% by EEC-4-plate and 47% by Charm II. 3. Seventy samples were classified as tetracyclines 56(75.7.4%), sulfonamides 10(14.9%), $\beta$-lactam 6(8.1%) chloramphenicol 1(1.4%). Three of them were confirmed to be positive simmultaneously for tetracyclines, sulfonamides and chloramphenicol. 4. The highest residual concentration of chlortetracycline, oxytetracycline, sulfamethazine, sulfadimethoxine, sulfaquinoxaline, penicillin, ampicillin and chloramphenicol were 0.34, 11.29, 68.16, 0.13, 4.0, 0.12, 0.4 and 0.04ppm, respectively.
2010년 발생한 가축전염병인 구제역(FMD)으로 인해 전국에 약 4,700여개소에 가축 매몰지가 조성되었다. 매몰된 가축의 부패 과정에서 발생하는 침출수는 항생제와 같은 다양한 오염물질들을 함유하고 있어 주변 토양 및 수계로 유입되는 경우 환경에 악영향을 초래할 수 있다. 이와 같이 환경에 잔류하는 항생제는 내성박테리아 생성 등을 통해 인간건강 및 생태계 건전성을 위협할 수 있다. 이에 본 연구에서는 가축 매몰에 의한 항생제 오염수준을 평가하기 위해 가축 매몰지 및 인근 농경지 토양에서 항생제 모니터링을 실시하였다. 모니터링 대상 항생제로는 축산용 항생제로 사용량이 가장 많은 tetracycline 계열의 tetracycline (TC), chlortetracycline (CTC), oxytetracycline (OTC)와 sulfonamide 계열의 sulfamethazine (SMZ), sulfamethoxazole (SMX)을 선정하였다. 항생제의 잔류농도는 매몰지 (TC: $144.26-350.73{\mu}g/kg$, SMZ: $17.72-44.94{\mu}g/kg$)가 인근 농경지 (TC: $134.16-320.73{\mu}g/kg$, SMZ: $6.48-8.85{\mu}g/kg$)에 비해 높은 것으로 나타났으며 CTC, OTC, SMX는 검출되지 않았다. 연구결과를 통해 단정할 수는 없으나 매몰된 가축사체에 함유된 항생제가 매몰지 및 인근 토양에 축적될 수 있는 개연성이 있는 것으로 판단되었다. 특히, 농경지에 잔류하는 항생제는 농작물에 의해 흡수되어 인간 건강에 악영향을 미치므로 이에 대한 지속적인 모니터링이 요구된다.
본 연구는 Lactobacillus plantarum (L. plantarum)과 Bacillus subtilis (B. subtilis)의 합제 (LB)를 이유자돈에 경구 투여하여, 면역반응, 설사발생 그리고 분변 중 균수변화 등에 미치는 효과를 평가하기 위해 수행하였다. 28일령의 이유자돈 100두를 대상으로 군 당 20두씩 5개 군 (NC, 항생제와 LB 무투여; PC, 0.03% chlortetracycline 투여; LB 1, LB 0.5 kg/ton feed; LB 2, LB 1.0 kg/ton feed; LB 3, LB 2.0 kg/ton feed)으로 나누어, 4주 동안 LB를 투여하면서, 1주일 간격으로 분변지수를 산출하여 군별로 기록하였으며, 투여 종료 후, 혈액 및 분변을 채취하여, 혈액시료로부터 IgG와 IFN-${\gamma}$를 분석하였고, 분변시료로부터 lactic acid bacteria (LAB)와 Enterobacteriaceae (ENT)의 수를 확인하였다. LB 투약 2주째부터, LB 2와 LB 3의 설사지수는 NC에 비해 통계적으로 유의성 있게 감소하였으며 (P<0.05), IgG와 IFN-${\gamma}$의 농도도 NC에 비해 통계적으로 유의성 있게 증가하였다(P<0.05). 또한, LB 2와 LB 3의 LAB와 ENT 수는 NC과 PC에 비해 통계적으로 유의성 있게 변화하는 결과를 나타내었다(P<0.05). 이상의 결과로부터, LB는 강력한 항생제 대체제로서 자돈 설사예방에 사용될 수 있을 것으로 사료된다.
Release of veterinary antibiotics (VSs) to agricultural environment through application of animal manure and/or animal manure-based composts to soils is of concern. The current study was conducted to examine decline of VAs during composting the chicken manure. For this, antibiotics free chicken manure (20 kg) and sawdust (10 kg) were added to the bench-scale composting apparatus and then the mixed material was spiked simultaneously with three VAs (chlortetracycline, CTC; sulfamethazine, SMZ; tylosin, TYL) at two different levels (10 and $20mg\;kg^{-1}$). Then the decline of VAs was determined using Charm II system during 53 composting period. For comparison, composting only chicken manure was included at VAs concentration of $10mg\;kg^{-1}$. During composting, the concentration of all three different VAs declined below the prospective guideline values ($0.8mg\;kg^{-1}$ for CTC, $0.2mg\;kg^{-1}$ for SMZ, and $1.0mg\;kg^{-1}$ for TYL) except CTC at $20mg\;kg^{-1}$ spiking when the chicken manure was composted together with sawdust. Interestingly, CTC at $10mg\;kg^{-1}$ spiking appeared to be declined under the guideline value without sawdust while SMZ was resistant to be declined without sawdust. Unlike CTC and SMZ, TYL showed immediate decline right after spiking TYL to composting materials regardless the spiking concentration and existence of sawdust. Appropriate composting procedure of chicken manure was able to decline the residual VAs in the manure below the prospective guideline value and the importance of organic substances on this decline was perceived.
개시시 체중 7.63, 0.41kg, 3원 교잡종 이유자돈(25일령) 60두를 공시하여, 이유자돈 사료내 재조합 인간 락토페리신 컬처(RHLC ; recombinant human lactoferricin culture)의 급여가 성장, 영양소 소화율 및 혈장내 면역글로블린 G 농도에 미치는 영향을 평가하기 위하여 20일간 사양시험을 실시하였다. 시험설계는 1) 항생제 무첨가구(NC), 2) 항생제 첨가구(PC; NC 사료 + 0.1% chlortetracycline), 3) 항생제 무첨가구 사료에 RHLC를 0.3% 첨가한 처리구 (RHLC0.3; NC 사료 + 0.3% RHLC), 4) 항생제 무첨가구 사료에 RHLC를 0.5% 첨가한 처리구 (RHLC0.5; NC 사료 + 0.5% RHLC)로 4개 처리로 하였다. 총 사양시험 기간동안, 일당증체량에 있어서는 항생제 첨가구와 비교하여 RHLC의 첨가수준이 증가함에 따라 높아지는 경향을 보였으나, 표준오차가 크기 때문에 유의적인 차이는 보이지 않았다. 일당사료섭취량에 있어서는 PC 처리구와 비교하여 RHLC0.3 처리구가 유의적으로 높았으며(P<0.05), 사료효율에 있어서는 PC 처리구와 비교하여 RHLC0.5 처리구가 가장 좋은 것으로 나타났다(P<0.05). 영양소 소화율에 있어서는 NC 처리구와 비교하여 PC, RHLC0.3 및 RHLC0.5 처리구가 유의적으로 높게 평가되었으며(P<0.05), 혈장내 면역글로블린 G 농도는 처리구간에 유의적인 차이를 보이지 않았다. 결론적으로, 이유자돈에 있어 재조합 인간 락토페린신 컬처가 항생제를 대체할 가능성이 있는 것으로 사료된다.
입상활성탄 재질별 신탄 및 사용탄에서의 tetracycline계 항생물질 4종에 대한 파과특성의 경우 석탄계 활성탄이 가장 늦게 파과에 도달하였으며, 다음으로 야자계, 목탄계 순으로 조사되었다. 또한, 물질별 활성탄에서의 파과특성을 살펴보면 tetracycline(TC)의 파과시점이 가장 늦은 것으로 나타났으며, 다음으로 oxytetracycline(OTC), chlortetracycline(CTC), minocycline(MNC)으로 나타났다. 활성탄 g당 tetracycline계 항생물질 4종에 대한 최대 흡착량(X/M)은 석탄계 활성탄이 가장 높은 것으로 나타났으며, 다음으로 야자계와 목탄계 순으로 나타났다. tetracycline계 항생물질 4종에 대한 석탄계 활성탄의 최대 흡착량(X/M)은 야자계와 목탄계 활성탄에 비해 각각 1.27$\sim$1.36배 및 1.69$\sim$1.84배 정도 높은 것으로 조사되었다. 활성탄 사용율(carbon usage rate, CUR)은 tetracycline의 경우 석탄계 재질의 활성탄이 2.96 g/일, 야자계나 목탄계 활성탄은 각각 3.40 g/day 및 4.53 g/day의 활성탄을 사용하여야만 제어가 가능한 것으로 조사되어 석탄계 활성탄이 다른 재질의 활성탄들에 비해 적은 양으로도 tetracycline계 항생물질을 제어할 수 있는 것으로 나타났으며, 나머지 tetracycline계 항생물질 3종에서도 이와 유사한 결과를 나타내었다. 또한, 석탄계 활성탄 신탄과 사용탄에 대한 CUR을 비교해보면 tetracycline의 경우 신탄을 사용하였을 경우 보다 1.3년 사용탄 및 3.1년 사용탄을 사용하였을 경우가 CUR이 1.96배 및 2.53배 정도 높은 것으로 나타났다.
최근 축산용 항생제를 함유한 축산분뇨 퇴액비를 토양에 시용하였을 때 식물체가 항생제를 흡수할 수 있음을 보여주는 연구결과가 유럽과 미국에서 발표되었다. 클로르테트라싸이클린, 타이로신, 설파메타진 등 3종의 항생제를 처리한 돈분 액비를 처리하고, 상추, 토마토, 헤어리베치 등 3종을 기른 다음 식물체의 항생제 함량을 분석하여 항생제를 처리하지 않은 대조구와 비교하였다. 클로르테트라싸이클린 22.9 mg $L^{-1}$, 타이로신 27.8 mg $L^{-1}$, 설파메타진 32.4 mg $L^{-1}$ 수준의 항생제를 처리했을 때, 생체중 기준으로 클로르테트라싸이클린은 3.4 ng $g^{-1}$ 이하, 타이로신 20.1 ng $g^{-1}$ 이하, 설파메타진은 20.9-63.3 ng $g^{-1}$가 검출되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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