차가버섯 (Inonotus obliquus) 분말을 Bacillus sp.로 발효시켜 streptozotocin (STZ)-유발 당뇨쥐에 $ 5\%(w/w)$ 수준으로 첨가한 반합성 식이를 3주간 투여하여 혈당치 및 과산화지질 농도에 미치는 영향을 검토하였다. 차가버섯 및 발효 차가버섯의 다당체는 각각 $42.9\%$ 및 $39.1\%$였으며, 폴리페놀 화합물 함량은 각각 $0.80\%$및$0.91\%$였다. 식이 및 음료 섭취량, 혈청 중의 glucose, insulin, triglyceride, blood urea nitrogen농도는 당뇨 대조군과 차가버섯 투여군 보다는 발효 차가버섯 투여군에서 현저히 감소하였다. 혈청 중의 간 기능 임상치료 효소인 AST 및 ALT 활성도 발효 차가버섯 투여군에서 역시 감소하였다. 그러나 혈청 total cholesterol 및 creatinine 농도는 각 실험군간에 유의적인 차이는 없었다. 한편, 간 조직의 homogenate, microsomal 및 mitochondria 분획의 과산지질 농도는 당뇨쥐에 발효 차가버섯 투여로 현저히 감소하였다. 간 조직에서 내인성 항산화물질로 알려져 있는 glutathione 농도가 발효 차가버섯 투여군에서 현저히 증가함으로써 과산화지질 농도 억제에 의한 항산화 활성과 밀접한 관련성을 가진 것으로 나타났다 차가버섯 투여군에서는 발효 차가버섯 보다는 미약한 항산화 활성을 보였다. 이상의 결과에서 발효 차가버섯은 streptozotocin-유발 당뇨쥐에서 우수한 항당뇨 및 항산화 효과를 발휘하였다.
본 연구에서는 고전압 펄스 전기장 기술을 사용하여 식물 내 유효성분과 피부 효능을 증대시키고자 하였다. 고전압 펄스 전기장을 전처리한 차가 버섯(Inonotus obliquus) 추출물을 제조한 후, 성분 측정과 피부 효능 평가를 수행하였다. 총 당과 폴리페놀 함량은 0.5 kV/cm에서 50 Hz, 25 Hz 전처리 추출물 순으로, 총 단백질 함량은 0.5 kV/cm, 25 Hz 전처리 추출물에서 상온 물 추출물과 에탄올 추출물보다 높게 측정되었다. DPPH 소거능 효과는 폴리페놀 함량 결과와 유사하게 0.5 kV/cm에서 25 Hz, 50 Hz의 전처리 추출물에서 가장 우수하였다. 피부 효능에서는 단백질 함량이 가장 높은 0.5 kV/cm, 25 Hz 전처리 추출물에서 sodium dodecyl sulfate (SDS)와 UVB에 대한 세포 보호효과가 가장 우수하였으며, 0.5k V/cm에서 50 Hz, 100 Hz 전처리 추출물에서 히알루론산 생성 촉진이 가장 우수하였다. 따라서 고전압 펄스 전기장 전처리 차가 추출물의 유효성분, 피부 효능이 증대하는 것을 확인하여 세포 보호 및 보습 효과가 있는 기능성 소재로의 개발이 가능하며, 이러한 green technology가 화장품 분야와 소재개발에 다양하게 활용될 수 있을 것으로 기대된다.
The immunomodulatory effect of aqueous extract of Inonotus obliquus, called as Chaga, was tested on bone marrow cells from chemically immunosuppressed mice. The Chaga water extract was daily administered for 24 days to mice that had been treated with cyclophosphamide (400 mg/kg body weight), immunosuppressive alkylating agent. The number of colony-forming unit (CFU)-granulocytes/macrophages (GM) and erythroid burst-forming unit (BFU-E), increased almost to the levels seen in non-treated control as early as 8 days after treatment. Oral administration of the extract highly increased serum levels of IL-6. Also, the level of $TNF-{\alpha}$ was elevated by the chemical treatment in control mice, whereas was maintained at the background level in the extract-treated mice, indicating that the extract might effectively suppress $TNF-{\alpha}$ related pathologic conditions. These results strongly suggest the great potential of the aqueous extract from Inonotus obliquus as immune enhancer during chemotherapy.
Chaga mushroom and Cheonggukjang have been used in alternative medicine. In this study, we determined the anti-obesity effects of fermented Chaga-Cheonggukjang (FCC), an extract prepared by secondary fermentation of a mixture of Cheonggukjang and Chaga by Lactobacillus acidophilus on highfat diet (HFD)-induced mice. Male ICR mice were fed a normal diet or HFD in the presence or absence of 3% and 5% FCC (FCC3 and FCC5). After 3 months, the mice were sacrificed, and serum and tissue samples were examined. Body weight and epididymal fat pad (EFP) weight were significantly lowered in FCC3 and FCC5 groups compared to those in the HFD control group. FCC supplementation suppressed serum triglyceride (TG) and increased serum HDL levels. Serum GOT, GPT, leptin levels and hepatic COX-2 mRNA expression were significantly higher in the HFD groups, and these increases were significantly attenuated by FCC supplementation. FCC suppressed body weight and EFP weight gain, as well as inflammatory responses in the liver in HFD-fed mice. Thus, FCC supplementation may have protective effects for obesity-related disease.
The Chaga mushroom (Inonotus obliquus) has been used in folk medicine to treat cancers. However, limited information exists on the underlying anticancer effects of the major component of I. obliquus in vivo. We hypothesize that the pure compounds ($3{\beta}$-hydroxy-lanosta-8,24-dien-21-al, inotodiol and lanosterol, respectively) separated from I. obliquus would inhibit tumor growth in Balbc/c mice bearing Sarcoma-180 cells (S-180) in vivo and growth of human carcinoma cells in vitro. To test this hypothesis, the growth inhibition of each subfraction isolated from I. obliquus on human carcinoma cell lines (lung carcinoma A-549 cells, stomach adenocarcinoma AGS cells, breast adenocarcinoma MCF-7 cells, and cervical adenocarcinoma HeLa cells) was tested in vitro. Then, after S-180 implantation, the mice were fed a normal chow supplemented with 0, 0.1 or 0.2 mg of subfraction 1, 2 or 3 per mouse per day. All of the subfractions isolated from I. obliquus showed significant cytotoxic activity against the selected cancer cell lines in vitro. Subfraction 1 was more active than subfraction 2 and subfraction 3 against the A549, AGS and MCF-7 cancer cell lines in vitro. In in vivo results, subfraction 1 isolated from I. obliquus at concentrations of 0.1 and 0.2 mg/mouse per day significantly decreased tumor volume by 23.96% and 33.71%, respectively, as compared with the control. Subfractions 2 and 3 also significantly inhibited tumor growth in mice bearing S-180 as compared with the control mouse tumor. Subfraction 1 isolated from I. obliquus showed greater inhibition of tumor growth than subfractions 2 and 3, which agrees well with the in vitro results. The results suggest that I. obliquus and its compounds in these subfractions isolated from I. obliquus could be used as natural anticancer ingredients in the food and/or pharmaceutical industry.
추출조건에 따른 생리활성 영향을 검토하기 위하여 차가버섯(Inonotus obliquus)을 물($50^{\circ}C$ reflux, $90^{\circ}C$ 이상 decoction, $12^{\circ}C$ 가압추출)과 에탄올(50, 70과 $90^{\circ}C$ reflux)로 추출한 후 물 추출물을 조다당획분(IO-CP)으로 분획하였을 때 IO-CP(4.8~16.8%)의 수율은 에탄올추출물(IO-E, 1.9~2.7%)보다 높았으며 추출온도 증가에 따라 그 차이는 더 컸다. 가압추출로 조제된 조다당획분(IO-CP-121)은 가장 높은 총 폴리페놀 및 플라보노이드 함량(35.10 mg TAE/g와 18.48 mg QE/g)과 DPPH와 ABTS를 이용한 자유 라디칼소거능(26.08과 27.99 mg AEAC/100 mg)을 나타내었다. IO-CP-D(decoction)와 IO-CP-50(reflux)은 IO-CP-121보다 유의적으로 높은 마이토젠(saline 대조군의 2.10과 1.95배, 100 ${\mu}g/mL$)과 장관면역 활성(6.30과 5.74배)을 보였으나 에탄올추출물 활성은 확인되지 않았다. 또한, 모든 IO-CP는 0.1 mg/mL 농도에서 RAW 264.7 세포주에 대하여 독성을 나타내지 않았으나, IO-CP-121이 LPS-자극 RAW 264.7 세포주에 대하여 가장 유의적으로 염증성 인자인 TNF-${\alpha}$와 nitric oxide(NO) 생성을 억제하였다(29.2와 63.5%). 에탄올추출물도 0.1 mg/mL 농도에서 독성을 보이지 않았으나 TNF-${\alpha}$와 NO의 생성 억제능은 IO-CP-121보다 현저히 낮음을 알수 있었다. 한편, 활성 다당획분을 분리하기 위하여 면역활성 획분인 IO-CP-D를 DEAE-Sepharose CL-6B column에서 비흡착 획분(IO-CP-I)과 7개의 흡착 획분(IO-CP-II~VIII)으로 분획한 결과, IO-CP-II가 가장 우수한 마이토젠과 마크로파지 활성(4.51과 1.64배)을 나타내었다. 이와 같이 분리된 면역활성 획분인 IO-CP-II는 주로 중성당(61.86%)과 함께 소량의 산성당(2.96%)을 포함하고 있는 다당류임이 밝혀졌으며, 주요 구성당으로서 Glc, Gal와 Man(molar ratio of 1.00:0.55:0.31)를 포함하고 있음을 확인할 수 있었다. 이러한 결과로부터 추출조건은 차가버섯 생리활성에 중요하게 작용하고 있으며, decoction 추출방법으로 제조하여 분획한 면역활성 획분으로부터 차가버섯 면역활성은 적어도 중성 다당류가 관여하고 있음을 알 수 있었다.
차가버섯(Inonotus obliquus)의 추출물과 분획들은 항돌연변이, 항암, 항산화 및 면역자극 효과 등을 비롯하여 다양한 생물학적 활성을 갖는 것으로 알려져 있다. 본 연구는 나노분쇄 기법으로 제작된 10% 차가사료를 C57BL/6 생쥐에게 식이한 후 항암효과를 확인하기 위해 시행되었다. 부피평균에 의한 입도분석에 따르면 1 ${\mu}m$ 내에 포함되는 초미세 차가버섯 입자는 전체의 40%인 것으로 나타났다. 생쥐에게 B16BL6 흑색종세포를 피하로 주사한 결과, 종양의 부피(p<0.001)와 무게(p<0.01)는 초미세 차가버섯을 식이한 실험군(Nch)이 일반사료를 먹인 대조군(C)에 비해 현저히 감소하였고, 종양성장 억제율은 29.2%를 나타내었다. 흑색종 세포를 복강 내로 주사한 후 생존율을 관찰한 결과, 마리 당 평균 생존기간은 대조군과 실험군이 각각 17.7일과 26.0일이었다. 대조군이 모두 사망한 날인 35일 째 실험군의 생존율은 40%를 보여주었다. 초미세 차가입자가 소화기관에 문제를 유발시킬 수 있는 가능성 때문에 안전성을 확인하기 위해 소장과 대장을 조직학적으로 관찰한 결과 두 군 모두 형태학적 또는 병리학적 변화는 관찰되지 않았다.
BACKGROUND/OBJECTIVES: Inonotus obliquus (I. obliquus, Chaga mushroom) has long been used as a folk medicine to treat cancer. In the present study, we examined whether or not ethanol extract of I. obliquus (EEIO) inhibits cell cycle progression in HT-29 human colon cancer cells, in addition to its mechanism of action. MATERIALS/METHODS: To examine the effects of Inonotus obliquus on the cell cycle progression and the molecular mechanism in colon cancer cells, HT-29 human colon cancer cells were cultured in the presence of $2.5-10{\mu}g/mL$ of EEIO, and analyzed the cell cycle arrest by flow cytometry and the cell cycle controlling protein expression by Western blotting. RESULTS: Treatment cells with $2.5-10{\mu}g/mL$ of EEIO reduced viable HT-29 cell numbers and DNA synthesis, increased the percentage of cells in $G_1$ phase, decreased protein expression of CDK2, CDK4, and cyclin D1, increased expression of p21, p27, and p53, and inhibited phosphorylation of Rb and E2F1 expression. Among I. obliquus fractions, fraction 2 (fractionated by dichloromethane from EEIO) showed the same effect as EEIO treatment on cell proliferation and cell cycle-related protein levels. CONCLUSIONS: These results demonstrate that fraction 2 is the major fraction that induces $G_1$ arrest and inhibits cell proliferation, suggesting I. obliquus could be used as a natural anti-cancer ingredient in the food and/or pharmaceutical industry.
Na, Ha Gyoon;Park, Yuna;Kim, Min-Ah;Lee, Jin Woo;So, Gyeongseop;Kim, Sung Hyeok;Jang, Ki-Hyo;Kim, Mi-Ja;Namkoong, Seung;Koo, Hyun Jung;Lee, Sung Ryul;Sohn, Eun-Hwa
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제29권5호
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pp.739-748
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2019
Cheonggukjang and chaga mushrooms have numerous health benefits, and have been used in alternative medicine. Therefore, a powder mixture of 98: Cheonggukjang and 2: Chaga extracts was fermented with Lactobacillus acidophilus KCTC3925 (FCC) and its anti-obesity effects in high-fat diet (HFD)-induced obese mice were determined. Five-week-old male ICR mice were fed a normal diet or HFD in the presence or absence of 3% and 5% FCC by weight (n = 10 per group). After 12 weeks, the mice were sacrificed, and the serum and tissue samples were collected for analysis. Body weight and epididymal fat pad weight were significantly lowered in the 3% and 5% FCC groups compared with those in the HFD control group (p < 0.01). FCC supplementation suppressed serum triglyceride and increased serum HDL-C levels (p < 0.01). Serum GOT, GPT, and leptin levels, hepatic COX-2 mRNA expression, and splenic COX-2 and IL-4 mRNA expression were significantly higher in the HFD groups than in the control group (p > 0.05); however, except for splenic IL-4 levels, the increases were significantly attenuated by FCC supplementation. Expression of ICAM-1, an aortic inflammatory marker, was significantly increased in the HFD group; this effect was suppressed in the 3% FCC group (p < 0.01) but not in the 5% FCC group. FCC suppressed the body weight and epididymal fat pad weight gain, as well as inflammatory responses in the liver and spleen of HFD-fed mice. Thus, FCC supplementation will be beneficial for the treatment of obesity-related effects.
본 연구에서는 차가버섯(Inonotus obliquus)의 유효성분과 항산화능이 최대가 되는 추출물의 제조를 위하여 반응표면분석법을 이용하여 최적 추출조건을 탐색하였다. 추출 수율, 총 폴리페놀 함량, 항산화능(ABTS 자유 라디칼 소거능, ORAC), ${\beta}$-1,3-glucan 함량의 총 다섯 가지 반응변수에서 유의적인 이차 회귀식을 얻었고, 반응표면그래프와 등고선도를 통하여 최적 추출조건을 예측하였다. 각 반응변수에 따른 최적 추출조건은 추출 수율에서 50% (v/v), $88.7^{\circ}C$, 14.5 h, 총 폴리페놀 함량에서 9.2%, $92.7^{\circ}C$, 14.5 h, ABTS free radical scavanging activity에서 50.8%, $92.7^{\circ}C$, 14.5 h, ORAC에서 9.2%, $92.7^{\circ}C$, 1.5 h, ${\beta}$-1,3-glucan 함량에서 90.8%, $92.7^{\circ}C$, 1.5 h으로 예측되었다. 각 반응변수의 예측 최대추출조건에서 실제 실험을 실행하여 예측 값과 비교해본 결과, 상대오차는 0.4-12.5%였다. 각 반응 변수에서 유의적인 이차 회귀식을 얻었으며, 예측 값과 실험 값의 오차가 크지 않아 반응표면모델이 최적 추출조건을 예측하는데 적합하다고 판단하였으며, 다섯 가지 반응 변수를 통합하는 최적 추출조건은 81.4%, $92.7^{\circ}C$, 14.5 h으로 예측하였다. 본 연구는 주로 열수추출물의 형태로 유통되는 차가버섯 추출물의 품질 개선을 위하여 에탄올 용매를 포함한 최적 추출조건을 설정하였고, 구체적인 추출 수율과 생리활성물질 함량 및 항산화능이 최대가 되는 추출조건을 제시하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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