Objective : Functional brain mapping study on acupuncture stimulation using the [14C]2-deoxyglucose([14C]2-DG) autoradiography provides quantitative data and visualized pathway in central nervous system(CNS). We aimed to investigate the neural pathway and spatial distribution of metabolic activity elicited in CNS on electroacupuncture stimulation using [14C]2-DG autoradiography. Methods : The study were divided into three groups by stimulation times. 45-mins stimulation group according to Sokoloffs method, 5-mins stimulation group according to Duncun's method, and 15-mins stimulation group. ;A venous catheter was equipped into right jugular vein. The rats (Sprague-Dawley rats, 230-260g) were kept fastened loosely on a holding platform without anesthesia. Electroacupuncture stimulation (5 ms, 2 Hz, 1~3 mA) were applied on the left Zusanli (ST36) acupoint and [14C]2-DG ($25{\mu}Ci/rat$) injection was performed through the catheter. After sacrifice, the brain and the spinal cord were made to sections for film image. The film images were digitalized as the isotope concentration based upon comparison of optical densities with that of the standards and normalized by the optical density of corpus callosum. Results : 1. 15-mins stimulation group was most effective among 3 experiments. 2. On 15-mins stimulation group, medial geniculate nucleus, intetpeduncular nucleus intermedius, ventral periolivary nucleus, caudal periolivary nucleus, medial superior olive, lateral paragigantocellular nucleus, including hypothalamic arcuate nucleus were increased by more than 25% (at least, p<0.05) by electroacupuncture stimulation. 3. Especially, the metabolism in hypothalamic arcuate nucleus was increased by 90% (p<0.05). 4. The fact that arcuate nucleus of hypothalamus might play a role of interconnection area between ascending and descending pathway of acupuncture stimulation was demonstrated visually. Conclusions : Advanced study on electroacupuncture stimulation elicited significant increase of metabolic activity in various nuclei of hypothalamus will provide the important experimental basis in research of the relationship between electroacupuncture stimulation and internal visceral functions.
Hypoxia is a pathophysiological condition that occurs during injury, ischemia, and stroke. Hypoxic stress induces the expression of genes associated with increased energy flux, including the glucose transporters Glutl and Glut3, several glycolytic enzymes, nitric oxide synthase, erythropoietin and vascular endothelial growth factor. Induction of these genes is mediated by a common basic helix-loop-helix PAS transcription complex, the hypoxia-inducible factor-l${\alpha}$ (HIF-1${\alpha}$)/ aryl hydrocarbon receptor nuclear translocator (ARNT). Insulin plays a central role in regulating metabolic pathways associated with energy storage and utilization. It triggers the conversion of glucose into glycogen and triglycerides and inhibits gluconeogenesis. Insulin also induced hypoxia-induced genes. However the underlying mechanism is unestablished. Here, we study the possibility that transcription factor HIF-1${\alpha}$ is involved in insulin-induced gene expression. We investigate the mechanism that regulates hypoxia-inducible gene expression In response to insulin We demonstrate that insulin increases the transcription of hypoxia- inducible gene. Insulin-induced transcription is not detected in Arnt defective cell lines. Under hypoxic condition, HIF- l${\alpha}$ stabilizes but does not under insulin treatment. Insulin-induced gene expression is inhibited by presence of PI-3 kinase inhibitor and Akt dominant negative mutant, whereas hypoxia-induced gene expression is not. ROS inhibitor differently affects insulin-induced gene expressions and hypoxia-induced gene expressions. Our results demonstrate that insulin also regulates hypoxia-inducible gene expression and this process is dependent on Arnt. However we suggest HIF-l${\alpha}$ is not involved insulin-induced gene expression and insulin- and hypoxia- induces same target genes via different signaling pathway.
Park, Jungwook;Lee, Areum;Lee, Hyun-Hee;Park, Inmyoung;Seo, Young-Su;Cha, Jaeho
Genes and Genomics
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제40권11호
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pp.1157-1167
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2018
Sulfolobus species can grow on a variety of organic compounds as carbon and energy sources. These species degrade glucose to pyruvate by the modified branched Entner-Doudoroff pathway. We attempted to determine the differentially expressed genes (DEGs) under sugar-limited and sugar-rich conditions. RNA sequencing (RNA-seq) was used to quantify the expression of the genes and identify those DEGs between the S. acidocaldarius cells grown under sugar-rich (YT with glucose) and sugar-limited (YT only) conditions. The functions and pathways of the DEGs were examined using gene ontology (GO) and Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) pathway enrichment analyses. Quantitative real-time PCR (qRT-PCR) was performed to validate the DEGs. Transcriptome analysis of the DSM 639 strain grown on sugar-limited and sugar-rich media revealed that 853 genes were differentially expressed, among which 481 were upregulated and 372 were downregulated under the glucose-supplemented condition. In particular, 70 genes showed significant changes in expression levels of ${\geq}$ twofold. GO and KEGG enrichment analyses revealed that the genes encoding components of central carbon metabolism, the respiratory chain, and protein and amino acid biosynthetic machinery were upregulated under the glucose condition. RNA-seq and qRT-PCR analyses indicated that the sulfur assimilation genes (Saci_2197-2204) including phosphoadenosine phosphosulfate reductase and sulfite reductase were significantly upregulated in the presence of glucose. The present study revealed metabolic networks in S. acidocaldarius that are induced in a glucose-dependent manner, improving our understanding of biomass production under sugar-rich conditions.
The time, yield, and related genes expression of PHB accumulation of Acidiphilium cryptum DX1-1 were investigated under four different initial C/N ratios, 1.2, 2.4, 7.5, and 24. The results of time and yield of poly-$\beta$-hydroxybutyrate (PHB) accumulation show that the initial C/N ratio of 2.4 was optimum for strain DX1-1 to accumulate PHB, but both higher and lower initial C/N ratios did not favor that process. Based on the genome of Acidiphilium cryptum JF-5, 13 PHB accumulation related genes in strain JF-5 were chosen and successfully cloned from strain DX1-1. The differential expressions of the 13 functional genes, in different C/N ratios as cited above, were then studied by real-time PCR. The results show that all the 13 genes were most upregulated when the initial C/N ratio was 2.4, and among which the gene Acry_3030 encoding poly-$\beta$-hydroxybutyrate polymerase and Aery_0626 encoding acetyl-CoA synthetase were much more upregulated than the other genes, which proved that they play the most important role for PHB accumulation, and acetate is the main initial substance for PHB accumulation for strain DX1-1. Potential regulatory motifs analysis showed that the genes related to PHB accumulation are regulated by different promoters and that the motif had weak similarity to the model promoters, suggesting that PHB metabolism in Acidiphilium cryptum may be mediated by a different mechanism.
Escherichia coli excretes acetate during aerobic growth on glycolytic carbon sources, which has been explained as an overflow metabolism when the carbon flux into the cell exceeds the capacity of central metabolic pathways. Nonacetogenic growth of E. coli on gluconeogenic carbon sources like succinate or in carbon-limited slow growth conditions is believed an evidence for the explanation. However, we found that a strain defected in the acs (acetyl Co-A synthetase) gene, the product of which is involved in scavenging acetate, accumulated acetate even in succinate medium and in carbon-limited low growth rate condition, where as its isogenic parental strain did not. The acs promoter was inducible in noncatabolite repression condition, whereas the expression of the ackA-pta operon encoding acetate kinase and phosphotransacetylase for acetate synthesis was constitutive. Results in this study suggest that E. coli excretes and scavenges acetate simultaneously in the carbon-limited low growth condition and in nonacetogenic carbon source, and the activity of the acetate consumption pathway directly affects the accumulation level of acetate in the culture broth.
Hiccup is characterized by a myoclonus in the diaphragm, resulting in a sudden inspiration associated with an audible closure of the glottis. The reflex arc in hiccups comprises three pars: an afferent, a central and an efferent part. The afferent portion of the neural pathway of hiccup formation is composed of the vagus nerve, the phrenic nerve, and the sympathetic chain arising from T6 to T12. The hiccup center is localised in the brain stem and the efferent limb comprises phrenic pathways. All stimuli affecting the above mentioned reflex arc may produce hiccups. The pathogenesis of persistent hiccups is not known. Hiccup can present a symptom of a subphrenic abscess or gastric distention, and metabolic alterations may also cause hiccups. Numerous treatment modalities have been tried but with questionable success. We describe a patient whose persistant hiccups was treated successfully by a cervical epidural block.
Rhizopus oryzae의 카드뮴 적응 및 해독기작과 이에 관련된 세포내 생리 생화학적 변화를 조사하였다. R. oryzae는 카드뮴을 첨가 배양하였을 때 카드뮴 영향하에서는 carbohydrate metabolic pathway에 관련된 효소 활성(MDH, GPI)이 촉진되고 과산화물 제거에 관여하는 효소가 새롭게 유도(CAT2)된 반면, lactate를 이용하는 효소(LDH, ADH)의 활성이 감소된 사실은 중금속 영향하에서 세포의 성장과 에너지 공급을 위해 에너지 수율이 낮은 lactate를 이용하는 경로보다는 에너지 수율이 높은 TCA cycle 경로에 작용하는 효소들과 독성과산화물 제거에 관여하는 효소의 더 많은 derepression이 필요하다는 것을 알 수 있었다.
Kim, Tae-Hyun;Namgoong, Suk;Kwak, Joon-Hyeok;Lee, Se-Yong;Lee, Heung-Shick
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제10권6호
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pp.789-796
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2000
In order to analyze the effects of tktA, $aroF^{FBR}$, and aroL expression in a tryptophan-producing Escherichia coli, a series of plasmids carrying the genes were constructed. Introduction of tktA, $aroF^{FBR}$, and aroL into the E. coli strain resulted in approximately 10-20 fold increase in the activities of transketolase, the feedback inhibition-resistant 3-deoxy-D-arabinoheptulsonate-7-phosphate synthase, and shikimate kinase. Expression of $aroF^{FBR}$ in the aroB mutant strain of E. coli resulted in the accumulation of 10 mM of 3-deoxy-D-arabinoheptulsonate-7-phosphate (DAHP) in the medium. Simultaneous expression of tktA and $aroF^{FBR}$ in the strain further increased the amount of excreted DAHP to 20 mM. In contrast, the mutant strain which has no gene introduced accumulated 0.5 mM of DAHP. However, the expression of tktA and $aroF^{FBR}$ in a tryptophan-producing E. coli strain did not lead to the increased production of tryptophan, but instead, a significant amount of shikimate, which is an intermediate in the tryptophan biosynthetic pathway, was excreted to the growth medium. Despite the fact that additional expression of shikimate kinase in the strain could possibly remove 90% of excreted shikimate to 0.1 mM, the amount of tryptophan produced was still unchanged. Removing shikimate using a cloned aroL gene caused the excretion of glutamate, which suggests disturbed central carbon metabolism. However, when cultivated in a complex medium, the strain expressing tktA, $aroF^{FBR}$, and aroL produced more tryptophan than the parental strain. These data indicate that additional rate-limiting steps are present in the tryptophan biosynthetic pathway, and the carbon flow to the terminal pathway is strictly regulated. Expressing tktA in E. coli cells appeared to impose a great metabolic burden to the cells as evidenced by retarded cell growth in the defined medium. Recombinant E. coli strains harboring plasmids which carry the tktA gene showed a tendency to segregate their plasmids almost completely within 24h.
Background: Folylpolyglutamate synthetase (FPGS), an important enzyme in the folate metabolic pathway, plays a central role in intracellular accumulation of folate and antifolate in several mammalian cell types. Loss of FPGS activity results in decreased cellular levels of antifolates and consequently to polyglutamatable antifolates in acute lymphoblastic leukemia (ALL). Materials and Methods: During May 1997 and December 2003, 134 children diagnosed with ALL were recruited from one hospital in Thailand. We performed a mutation analysis in the coding regions of the FPGS gene and the association between single nucleotide polymorphisms (SNPs) within FPGS in a case-control sample of childhood ALL patients. Mutation screening was conducted by polymerase chain reaction-single strand conformation polymorphism (PCR-SSCP) and subsequently with direct sequencing (n=72). Association analysis between common FPGS variants and ALL risk was done in 98 childhood ALL cases and 95 healthy volunteers recruited as controls. Results: Seven SNPs in the FPGS coding region were identified by mutation analysis, 3 of which (IVS13+55C>T, g.1297T>G, and g.1508C>T) were recognized as novel SNPs. Association analysis revealed 3 of 6 SNPs to confer significant increase in ALL risk these being rs7039798 (p=0.014, OR=2.14), rs1544105 (p=0.010, OR= 2.24), and rs10106 (p=0.026, OR=1.99). Conclusions: These findings suggested that common genetic polymorphisms in the FPGS coding region including rs7039789, rs1544105, and rs10106 are significantly associated with increased ALL risk in Thai children.
Objective: The bursa of Fabricius (BF) is a central humoral immune organ belonging specifically to avians. Recent studies had suggested that miRNAs were active regulators involved in the immune processes. This study was to investigate the possible differences of the BF at miRNA level between two genetically disparate duck breeds. Methods: Using Illumina next-generation sequencing, the miRNAs libraries of ducks were established. Results: The results showed that there were 66 differentially expressed miRNAs and 28 novel miRNAs in bursa. A set of abundant miRNAs (i.e., let-7, miR-146a-5p, miR-21-5p, miR-17~92) which are involved in immunity and disease were detected and the predicted target genes of the novel miRNAs were associated with duck high anti-adversity ability. By gene ontology analysis and enriching KEGG pathway, the targets of differential expressed miRNAs were mainly involved in immunity and disease, supporting that there were differences in the BF immune functions between the two duck breeds. In addition, the metabolic pathway had the maximum enriched target genes and some enriched pathways that were related to cell cycle, protein synthesis, cell proliferation and apoptosis. It indicted that the difference of metabolism may be one of the reasons leading the immune difference between the BF of two duck breeds. Conclusion: This data lists the main differences in the BF at miRNAs level between two genetically disparate duck breeds and lays a foundation to carry out molecular assisted breeding of poultry in the future.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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