Objective : This study was designed to validate the cell trafficking efficiency of the in vivo bioluminescence image (BLI) study in the setting of transplantation of the luciferase expressing bone marrow-derived mesenchymal stem cells (BMSC), which were delivered at each different time after transient middle cerebral artery occlusion (MCAO) in a mouse model. Methods : Transplanting donor BMSC were prepared by primary cell culture from transgenic mouse expressing luciferase (LUC). Transient focal infarcts were induced in 4-6-week-old male nude mice. The experiment mice were divided into five groups by the time of MSC transplantation : 1) sham-operation group, 2) 2-h group, 3) 1-day group, 4) 3-day group, and 5) 1-week group. BLI for detection of spatial distribution of transplanted MSC was performed by detecting emitted photons. Migration of the transplanted cells to the infarcted area was confirmed by histological examinations. Differences between groups were evaluated by paired t-test. Results : A focal spot of bioluminescence was observed at the injection site on the next day after transplantation by Signal intensity of bioluminescence. After 4 weeks, the mean signal intensities of 2-h, 1-day, 3-day, and 1-week group were $2.6{\times}10^7{\pm}7.4{\times}10^6$. $6.1{\times}10^6{\pm}1.2{\times}10^6$, $1.7{\times}10^6{\pm}4.4{\times}10^5$, and $8.9{\times}10^6{\pm}9.5{\times}10^5$, respectively. The 2-h group showed significantly higher signal intensity (p<0.01). The engrafted BMSC showed around the infarct border zones on immunohistochemical examination. The counts of LUC-positive cells revealed the highest number in the 2-h group, in agreement with the results of BLI experiments (p<0.01). Conclusion : In this study, the results suggested that the transplanted BMSC migrated to the infarct border zone in BLI study and the higher signal intensity of LUC-positive cells seen in 2 hrs after MSC transplantation in MCAO mouse model. In addition, noninvasive imaging in real time is an ideal method for tracking stem cell transplantation. This method can be widely applied to various research fields of cell transplantation therapy.
Background and purpose: So far it was reported that acupuncture increased cerebral blood supply and stimulated the functional activity of brain nerve cells. A previous study demonstrated a correlation between LI4-11 electro-acupuncture (EA) and rCBF increase in frontal lobe. However, there remained a need to study further using various controls in acupuncture research. Transcutaneous electrical nerve stimulation (TENS) has been used as a non-invasive control in acupuncture study. This study was to evaluate the effect of LI4-LI11 TENS on regional cerebral blood flow (rCBF) in normal volunteers using single photon emission computed tomography (SPECT) and statistical parametric mapping (SPM). Methods: In the resting state, $^{99m}Tc-ECD$ brain SPECT scans were performed on 10 normal volunteers (9 males, 1 female, mean age 26.6$\pm$0.5 years; age range from 26 to 27 years). On the other day, 7 days after the resting examination, 15 minute TENS were applied at LI 4 and LI 11 on the right side of the subjects. Immediately after LI4-LI11 TENS, the second SPECT images were obtained in the same manner as the resting state. Significant increases and decreases of regional cerebral blood flow after LI4-LI11 TENS were estimated by comparing their SPECT images with those of the resting state using paired t statistics at every voxel, which were analyzed by statistical parametric mapping with a threshold of p = 0.001, uncorrected (extent threshold: k=100 voxels). Results: TENS applied at right LI4-LI11 increased rCBF in the left somatosensory association cortex (Brodmann area 5, 7). However there was no area where LI4-11 TENS decreased rCBF. Conclusion and suggestions: These results demonstrate that right LI4-LI11 TENS increased rCBF only in corresponding somatosensory association cortex, which was different from the previous results using LI4-11 EA. It is suggested that there be a different mechanism between TENS and EA.
Kim, Soo-Man;Shim, Eun-Sheb;Kim, Bum-Hoi;Sohn, Young-Joo;Kim, Sung-Hoon;Jung, Hyuk-Sang;Sohn, Nak-Won
대한한의학회지
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제29권5호
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pp.29-40
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2008
Objectives : It has been reported that Sophorae Subprostratae Radix (SSR) has a neuroprotective effect on cerebral ischemia in animals. In the present study, the authors investigated the neuroprotective effect of SSR on glutamate excitotoxicity. Glutamate excitotoxicity was induced by using NMDA, AMPA, and KA in PC12 cells and in organotypic hippocampal slice cultures. Methods :Methanolic extract of SSR was added at 0.5, 5, and 50 ${\mu}$g/ml to culture media for 24 hours. The effects of SSR were evaluated by measuring of cell viability, PI-stained neuronal cell death, TUNEL-positive cells, and MAP-2 immunoreactivity. Results : SSR increased PC12 cell viabilities significantly against AMPA-induced excitotoxicity, but not against NMDA-induced or KA-induced excitotoxicity. In organotypic hippocampal slice cultures damaged by NMDA-induced excitotoxicity, SSR attenuated neuronal cell death significantly in the CA1, CA3, and DG hippocampal regions and reduced TUNEL-positive cells significantly in CA1 and DG regions. In organotypic hippocampal slice cultures damaged by AMPA-induced excitotoxicity, SSR attenuated neuronal cell death and reduced TUNEL-positive cell numbers significantly in the CA1 and DG regions. In organotypic hippocampal slice cultures damaged by KA-induced excitotoxicity, SSR attenuated neuronal cell death significantly in CA3, but did not reduce TUNEL-positive cell numbers in CA1, CA3 or DG. In organotypic hippocampal slice cultures damaged by NMDA-induced excitotoxicity, SSR attenuated pyramidal neuron neurite retraction and degeneration in CA1. Conclusions : These results suggest that the neuroprotective effects of SSR are related to antagonistic effects on the NMDA and AMPA receptors of neuronal cells damaged by excitotoxicity and ischemia.
Effects of transforming growth factor-beta (TGF-${\beta}$) were investigated in human colorectal cancer, and the influence of cantharidinate in inhibiting TGF-${\beta}1$ expression was explored. Relationships among TGF-${\beta}1$ and sex, age, tumor size, tumor location, tumor stage were also analyzed. H&E and immunohistochemistry staining were employed to assess colorectal cancer and TGF-${\beta}1$ expression, respectively. Then, HCT-116 CRC cells were randomly divided into four groups, controls, no serum-treated, chemotherapy and cantharidinate-treated. Immunohistochemistry and real-time PCR were employed to assess the expression of TGF-${\beta}1$ in CRC cells. Our data showed that the expression of TGF-${\beta}1$ might be associated with tumor size and tumor location (P<0.05). The expression of TGF-${\beta}1$ in CRC groups was higher than in adjacent groups (P<0.05). In addition, the expression of TGF-${\beta}1$ in cantharidinate-treated group was much lower than in CRC group (P<0.05). Taken together, these results suggest that TGF-${\beta}1$ plays an important role in CRC development. Cantharidinate might inhibit the expression of TGF-${\beta}1$ and control the development of colorectal cancer.
Objectives : It has been reported previously that the roots of Scutellaria baicalensis (known as Huang-Gum in Korean, henceforth referred to as S. baicalensis) could prevent neuronal cell death after global cerebral ischemia. In Genuine Korean medicine, S. baicalensis is known to relieve fever in upper body, and it was thus thought to be able to alleviate deteriorations in brain function. Methods : The protective effects of S. baicalensis against post-stroke memory retardation using 4-vessel occlusion model were examined in the present study. Results : S. baicalensis was shown to significantly alleviate the deficits in learning and memory by increasing the fraction of time spent in the quadrant in which the platform was initially placed ($34.9\;{\pm}\;3.2%$, p < 0.05) compared to that of the ischemia group ($28.0\;{\pm}\;2.5%$). The cytoprotective effect of S. baicalensis on CA1 hippocampal neurons was evaluated by measuring the neuronal cell density. Neuronal cell density in S. baicalensis extracts-treated ischemia group ($138.0\;{\pm}\;13.6\;cells/mm^2$) was significantly increased compared to saline-treated ischemia group ($22.1 \;{\pm}\;9.3\;cells/mm^2$, p < 0.05). In the study of OX-42 immunohistochemistry, S. baicalensis could decrease the micrgial activation in hippocampus after brain ischemia. Conclusion : These results may provide experimental support for the use of S. baicalensis in treating post-stroke memory impairment.
Park, Jeong-Sook;Yoo, Dong-Ho;Lee, In-Jeong;Roh, Eun-Mi-Ri;Kim, Young-Soo;Han, Kun
Biomolecules & Therapeutics
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제18권1호
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pp.83-91
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2010
Bear bile has been used as a therapeutic for cerebral and coronary thrombosis, convulsion, hepatitis, jaundice, and abscess in traditional oriental medicine. In recent decades, the effects of bile acids on cancer, cholestasis, and liver injury have been investigated in many studies. In this study, we investigated the anti-inflammatory effects of whole bear bile (WBB) and its two major components, chenodeoxycholic acid (CDCA) and ursodeoxycholic acid (UDCA), on rectal inflammation in rats. Bile acids in WBB were quantitatively analyzed by HPLC. Rectal inflammation was induced in male Sprague-Dawley rats by insertion of croton oil-saturated cotton tips. WBB, UDCA or CDCA solution was orally administered to rats one hour after induction of rectal inflammation. Rats were sacrificed 4 or 24 hours after induction of rectal inflammation. The evaluation included measurement of weight and thickness of rectum and histopathologic examination of rectal tissue. Furthermore, we examined the inhibitory effect of WBB, UDCA or CDCA against NO production in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. The contents of UDCA and CDCA in WBB were $39.26{\mu}g/mg$ and $47.11{\mu}g/mg$, respectively. WBB treatment significantly reduced the weight and thickness of rectum compared with UDCA or CDCA treatment. The inhibition of NO production by WBB, UDCA and CDCA in LPS-stimulated RAW 264.7 cells was much higher than that by the control. And, WBB treatment suppressed the induction of NO synthase in rectum homogenates. These results suggest that the anti-inflammatory effect of WBB is related to the suppression of NO synthase induction and the inhibition of NO production by UDCA, CDCA and other bile acids of WBB.
원발성으로 종격동에서 발생한 융모막암종은 드문 질환으로 젊은 남자에서 주로 발견되었으며, 기침, 흉통, 여성형 유방 등의 증상을 보이는 것으로 알려졌다. 33세 여자로 약 3개월 전부터 가벼운 기침으로 시작하였으나 심한 호흡곤란과흉통증 등 증상이 급격히 악화되어 내원하였다. 방사선학적 검사상 후종격에서 직경 13cm크기의 종양이 발견되었고, 혈중 $\beta$-HCG가 20만 mIU 이상 증가하였으며, 적출된 종양은 $\beta$-HCG에 대한 면역조직화학적 검사상 양성반응을 보였다. 융모막암종 절제술을 받고 EMA-CO투여 받은후 약 7개월만에 뇌에 전이된 종양 때문에 뇌출혈을 일으켜 다시 뇌종양 적출술을 받았다. 환자는 그 후 약 7개월동안 두통외의 증상은 없었고 흉부단순촬영상 종격종양의 재발소견도 없었다.
In the present study we have analyzed the characteristics and distribution of the mu-opioid receptor(MOR) by raising anti-peptide antisera to the C-terminal peptide of MOR. The antisera against MOR was produced in New Zealand White rabbit against 15 residue corresponding to amino acids, 384-398 of the cloned rat MOR. The antigenic peptide was synthesized using an Applied Biosystems 432 solid-phase peptide synthesizer. The specificity and identification of the antisera were tested by analysis of transfected cells, epitope mapping and immunohistochemical method. COS-7 cells electroporated with MOR cDNA were used to evaluate the characteristics and subcellular distribution of MOR. MOR immunoreactivity was prodominent in the plasmalemma and subcellular compartments such as endoplasmic reticulum, Golgi apparatus and vesicle like structure. Furthermore, both tissue sections and transfected cell lines could be immunostained with these antisera and the immunoreactivity was abolished when anti-MOR sera were preincubated with the peptide against which they were raised. Based on epitope mapping analysis, all antisera appeared to have a similar epitope, which was determined to be within the last amino acid, 391-398. Moreover, immunohistochemistry showed that MOR immunoreactivity was observed in many brain areas including cerebral cortex, striatum, hippocampus, locus coeruleus and the superficial laminae of the dorsal horn. These stained spinal cord and brain areas showed the mirrored pattern observed in auto radiographic studies of mu-opioid binding as well as a pattern similar to that seen by is situ hybridization for MOR. Thus, several lines of evidence support the conclusion that the antisera produced in the present study most likely recognize mu-opioid receptor. These results suggest that MOR antisera may be utilized as useful tool to analyze the physiological and pharmacological studies for mu-opioid receptor in the future.
낭미충(Cysticercus cellutosae)에 자연감염된 돼지의 각 장기를 조직학적으로 검사하였던 바 다음과 같은 결과를 얻었다. 피막을 형성하는 낭미충은 골격근, 파하직, 심장 및 뇌조직에서 관찰되었다. 조직학적 소견으로는 골격근의 근막내와 심장 심외막하에서 낭충주위는 피막의 형성과 함께 급성 염증반응이 인정되었고 부위에 따라서는 교원섬유 및 선유아세포의 증식에 의한 두터운 피막이 관찰되었고 인접한 골격근 또는 심근과 견고하게 부착된 예도 있었다. 피막주위에서는 호산구, 임파구, 대식세포의 침윤이 부위에 따라 경미하거나 또는 심한 형태로 다양하였다. 대뇌의 연막하에 형성된 피막주위에는 혈관과 결합조직의 증식이 현저하였고, 혈관주위 원형세포의 침윤과 임파결절 모양의 구조가 인정되었다. GFAP 면역반응은 혈관주위를 따라 GFAP 양성의 섬유가 잘 발달되었고 피막낭 외측을 따라 전체를 둘러싸는 경항이었다. 결론적으로 유구낭미충 감염돼지의 조직소견은 감염 장기에 따라 염증반응이 다양하고 낭충의 피막은 감염 초기에 형성된 것으로 추정되었다.
Kim, Younghwa;Hong, Soontaek;Noh, Mi Ra;Kim, Soo Young;Huh, Pil Woo;Park, Sun-Hwa;Sun, Woong;Kim, Hyun
Molecules and Cells
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제22권1호
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pp.8-12
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2006
Neuron-derived orphan receptor (NOR-1) is a member of the thyroid/steroid receptor superfamily that was originally identified in forebrain neuronal cells undergoing apoptosis. In addition to apoptotic stimuli, activation of several signal transduction pathways including direct neuronal depolarization regulates the expression of NOR-1. In this study we tested whether the expression of NOR-1 is changed following transient ischemic injury in the adult rat brain. NOR-1 mRNA increased rapidly in the dentate gyrus of the hippocampal formation and piriform cortex 3 h after transient global ischemia and returned to basal level at 6 h. On the other hand, oxygen-glucose deprivation of cultured cerebral cortical neurons did not alter the expression of NOR-1. These results suggest that expression of NOR-1 is differentially regulated in different brain regions in response to globally applied brain ischemia, but that hypoxia is not sufficient to induce its expression.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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