Kim, Jae-Deog;Hwang, Hyun-Jin;Seo, Bo-Ram;Choi, Jung-Sup;Kim, Jin-Seog
Korean Journal of Weed Science
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v.31
no.3
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pp.229-239
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2011
This study was carried out to establish an improved bioassay system on the side of practicality, pre-emergence bioassay which is more effective in developing soil application natural herbicides. A miniaturized method which have a 50 cm2 of soil surface area and was efficient by 7 times compared to the existing soil application assay ($350cm^2$ of soil surface area) was established, in which four weed species (Echinochloa crus-galli, Digitaria sanguinalis, Aeschynomene indica, and Abutilon theophrasti) were planted and grown in greenhouse. This would be applicable when the amount of screening compound is much more than 50 mg. The initial application rate was desirable at $10,000{\mu}g\;mL^{-1}$. On the other hand, the 6 well plate assay which has 4 weed species in each well containing upland soil and could be conducted in growth chamber, was established. This assay was resulted in minimizing in level of 1/14 test volume and 1/14 amounts of test compound to the conventional method that has been used for screening of synthetic compounds in KRICT, and applicable for the small amount of test compound (less than 10 mg). Therefore, the improved bioassays established in this study would be helpful for a rapid and efficient development of soil application natural herbicides.
To establish the efficient screening method for resistance of radish to F. oxysporum f. sp. raphani, we investigated the development of Fusarium wilt of two radish cultivars, 'Songbaek' (susceptible) and 'Tokwang' (moderately resistant), according to several conditions such as inoculation methods, inoculum concentrations, and dipping periods of radish roots in spore suspension. By infected soil and soil-drenching inoculation methods, Fusarium wilt did not occur on the seedlings of both cultivars. In root dipping inoculation method using cut or non-cut roots of radish plants, the cut roots were easily infected by the pathogen than non-cut roots. And the disease development of two cultivars represented significant difference in non-cut root method. On the other hand, disease severity of Fusarium wilt on radish seedlings according to inoculum concentration increased in a dose-dependant manner, regardless of dipping periods. Using screening method established from the results, the 41 commercial radish cultivars were evaluated the degree of resistance to F. oxysporum f. sp. raphani. Among them, 6 radish cultivars were resistant, 22 cultivars were moderately resistant, and 13 cultivars were susceptible to Fusarium wilt.
The growth of carbon nanotubes(CNTs) in anodic aluminum oxide(AAO) template and their application to a field emitter are described. AAO templates were fabricated by anodizing bulk aluminum and sputtered thin Al film on Nb-coated Si wafers. After Co catalyst had been electrochemically deposited into the bottom of the pores in AAO template, CNTs were grown by pyrolyzing $C_2H_2$. Depending on the reaction conditions, CNTs grew up to or over the top of the pores in AAO template with different structures. The morphology and structure of CNTs were observed with a scanning electron microscope and a transmission electron microscope. The diameter of CNTs strongly depended on the size of the pores in AAO template and the growing conditions. The electron field emission measurement of the samples resulted in the turn-on field of 1.9-2.2 $V/{\mu}m$ and the field enhancement factor of 2450-5200. The observation of high field enhancement factors is explained in terms of low field screening effect.
About 3,000 bacterial colonies with esterase activities were isolated from soil samples by enrichment culture and halo-size on Luria broth-tributyrin (LT) plates. The colonies were assayed for esterase activity in microtiter plates using enantiomerically pure (R)- and (S)-2-phenylbutyric acid resorufin ester (2PB-O-res) as substrates. Two enantioselective strains (JH2 and JH13) were selected by the ratio of initial rate of hydrolysis of enantiomerically pure (R)- and (S)-2-PB-O-res. When cell pellets were used, both strains showed high apparent enantioselectivity ($E_{app}>100$) for (R)-2PB-O-res and were identified as Exiguobacterium acetylicum. The JH13 strain showed high esterase activity on p-nitrophenyl acetate (pNPA), but showed low lipase activity on p-nitrophenyl palmitate (pNPP). The esterase was located in the soluble fraction of the cell extract. The crude intracellular enzyme preparation was stable at a pH range from 6.0 to 11.0.
Intra-cellular drug uptake in Xenopus laevis oocyte has been elucidated using localized MR spectroscopy (MRS) and PFG NMR techniques at a 600 $MH_z$(Bruker, 14.1 T) NMR spectrometer. The localized MRS has been done with a homemade probe, and shows the intra-cellular uptake of nicotinamide. The self-diffusion of the molecule in Xenopus oocyte was obtained by PFG NMR technique. The measured data are well fitted with a linear combination of two exponential functions, which shows that there are two types of drug molecules, intra-and extra-cellular molecules. Diffusion coefficients of intra- and extra-cellular drug molecules are 3.7 $\times$$10^{-11}$$\m^{2}/s$and 6.4 $\times$$10^{-10}$$\m^{2}/s$, respectively. In the weighting factors there is shown that about 5% of drug molecule is inside the cells. These techniques can be used for drug screening in molecule-, cell-, and tissue-based preclinical test.
Solid phase peptide synthesis method, which was introduced by Merrifield in 1963, has spawned the concept of combinatorial chemistry. In this review, we summarize the present technologies of solid phase peptide synthesis (SPPS) that are related to combinatorial chemistry. The conventional methods of peptide library synthesis on polymer support are parallel synthesis, split and mix synthesis and reagent mixture synthesis. Combining surface chemistry with the recent technology of microelectronic semiconductor fabrication system, the peptide microarray synthesis methods on a planar solid support are developed, which leads to spatially addressable peptide library. There are two kinds of peptide microarray synthesis methodologies: pre-synthesized peptide immobilization onto a glass or membrane substrate and in situ peptide synthesis by a photolithography or the SPOT method. This review also discusses the application of peptide libraries for high-throughput bioassays, for example, peptide ligand screening for antibody or cell signaling, enzyme substrate and inhibitor screening as well as other applications.
For the selection of peptide specifically binding to $Pb^{2+}$, the biopanning with the commercially available Ph.D.-7 phage displayed heptapeptide library was carried out against $Pb^{2+}$ immobilized on a metal-chelating IDA (iminodiacetic acid) resin. After four rounds of screening against $Pb^{2+}$-IDA including negative selections against charged bead with metal ions other than $Pb^{2+}$ and uncharged bead, several candidate lead-binding phage peptides were initially determined based on the order of frequency from the screened phage clones. Of the selected phage peptide sequences, the peptide of the highest frequency, CysSerIleArgThrLeuHisGlnCys (CSIRTLHQC) also exhibited the strongest affinity for $Pb^{2+}$ in binding assays for individual phage clones. However, there was not a significant difference in $Pb^{2+}$ affinity between selected peptides when using synthetic heptapeptides corresponding to the displayed peptide sequences of phage clones.
A gene related to high pristinamycin yield in Streptomyces pristinaespiralis was selected by amplified fragment length polymorphism (AFLP) and its functions were investigated by gene disruption. First, a 561 bp polymorphic sequence was acquired by AFLP from high-yield recombinants compared with the S. pristinaespiralis ancestor ATCC25486, indicating that this approach is an effective means of screening for valuable genes responsible for antibiotic yield. Then, a 2,127 bp open reading frame of a gene designated spy1 that overlaps with the above fragment was identified and its structure and biological functions were investigated. In silico analysis of spy1 encoding a deduced 708-amino-acid-long serine/threonine protein kinase showed that it only contains a catalytic domain in the N-terminal region, which is different from some known homologs. Gene inactivation of chromosomal spy1 indicated that it plays a pleiotropic regulatory function in pristinamycin production, with a positive correlation to pristinamycin I biosynthesis and a negative correlation to pristinamycin II biosynthesis.
Park, Byung-Jae;Lee, Jin ll;Lee, Jiyeon;Kim, Sunja;Choi, Kyu Yeong;Park, Chul-Seung;Ahn, Joohong
Animal cells and systems
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v.5
no.1
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pp.65-69
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2001
Obtaining mutant animals is important for studying the function of a particular gene. A chemical mutagenesis was first carried out to generate mutations in C. elegans. In this study, we used ultraviolet-activated 4,5',8-trimethylpsoralen to induce small deletion mutations. A library of mutagenized worms was prepared for recovery of candidate animals and stored at $15^{\circ}C$ during screening instead of being made into a frozen stock library. In order to isolate deletion mutations in target genes, a polymerase chain reaction (PCR)-based screening method was used. As a result, two independent mutants with deletions of approximately 1.0 kb and 1.3 kb were isolated. This modified and improved reverse genetic approach was proven to be effective and practical for isolating mutant animals to study gene function at the organismal level.
[ ${\beta}$ ]Ketoacyl acyl carrier protein synthase I (KAS I) is involved in the elongation of unsaturated fatty acids in bacterial fatty acid synthesis and a therapeutic target of designing novel antibiotics. In this study, we performed receptor-oriented pharmacophore-based in silico screening of E. coli KAS I (ecKAS I) with the aim of identifying novel inhibitors. We determined one pharmacophore map and selected 8 compounds as candidates ecKAS I inhibitors. We discovered one antimicrobial compound, YKAe1008, N-(3-pyridinyl) hexanamide, displaying minimal inhibitory concentration (MIC) values in the range of 128-256 ${\mu}g/mL$ against MRSA and VREF. YKAe1008 was subsequently assessed for binding to ecKAS I using saturation-transfer difference NMR spectroscopy. Further optimization of this compound will be carried out to improve its antimicrobial activity and membrane permeability against bacterial cell membrane.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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