To evaluate bile salt-tolerance of lactic acid bacteria (LAB, Lactobacillus acidophilus ATCC 4356, Lactobacillus casei IFO 3533, Streptococcus thermnophilus KCTC 2185, Lactobacillus lactis ATCC 4797, and Lactobacillus bulgaricus ATCC 11842), We investigated the survivals, acid production and $\beta $-galactosidase activity of LAB under anaerobic broth system. Cellular permeability of LAB and their cellular retention of $\beta $-galactosidase were also examined in the same system. Although the growth of LAB was slightly suppressed by 0.3% bile salt, they showed normal growth curve. Streptococcus thermophilus KCTC 2185 was significantly more resistant to bile salt than the others. The $\beta $-galactosidase activity from Streptococcus thermophilus KCTC 2185 and Lactobacillus bulgaricus ATCC 11842 and their cellular retention of $\beta $-galactosidase decreased by 0.3% bile salt. The cellular permeability of LAB in the presence of bile salt increased significantly.
A previous report recently demonstrated that ultrasound-induced hyperthermia (USHT:0.4 watts (W)/$cm^2$ at $41^{\circ}C$) could increase cellular uptake of P-glycoprotein (P-gp) substrates in P-gp expressing cancer cell lines. Since P-gp plays a major role in limiting drug permeability in the multi-drug resistant (MDR) cells, studies were conducted to elucidate the mechanism of USHT on cellular accumulation of P-gp and non-P-gp substrate in MDR cells. To accomplish this aim, we studied the effects of USHT on the accumulation of P-gp substrate, R123 and non-P-gp substrate, antipyrine in MDR cells. We demonstrated that USHT increased permeability of hydrophobic molecules (R123 and $[^{14}C]$-antipyrine). The enhanced permeability is reversible and size-dependent as USHT produces a much larger effect on cellular accumulation of $[^{14}C]$-antipyrine (MW 188) than that of R123 (MW 380.8). These results suggest that USHT could affect MDR cells more sensitive than BBMECs. Also, the present results point to the potential use of USHT to increase cellular uptake of P-gp recognized substrates, mainly anti-cancer agents into cancer cells.
Park, Wonjin;Baek, Yi-Yong;Kim, Joohwan;Jo, Dong Hyun;Choi, Seunghwan;Kim, Jin Hyoung;Kim, Taesam;Kim, Suji;Park, Minsik;Kim, Ji Yoon;Won, Moo-Ho;Ha, Kwon-Soo;Kim, Jeong Hun;Kwon, Young-Guen;Kim, Young-Myeong
Biomolecules & Therapeutics
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제27권5호
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pp.474-483
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2019
Vascular endothelial growth factor (VEGF) plays a pivotal role in pathologic ocular neovascularization and vascular leakage via activation of VEGF receptor 2 (VEGFR2). This study was undertaken to evaluate the therapeutic mechanisms and effects of the tetrapeptide Arg-Leu-Tyr-Glu (RLYE), a VEGFR2 inhibitor, in the development of vascular permeability and choroidal neovascularization (CNV). In cultured human retinal microvascular endothelial cells (HRMECs), treatment with RLYE blocked VEGF-A-induced phosphorylation of VEGFR2, Akt, ERK, and endothelial nitric oxide synthase (eNOS), leading to suppression of VEGF-A-mediated hyper-production of NO. Treatment with RLYE also inhibited VEGF-A-stimulated angiogenic processes (migration, proliferation, and tube formation) and the hyperpermeability of HRMECs, in addition to attenuating VEGF-A-induced angiogenesis and vascular permeability in mice. The anti-vascular permeability activity of RLYE was correlated with enhanced stability and positioning of the junction proteins VE-cadherin, ${\beta}$-catenin, claudin-5, and ZO-1, critical components of the cortical actin ring structure and retinal endothelial barrier, at the boundary between HRMECs stimulated with VEGF-A. Furthermore, intravitreally injected RLYE bound to retinal microvascular endothelium and inhibited laser-induced CNV in mice. These findings suggest that RLYE has potential as a therapeutic drug for the treatment of CNV by preventing VEGFR2-mediated vascular leakage and angiogenesis.
We investigated the survival, $\beta$-galactosidase activity and cellular permeability of lactic acid bacteria such as Lactobacillus acidophilus ATCC 4356, Lactobacillus casei subsp. casei IFO 3533, Streptococcus thermophilus KCTC 2185, Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis ATCC 4797, and Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus ATCC 11842 in anaerobic condition of pH 1.5-3.5 range. Numbers of all tested viable cells did not decrease at pH 3.5, but decreased rapidly at pH 1.5 and pH 2.5 during 2 hour incubation at modified EG medium. Immediately after 2 hour incubation, the decrease in population at pH 1.5 and pH 2.5 was about 6-8 and 5-7 log cycles/ml, respectively. Lactobacillus acidophilus ATCC 4356 showed the higest survival of all tested bacteria. The $\beta$-galactosidase activity from Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus ATCC 11842 and Streptococcus thermophilus KCTC 2185 decreased rapidly at pH 1.5 and 2.5, but there was a little decrease at pH 3.5. The cellular permeability that was measured by the leakage of intracellular materials increased with decrease of pH. These results suggest that the ingested lactic acid bacteria may be destroyed in contact with low pH of gastric acid.
The achievement of high gas permeability is a key factor in the development of porous SiC ceramics for applications of hot gas filter, vacuum chuck, and air spindle. However, few reports on the gas permeability of porous SiC ceramics can be found in the literature. In this paper, porous SiC ceramics were fabricated at temperatures ranging from $1600^{\circ}C$ to $1800^{\circ}C$ using the mixing powders of SiC, silicon, carbon and boron as starting materials. In some samples, expanded hollow microspheres as a pore former were used to make a cellular pore structure. It was possible to produce Si bonded SiC ceramics with porosities ranging from 42% to 55%. The maximum bending strength was 58MPa for the carbon content of 0.2 wt% and sintering temperature of $1700^{\circ}C$. The increase of air permeability was accelerated by addition of hollow microsphere as a pore former.
The purpose of this study is to evaluate the inhibitory effects of Resina Pini against Streptococcus mutans (S. mutans) that is one of the major causes of dental caries and oral diseases. Topically applied Resina Pini (RP) would be incorporated in saliva and thus the factor associated with water solubility should be considered. In this paper, therefore, effects of various treatment for RP and activities of water extracts from unprocessed and processed RP were compared. The crude RP (RP1) and the recrystallized RP (RP2) in ethanol solution showed strong antimicrobial activities (d.>15mm) against S. mutans. All RP samples exhibited considerable inhibitory effect against glucosyltransferase produced by S. mutans $(IC_{50}=91.2\;to\;276.2\;{\mu}g/ml)$. The very considerable increase in cellular permeability of S. mutans was observed with RP1, RP2 and their water extracts. These results suggest that RP1 and RP2 may be a potential source for pharmaceutical products used for prevention and/or treatment of dental caries and periodontal disease.
The ohmic heating of foods for sterilization provides a shorter come-up time compared to conventional thermal processes. The electric fields as well as the heat generated by ohmic heating facilitate germicidal effects. In the present study, the effect of ohmic heating on the structure and permeability of the cell membrane of yeast cells, Saccharomyces cerevisae, isolated from Takju (a traditional Korean rice-beer), was investigated. The ohmic heating was found to translocate intracellular protein materials out of the cell wall, and the amount of exuded protein increased significantly as the electric field increased from 10 to 20 V/cm. As higher frequencies were applied, more materials were exuded. Compared to conventional heating, more amounts of proteins and nucleic acids were exuded when these cells were treated with ohmic heating. The molecular weights of the major exuded proteins ranged from 14 kDa to 18 kDa, as analyzed by Tricine-SDS PAGE. A TEM study also confirmed the leakage of cellular materials, thus indicating irreversible damage to the cell wall by ohmic heating. It was, therefore, concluded that the electric fields generated by ohmic heating induced electroporation, causing irreversible damage to the yeast cell wall and promoting the translocation of intracellular materials.
The design theory for nanoporous filtration membranes needs to be established. The present study shows that the performance and technical advancement of nanoporous filtration membranes are determined by the fundamental parameter I (in the unit Watt1/2) which is formulated as a function of the shear strength of the liquid-pore wall interface, the radius of the filtration pore, the membrane thickness, and the bulk dynamic viscosity of the flowing liquid. This parameter determines the critical power loss on a single filtration pore for initiating the wall slippage, which is important for the flux of the membrane. It also relates the membrane permeability to the power cost by the filtration pore. It is shown that for biological cellular membranes its values are on the scale 1.0E-8Watt1/2, for mono-layer graphene membranes its values are on the scale 1.0E-9Watt1/2, and for nanoporous membranes made of silica, silicon nitride or silicon carbonized its values are on the scale 1.0E-5Watt1/2. The scale of the value of this parameter directly measures the level of the performance of a nanoporous filtration membrane. The carbon nanotube membrane has the similar performance with biological cellular membranes, as it also has the value of I on the scale 1.0E-8Watt1/2.
Arginyl-fructose (AF) and arginyl-fructosyl-glucose (AFG) were chemically synthesized and purified. Their in vitro and cellular antioxidant activity was investigated using oxygen radical absorbance capacity (ORAC) and cellular antioxidant activity assay, respectively. The peroxyl radical scavenging activity of AF was much higher than that of AFG, which was in good agreement with their reduction capacity to donate electrons or hydrogen atoms. On the other hand, the hydroxyl radical scavenging activity of AF was weaker than that of AFG, which was consistent with their metal chelating activity, suggesting that AFG-$Cu^{2+}$ complex may be less redox-active than AF-$Cu^{2+}$ complex due to 1 glucose molecule attached. The cellular antioxidant activity of AF and AFG appeared to depend on both their permeability into cell membrane and the scavenging activity on peroxyl or hydroxyl radicals. These results indicate that AF and AFG, Maillard reaction products, may have a high potential as a material for the development of nutraceutical food with antioxidant activity.
본 연구에서는 그라비올라의 주성분인 nicotiflorin을 분리하고 그 아글리콘 성분인 kaempferol을 얻어 세포 보호 효과 및 그 보호 메커니즘을 규명하였다. L-Ascorbic acid 및 (+)-${\alpha}$-tocopherol을 대조군으로 하여, $^1O_2$로 유도된 세포 손상에 대해 nicotiflorin 및 kaempferol의 보호 효과를 측정한 결과 nicotiflorin < (+)-${\alpha}$-tocopherol < kaempferol 순으로 보호 효과가 증가하였다. L-Ascorbic acid는 세포 보호 효과를 보이지 않았다. 이들의 세포 보호 효과 메커니즘을 밝히기 위해 singlet oxygen 소광 속도 상수, 자유라디칼 소거 활성, ROS 소거 활성 및 적혈구 세포 침투율을 측정하였다. 실험 결과, kaempferol과 그 배당체인 nicotiflorin의 세포 보호 효과에 있어서 큰 차이는 세포막에의 침투가 가장 큰 요인으로 확인되었다. 대조군 L-ascorbic acid가 항산화능은 크지만 실험 조건에서 세포막에 침투가 잘 안되어 세포 보호 효과가 나타나지 않은 것으로 확인되었다. Kaempferol과 (+)-${\alpha}$-tocopherol의 비교를 통해 세포 침투뿐만 아니라 라디칼 소거활성 및 ROS 소거 활성도 세포 보호 효과에 기여하는 것으로 나타났다. 결론적으로, 광증감 반응으로 유도된 세포막 파괴에 대한 보호작용은 항산화제들의 세포 침투, 자유라디칼 및 ROS 소거 활성이 큰 영향을 미치는 것으로 확인되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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