Osteoclasts are bone-resorbing cells that are derived from hematopoietic precursor cells and require macrophage-colony stimulating factor and receptor activator of nuclear factor-${\kappa}B$ ligand (RANKL) for their survival, proliferation, differentiation, and activation. The binding of RANKL to its receptor RANK triggers osteoclast precursors to differentiate into osteoclasts. This process depends on RANKL-RANK signaling, which is temporally regulated by various adaptor proteins and kinases. Here we summarize the current understanding of the mechanisms that regulate RANK signaling during osteoclastogenesis. In the early stage, RANK signaling is mediated by recruiting adaptor molecules such as tumor necrosis factor receptorassociated factor 6 (TRAF6), which leads to the activation of mitogen-activated protein kinases (MAPKs), and the transcription factors nuclear factor-${\kappa}B$ (NF-${\kappa}B$) and activator protein-1 (AP-1). Activated NF-${\kappa}B$ induces the nuclear factor of activated T-cells cytoplasmic 1 (NFATc1), which is the key osteoclastogenesis regulator. In the intermediate stage of signaling, the co-stimulatory signal induces $Ca^{2+}$ oscillation via activated phospholipase $C{\gamma}2$ ($PLC{\gamma}2$) together with c-Fos/AP-1, wherein $Ca^{2+}$ signaling facilitates the robust production of NFATc1. In the late stage of osteoclastogenesis, NFATc1 translocates into the nucleus where it induces numerous osteoclast-specific target genes that are responsible for cell fusion and function.
Objective : This study was designed to assess the protective effects of Chengwhabosimtang on the animal model of depression, chronic mild stress(CMS). Method : Male Sprague-Dawley rats were used for this experiment. The subjects were divided into 3 groups ( 1. CMS-drug: Chengwhabosimtang administered during CMS treatment, 2. CMS-vehicle: water administered, 3. normal ). After 4 weeks of CMS treatment, they were executed Forced swimming test(FST) and Elevated plus maze. Tyrosine hydroxylase(TH) in ventral tegmental area(VTA) and c-Fos in paraventricular nucleus(PVN) were measured. Result : 1. In FST, CMS-drug group showed significantly decreased immobility behavior. 2. CMS-drug group showed no significantly lower TH level in VTA than CMS-vehicle group. 3. CMS-drug group showed significantly less c-Fos expressed cell bodies in PVN than CMS-vehicle group. 4. In Elevated plus maze, CMS-drug group showed no significantly anxiety. Conclusion : These results suggest that Chengwhabosimtang may have protective antidepressant effects in CMS model rats. And these effects could be explained by the elevated stress-copying behaviors which are related with PVN of hypothalamus and dopaminergic neurons in VTA.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.19
no.3
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pp.765-771
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2005
This study was performed to investigate the anti cancer effect of Batryticatus Bombycis extract(BBE) in B16F10 cells. The cell viability after BBE treatment was quantified by MTT assay. The results showed that BBE inhibited the proliferation of B16F10 cells and caused a 80% inhibition of B16F10 cells at concentration of $500\;{\mu}g/ml$. B16F10 cells exposed to BBE displayed the DNA fragmentation ladder and nucleus chromatin condensation characteristic for apoptosis. The enzyme activity of caspase-3 and actived caspase-3 protein was markedly increased in B16F10 cells treated with the BBE. The expression of Bcl-2, anti-apoptotic protein, was decreased by treatment of the BBE in a dose-dependent manner. And the expression of pro-apoptotic Bax protein was increased. In conclusion, we can suggest that BBE induce the apoptotic death of B16F10 cells via activation of caspase-3, cleavage of PARP protein and Bcl-2 degradation.
To induce bone formation at ectopic site by tissue engineering and gene therapy, we transplanted collagen sponges containing rhBMP-7 transduced HEK 293 cells in the hypodermis of nude mice. Bone formation was investigated by histological and electron microscopic method at 3, 6, and 9 weeks after transplantation. At 9 weeks after transplantation, eosinophilic bony tissue was observed in the implanted collagen sponge and was confirmed as bone tissue by Von Kossa stain. In the transmission electron microscopic observation, the cells in newly formed bone tissue had eccentrically located nucleus and well developed rough endoplasmic reticulum (rER). Therefore, the cells were evaluated as osteoblasts. Those results suggest that it is possible to form a bone tissue in the ectopic site by transplantation of rhBMP-7 transduced HEK 293 cells. This will be contributed to push more advanced gene therapy for bone formation. However, the HEK 293 cell is unable to apply to the clinical gene therapy. Therefore it is worth to find more compatible cells for clinical application. In addition, collagen sponge is considered as an excellent scaffold and/or carrier for gene therapy and a good biomaterial for tissue engineering.
To investigate cellular regulation of phosphate metabolism between catabolically repressed and derepressed states in Saccharomyces uvarum, the activities of polyphosphatases, the analysis of polyphosphate and cytochemical observation of volutin granules were examined according to the culture phase and under various phosphate concentrations. As the results, tripolyphosphatase activity was increased more than six-fold during catabolic repression as compared with those of catabolic derepression and the polyphosphatase activity increased at the time of maximal accumulation of acid insoluble polyphosphate 'B'. Of the low molecular weight polyphosphates, tripolyphosphate was mainly detected by thin layer chromatography. When the synthesis of volutin granules in derepressed cells was observed cytochemically, acid insoluble polyphosphate localizing at the cell wall was primarily synthesized and then transferred into the cytoplasm, nucleus and/or vacuole.
This study was undertaken to investigate the effect of lead on organisms. Mice received 15mg or 30mg of lead acetate per kg body weight every day for 1, 2 or 3 weeks, and the livers and kidneys were removed 24h after repeated injections. The livers and kidneys were used as sources for measurement of enzyme activities and for observation of alterations in ultrastructure. It was observed that body weights of mice treated with lead acetate were decreased when compared with those before treatment. This decrease in body weight was proportional to dose. The enzyme activities of succinate and malate dehydrogenases of experimental group that was treated with lead acetate for 1 week were nearly unchanged when compared with controls, but the enzyme activities of experimental group that was treated with lead acetate for 2 or 3 weeks were lower than those of controls. Changes in the enzyme activities were dependent on, but were not proportional to dose. Histologic examination of livers and kidneys after lead treatment showed that lead compound was accumulated and damaged in nucleus and mitochondria mainly. It was also observed that intranuclear inclusion bodies were formed only in epithelial cell of kidney proximal tubule after lead treatment. The overall changes in the ultrastructure were much greater in the livers than in the kidneys. From the above results, it nay be possible to conclude that the lead results in the decrease in body weight, reduction in the succinate dehydrogenate and malate dehydrogenase activities, and damages in the ultrastructure of kidney and liver in mouse. The presence of intranuclear inclusion bodies only in the kidney implies that these bodies protect the kidney from lead toxicity to some extent.
The filtration barrier of kidney consists of endothelial cell, glomerular capillary, glomerular basement membrane, mesangial matrix, and podocyte. In aged rats, the morphological changes were shown in various parts, including the glomerulus. These changes were thickening of basement membrane and mesangial matrix, crescent formation of glomerular capillary, deformity of foot processes, glomerular sclerosis and obsolescence. But these glomerular morphologies are partial images or few serial images analysis. In this study, we examined the morphological alteration of glomerulus in the young and aged rats by light microscopy, transmission electron microscopy and three dimensional reconstruction. We were found in aged rat glomerulus, expansion of urinary space and mesangial matrix, thickening and degrading of glomerular basement membrane, decreasing in podocyte foot processes, fragmentation of podocytic nucleus membrane. These observations indicate that may provide useful data for investigating the pathogenesis of age-related dysfunction of kidney.
The plasmacytoid variant is an extremely rare form of urothelial carcinoma in which the malignant cells resemble those of plasmacytoma. We report the cytologic features of 3 cases of this disorder. All 3 patients were male and presented with painless macroscopic hematuria. The voided urine cytology revealed a few scattered clusters of tumor cells in a bloody background. Each tumor cell had an abundant amount of cytoplasm that was clear or densely stained and characterized by eccentrically located nuclei. A histological examination of tissue obtained from a radical cystectomy confirmed the cytologic diagnosis in each 3 case, revealing a diffusely infiltrating tumor composed of round, noncohesive tumor cells demonstrating a high nuclear grade. These cells had infiltrated the tunica propria in 2 cases, but were limited to the submucosa in 1 case. The tumor cells were plasmacytoid in appearance, each demonstrating an eccentric nucleus and dense cytoplasm, as seen in the cytologic findings. All of the tumors were immunoreactive for pancytokeratin, CK7, CK20; negative for epithelial membrane antigen (EMA), leukocyte common antigen (LCA), kappa, lambda, and CD79a. Thus, it is important to consider the plasmacytoid variant of urothelial carcinoma in addition to plasmacytoma or lymphoma as a diagnosis when encountering plasmacytoid tumor cells in a voided urine sample.
Kim, Jung-Woong;Lee, So-Youn;Jeong, Mi-Hee;Jang, Sang-Min;Song, Ki-Hyun;Kim, Chul-Hong;Kim, You-Jin;Choi, Kyung-Hee
Animal cells and systems
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v.12
no.2
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pp.69-75
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2008
The tumor suppressor and transcription factor p53 is a key modulator of cellular stress responses, and can trigger apoptosis in many cell types including neurons. In this study, we have shown that Microtubule-associated protein 1B(MAP1B) light chain interacts with tumor suppressor p53. MAP1B is one of the major cytoskeletal proteins in the developing nervous system and essential in forming axons during elongation. We also demonstrate that both p53 and MAP1B-LC1 interact in the nucleus in HEK 293 cells. Indeed, we show that the MAP1B-LC1 negatively regulates p53-dependent transcriptional activity of a reporter containing the p21 promoter. Consequently, MAP1B light chain binds with p53 and their interaction leads to the inhibition of doxorubicin-induced apoptosis in HEK 293 cells. Furthermore, these examinations might be taken into consideration when knock-down of MAP1B-LC1 is used as a cancer therapeutic strategy to enhance p53's apoptotic activity in chemotherapy.
출생 후 0일, 7일, 14일, 21일 그리고 성체의 흰쥐 전뇌 기저부의 내측중격핵과 수직 및 수평대각 Broca대에서 choline acetyltransferase(ChAT)에 면역반응을 보이는 신경조직과 세포의 분화를 면역조직화학적 및 전자현미경적 방법을 이용하여 조사하였다. 출생 후 초기와 성체에서 신경세포의 세포질과 수상돌기에서 고루 ChAT 면역반응이 확인되었다. 뇌 기저부의 ChAT 면역반응 신경세포들은 발생에 따른 뇌 크기의 증대와 뇌 조직의 분화에 따라 점차 수적 증가를 보였다. 이 ChAT 면역반응 신경세포들은 세포의 모양과 세포제의 장 · 단축의 비에 따라 6가지 형 즉 1) 월형 2) 난형, 3) 세장형, 4) 방추형. 5) 삼각형, 6) 다각형으로 분류되었다 전뇌 기저 핵에서 원형과 난형 신경세포들의 출현율은 출생 후 0일에서 높았으나 성체로 되면서 감소된 반면, 세장형. 방추형. 삼각형 그리고 다각형 신경세포들의 출현율은 출생 후 0일에서는 낮았으나 성체로 되면서 증가하였다. 모든 핵들에서 ChAT 면역반응 신경세포체의 부피는 출생 후 0일에 996-1,252 Um3로 제일 작았으며, 내측중격핵과 수직대각 Broca대 그리고 수평대각 Broca대에서는 출생 후 21일에 각각 5,061, 5.701, 5,820 um3로 최대치를 보였다. 그후 성체로 되면서 모든 핵에서1,897-2,704 roms로 다시 감소하였다. 전자현미경적 관찰에서 출생 후 21일된 흰쥐 수평대각 Broca대에서 ChAT 면역반응은 핵의 핵질 일부와 핵막 그리고 미토콘드리아와 조면소포체에서 관찰되었다. 이 결과들로 미루어 출생 후 초기 발생단계에서 흰쥐 전뇌 기저부의 내측중격핵과 수직 및 수평대각 Broca대에서 ChAT 면역반응 신경세포들은 축삭과 수상돌기의 형성에 따라 세포의 형과 그 출현율 및 세포제의 크기에서 현저한 변화가 이루어지는 것으로 생각된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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