제강더스트 중에 미량으로 함유되어 있는 갈륨을 분리 회수하는 프로세스를 연구하였다. 2.25mol/l-$H_2SO_4$ 침출에의하여 38mg/l의 갈륨을 함유하는 수용액을 얻었다. 이 침출액 중에서 1000배 량의 철과 아연이 함유되어 있다. 침출액 중의 갈륨은 철(III)이온을 철(II)이온으로 환원하고, pH 조정한 후, 아미노카르본산형 관능기를 가진 킬레이트 수지를 이용하여 흡착 농축하였다. 1.5mol/l-$H_2SO_4$에 의한 용리액을 칼럼에 재공급하고 재농축하여, 3.0mol/l-HCl을 이용하여 용리하였다. 용리액 중의 갈륨은 13g/l의 농도를 나타내었다. 갈륨의 정제는 용매추출법에 의하여 정제하였다. 추출제로는 TOMAC(tri-n-octhylmethylammonium chloride)을 사용하여 순수한 갈륨 정제액을 얻었다.
S-Adenosyl-L-Methionine(SAM) has an important role for DNA methylation and cell signaling. SAM was synthesized from methionine and ATP by SAM synthetase and play an pivotal function in the primary and secondary metabolism of cells. Recent studies have revealed in the effect of SAM in case of morphological differentiation in both eukaryotes and prokaryotes. We isolated SAM gene from Saccharomyces cerevisiae and cloned it into expression vector for E. coli respectively. An 1.15 kb SAM-s gene fragment was isolated by Low-strigency PCR using ORF primer. By the analysed primary sequence deduced from DNA sequence, this gene included conserved domains similar with other well-known SAM synthetase. First of all, SAM synthetase gene cloned pGEM-T vector and subcloned into histidine tagging system to purify the expressed protein using metal chelating resin. Typical characteristic analysis of this enzyme is underway.
The antioxidative and protective activities of kefir, low-fat dry milk (NFDM) extract and fractions on SFME cells in serum-free medium were investigated. Kefir and low-fat kefir and NFDM extract were made by solubilizing the freeze dried powder forms in deionized water, filtering through glass prefilter, 12 ㎛ and 2 ㎛ membrane, and demineraling with chelating resin. Kefir, low-fat kefir and NFDM extract were fractioned into dialyzate and retentate by dialysis with membrane tube having the molecular cut-off of 3,500 Dalton. An antioxidative activity was analyzed by the in vitro model system using a linoleic acid. In the case of kefir an antioxidative activity was detected only in the retentate of kefir extract. On the other hand NFDM showed an antioxidative activity in extract, demineralized extract, dialyzate and retentate. The retentate of kefir extract had the higher antioxidative activity than that of NFDM extract. Kefir showed the protective effect of SFME cells in serum-free medium in extract, demineralized extract and retentate, but low-fat kefir didn't. NFDM had the similar protective effect on SFME cells as extract, demineralized extract and retentate of kefir.
For the selection of peptide specifically binding to $Pb^{2+}$, the biopanning with the commercially available Ph.D.-7 phage displayed heptapeptide library was carried out against $Pb^{2+}$ immobilized on a metal-chelating IDA (iminodiacetic acid) resin. After four rounds of screening against $Pb^{2+}$-IDA including negative selections against charged bead with metal ions other than $Pb^{2+}$ and uncharged bead, several candidate lead-binding phage peptides were initially determined based on the order of frequency from the screened phage clones. Of the selected phage peptide sequences, the peptide of the highest frequency, CysSerIleArgThrLeuHisGlnCys (CSIRTLHQC) also exhibited the strongest affinity for $Pb^{2+}$ in binding assays for individual phage clones. However, there was not a significant difference in $Pb^{2+}$ affinity between selected peptides when using synthetic heptapeptides corresponding to the displayed peptide sequences of phage clones.
폴리아민 리간드인 diethylenetriamine(dien), triethylenetetramine(trien), tetraethylenepentamine(tetren), 및 pentaethylenehexamine(penten)을 Chloromethylated Polystyrene $({\circledP}-) 수지에 반응시켜 각기 {\circledP}_L-Dien, {\circledP}_L-Trien, {\circledP}_L-Tetren 및 {\circledP}_L-Penten 수지를 합성한 후 Bjerrum법으로 pH를 측정하여 산해리상수 및 금속과의 안정도상수를 결정하였으며, Van't Hoff 식에 의해 {\Delta}H와 {\Delta}G도 구하였다. 이들 수지의 안정도상수(log k1)는 금속이온의 종류에 따라 Cu(Ⅱ) > Ni(Ⅱ) > Cd(Ⅱ) > Zn(Ⅱ) > Co(Ⅱ)의 순으로 감소하였으며, 수지중 주게 원자인 질소수가 증가함에 따라 {\circledP}_L-Dien < {\circledP}_L-Trien < {\circledP}_L-Tetren < {\circledP}_L-Penten의 순으로 증가하였다. 그리고 pH 변화에 대한 금속이온의 흡착량 및 분리도를 시험해 본 결과 이들 금속이온과의 안정도 상수값의 순서와 일치하였다.
A novel method that utilizes poly(5-methyl-2-thiozyl methacrylamide-co-2-acrylamido-2-methyl-1-propanesulfonic acid-co-divinylbenzene) [MTMAAm/AMPS/DVB] as a solid-phase extractant was developed for simultaneous preconcentration of trace Cd(II), Co(II), Cr(III), Cu(II), Fe(III), Mn(II), Ni(II), Pb(II), and Zn(II) prior to the measurement by flame atomic absorpiton spectrometry (FAAS). Experimental conditions for effective adsorption of the metal ions were optimized using column procedures. The optimum pH value for the simultaneously separation of the metal ions on the new adsorbent was 2.5. Effects of concentration and volume of elution solution, sample flow rate, sample volume and interfering ions on the recovery of the analytes were investigated. A high preconcentration factor, 100, and low relative standard deviation values, $\leq$1.5% (n = 10), were obtained. The detection limits (${\mu}gL^{-1}$) based on the 3s criterion were 0.18 for Cd(II), 0.11 for Co(II), 0.07 for Cr(III), 0.12 for Cu(II), 0.18 for Fe(III), 0.67 for Mn(II), 0.13 for Ni(II), 0.06 for Pb(II), and 0.09 for Zn(II). The validation of the procedure was performed by the analysis of two certified reference materials. The presented method was applied to the determination of the analytes in various environmental samples with satisfactory results.
A DNA extraction method using Chelex 100 is widely used for bacteria, Chlamydomonas, and animal cell lines, but only rarely for plant materials due to the need for additional time-consuming and tedious steps. We have modified the Chelex 100 protocol and successfully developed a rapid and simple method of DNA extraction for efficient PCR-based detection of transgenes from a variety of transgenic plant and algal species. Our protocol consists of homogenizing plant tissue with a pestle, boiling the homogenized tissue in a microfuge tube with 5% Chelex 100 for 5 min, and centrifuging the boiled mixture. The supernatant, which is used for PCR analysis, was able to successfully amplify transgenes in transgenic tobacco, tomato, potato, Arabidopsis, rice, strawberry, Spirodela polyrhiza, Chlamydomonas, and Porphyra tenera. The entire DNA extraction procedure requires <15 min and is therefore comparable to that used for bacteria, Chlamydomonas, and animal cell lines.
금속킬레이트제로써 잘 알려진 몇가지 oxime 화합물들의 Amberlite XAD 수지들에 대한 흡착성을 분포계수값을 측정함으로써 상호 비교해 본 결과 킬레이트제로서는 분포계수값이 비교적 큰 salicylaldoxime (SAO)과 ${\alpha}$-benzoinoxime(${\alpha}$-BzO) 그리고 수지로서는 XAD-4 수지가 적합함을 알았다. SAO과 ${\alpha}$-BzO를 XAD-4 수지에 각각 침윤시킨 SAO-XAD-4 및 ${\alpha}$-BzO-XAD-4 침윤수지의 그 특성을 조사하였다. SAO와 ${\alpha}$-BzO의 XAD-4 수지에 대한 최적 흡착조건은 30% 메탄올, pH 1∼8(SAO) 및 pH 1~9 (${\alpha}$-BzO)였다. SAO 및 ${\alpha}$-BzO의 XAD-4 수지에 대한 흡착은 온도가 증가함에 따라 감소하였으며, 그 흡착메카니즘은 흡착엔탈피(-${\Delta}$H)를 구해본 결과 4.99 ~ 6.66 (Kcal/mol)인 것으로 보아 쌍극자-쌍극자 인력에 상응하는 분자 흡착임을 알 수 있었다. 한편 금속이온을 흡착시키는 매질용액과 흡착된 금속이온을 회수하는 염산수용액에서 침윤수지의 안정성을 조사한 결과, 전자는 pH 5∼10에서, 후자는 0.1~5M 염산수용액에서 비교적 큰 안정성을 보였다. 두 침윤수지에 의한 Mn(II), Co(II), Ni(II), Zn(II)등의 금속이온의 흡착몰비는 대략 1;2(금속이온:킬레이트제)이었으며 흡착된 금속이온은 3M-HCl 수용액 또는 3M-HCl/50%-MeOH 용리액으로 정량적으로 회수가 가능하였다.
산업이 발전함에 따라 생태계로 유입되는 중금속의 양이 증가하고 있다. 중금속은 분해가 어려워 생태계 내에 장기간 잔류하고 독성을 유발한다. 이러한 중금속은 수처리 시 흡착, 여과, 화학적 침전 등 물리 화학적 방법으로 제거된다. 본 연구에서는 중금속 흡착 및 제거용 킬레이트 수지로 알긴산 비드를 선정하고 이에 따른 중금속 흡착효율을 평가하기 위하여 JEI (Jellyfish extract at immunity reaction)를 혼합하였다. JEI를 혼합한 비드는 알지네이트의 특성에 따라 납(79-99%)과 구리(64-70%)에서 높은 흡착효율을 보였으며 카드뮴(25-37%)과 아연(5-6%)에서 낮은 흡착효율을 나타내었다. 중금속 흡착은 JEI의 함량에 비례하여 증가하지 않았으나 50%와 100% JEI 비드가 유의미한 증가를 나타내었다. 반응 속도식을 적용한 결과 유사 1차 반응식보다 유사 2차 반응식에 더 적합한 것으로 나타났다. 결론적으로 비드의 생산 단가나 중금속 흡착제거 효율을 비교해보면 50% JEI 비드가 중금속 흡착제거에 적합한 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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