This study was performed to determine the developmental potentials of nuclear transfer (NT) embryos using life-span extended cells transfected with a foreign gene as donor cells. A life-span extended bovine embryonic fibroblast cell line was transfected with an expression vector in which the human type II collagen (BOMAR) and ear fibroblasts were used as a donor cell. Cytogenetic analysis was performed to analyze the chromosomal abnormality of donor cells. The fusion rate of 1.8 kV/cm for $15{\mu}sec$ given twice was significantly higher than that of other groups (p<0.05) and the embryos lysed were significantly higher after 1.8 kV/cm for $20{\mu}sec$ given once compared to other groups (p<0.01). The blastocyst development in the ear cell group was statistically significant compared to both BOMAR groups (p<0.01). Both BOMAR groups cultured more than 40 passages (>40 passages) had a lower number of chromosomes; however, fresh granulosa cell (GC) and BOMAR groups cultured less than 20 passages had normal chromosome numbers. Both >40 passages BOMAR groups had numerous obscure debris in metaphase spreads. The transfected foreign gene was expressed in all BOMAR groups, but not in the GC group. Based on these results, the lower developmental potential of NT embryos using life-span extended donor cells transfected with a foreign gene might be a cause of chromosomal abnormality in donor cells.
본 연구는 염색체 가공기술(chromosome manipulation technique)을 이용하여 다양한 개수의 염색체를 가진 균주들의 세포 성장속도 및 life span을 비교하여 염색체 수의 증가가 세포 생리에 미치는 영향을 조사하였다. 16개의 염색체를 가지는 숙주세포 FY833 균주와 18개의 염색체를 가지는 YKY18 및 YKY18R 균주, 24개의 염색체를 가지는 YKY24 균주와 30개의 염색체를 가지는 YKY30 균주를 사용하여 specific growth rate를 비교해 본 결과, YKY18 균주와 YKY24 균주는 세포성장의 변화가 거의 없었으나, YKY18R 균주와 YKY30 균주에서는 숙주세포에 비해 각각 25%와 40% 이상 성장이 감소됨을 확인 할 수 있었다. 또한 염색체 수와 노화의 관계를 알아보기 위해 replicative life span을 조사해 본 결과, YKY24균주와 YKY30 균주에서 숙주세포에 비해 약 14%와 45% 정도로 life span이 감소했음을 알 수 있었다. 노화인자로 알려져 있는 telomere의 길이도 인공염색체의 수가 증가될수록 점점 다양해지고 길이가 짧아짐을 확인 할 수 있었다. 따라서 염색체 수의 증가도 새로운 노화원인이 될 수 있다는 가능성을 제시하였고, 본 연구 결과가 다양한 인공염색체를 가진 산업용 균주의 안정적인 개량을 위한 기초 자료로 활용될 수 있을 것이라 기대한다.
Ulmus macrocarpa 자양강장 및 생리활성 물질로 이용되어 왔다. U, macrocarpa 열수 추출물(UMWE)이 일반적인 세포배양 조건에서 비장세포 수명연장에 미치는 효과에 대한 연구를 진행하였다. 100 μg/ml UMWE를 비장세포에 처리하여 실험을 진행하였다. 살아있는 세포확인은 Hoechst 33342 염색법과 세포생존관련 인자의 변화는 Western blot으로 확인하였다. 사이토카인 변화는 ELISA로 검증하였다. UMWE는 비장세포에 대하여 향상된 세포 생존력을 보였다. UMWE를 48시간과 96시간째 처리된 비장세포의 PI3K 및 ERK1/2의 인산화를 증가시켰다. 더욱이, 48시간과 96시간때에 Bcl-2의 발현량도 증가하였다. 반면, UMWE는 48시간과 96시간에 caspase-3의 활성이 줄어들었다. ICAD 단백질은 48시간에 증가하였다. UMWE는 조혈 및 세포생존력에 영향을 미치는 IL-2 cytokine량은 줄었지만 반면, IL-4 hematopoietin cytokine의 양은 증가하였다. UMWE는 48시간과 96시간에 증가된 IFN-γ level을 나타내었고 IL-12의 경우는 증가패턴을 보이는 효과를 발휘하였다. 이러한 결과는 UMWE가 다양한 신호전달 및 사이토카인 조절을 통해 비장세포 수명연장을 할 수 있다는 것으로 사료된다.
The present study was designed to determine the antitumor and antioxidant properties of methanol extract from the root of Galega purpurea (Papilionaceae) (MEGP) against Ehrlich Ascites Carcinoma (EAC) bearing Swiss albino mice. Acute and short-term toxicity studies were performed initially in order to ascertain the safety of MEGP. The effect of MEGP on the growth of transplantable murine tumor, life span of EAC bearing hosts and simultaneous alterations in the hematological profile and liver biochemical parameters (lipid peroxidation, antioxidant enzymes) were estimated. The MEGP showed decrease in tumor volume, packed cell volume and viable cell count and increases the nonviable cell count and mean survival time thereby increasing life span of EAC tumor bearing mice. Hematological profile reverted to more or less normal levels in extract treated mice. Treatment with MEGP decreased the levels of lipid peroxidation and increased the levels of glutathione, superoxide dismutase and catalase. The results suggested that the methanol extract of Galega purpurea root exhibited antitumor effect by modulating lipid peroxidation and augmenting antioxidant defense system in EAC bearing mice.
Viscum album coloratum (Korean mistletoe; KM) is a semi-parasitic plant growing on various trees. This plant hasbeen shown to possess a variety of biological functions such as immunomodulation, apoptosis-induction and antitumor activity. However, there is no information about how the extract of KM affects life span of the host. In this study, in order to examine the effect of KM on the longevity of the host, we investigated whether a Korean mistletoe extract (KME) was able to extend the life length in an experimental model using the spring silkworm moth of Bombyx mori (Lepidoptera bombycidae). We established a model test for survival in which all of the male and female moths died within 18 days after the beginning of the experiment. Mean survival time of female moths was longer than that of male moths. Both male and female moths fed with KME containing diet (200 or 400 ${\mu}g$/head/day) showed significantly higher mean survival times than those of the control moths. Studying the effect of KME on prolongation of mean survival time showed that male moths were more susceptible than female moths. The moths fed with KME-containing diet showed a slight decrease in body weight. Interestingly, however, no difference in food intake was observed between moths fed with KME-containing diet and those with control diet. In analysis for mRNA increase in the SIRT2 gene, a member of the Sir2 gene family playing important roles in regulation of cell death and prolongation of life span, moths fed with KME-containing diet showed a significant increase in SIRT2 gene expression. These results suggest that KME has a potential to extend the life span in Bombyx mori, and its effect is partly associated with increase in SIRT2 gene expression.
During T cell activation, mitochondrial content increases to meet the high energy demand of rapid cell proliferation. With this increase, the level of reactive oxygen species (ROS) also increases and causes the rapid apoptotic death of activated cells, thereby facilitating T cell homeostasis. Nicotinamide (NAM) has previously been shown to enhance mitochondria quality and extend the replicative life span of human fibroblasts. In this study, we examined the effect of NAM on $CD8^+$ T cell activation. NAM treatment attenuated the increase of mitochondrial content and ROS in T cells activated by CD3/CD28 antibodies. This was accompanied by an accelerated and higher-level clonal expansion resulting from attenuated apoptotic death but not increased division of the activated cells. Attenuation of ROS-triggered pro-apoptotic events and upregulation of Bcl-2 expression appeared to be involved. Although cells activated in the presence of NAM exhibited compromised cytokine gene expression, our results suggest a means to augment the size of T cell expansion during activation without consuming their limited replicative potential.
Objectives : The purpose of this study was to investigate anti-cancer effects of various ginseng herbal acupuncture in mice and expression of cytokine mRNA. Methods: Anti-cancer effects of various ginseng herbal acupuncture were tested by measuring the increase of life span of mice suffering from peritoneal cancer induced by Sarcoma-180, and expression of mRNA manifestation using RT-PCR. The results are as follows: Results: 1. Increase of life span of mice suffering from peritoneal cancer induced by Sarcoma-180 was measured for anti-cancer effects. As a result, 115% increase was shown in the cultivated wild ginseng group, 11.1% increase in the red ginseng group, and no increase was detected in either white ginseng and fresh ginseng groups. 2. Measuring the expression of cytokine mRNA manifestation, expression of $interferon-{\gamma}$ was slightly increased in the cultivated wild ginseng group compared to the control group, but manifestation of interleukin-10 was slightly decreased. 3. For the red ginseng, white ginseng, and fresh ginseng experiment groups II, IL-2, IL-4, $INF-{\gamma}$, and IL -10 all showed increase suggesting possible error occurring during the test process. Conclusion: From the results obtained in this study, we can reason that the ginseng we use may not match the ginseng cited in the texts of the past. Anti-cancer effects of cultivated wild ginseng can be more potent than those of white and fresh ginseng.
With the advent of the telecommunication era, a mobile phone becomes a necessary communication device in modern society. For silent tactile signal, vibration motors have become one of the generic components in most mobile phones. Conventional vibration motors employ three-phase windings with mechanical brushes for commutation. However, mechanical commutation in these prior arts greatly deteriorates its life span, reliability, and productivity due to structural intricacy. This paper introduces a novel design of solenoid-type vibrators using electromagnetic and mechanical analysis. The proposed vibrators have a simpler structure and longer life span by eliminating wear-prone commutation parts in vibration motors.
The effect of ginseng saponin on chick embryonic dorsal root ganglia organ culture and brain, spinal cord, muscle dissociation cultures was studied. The fiber outgrowth in explanted chick embryonic dorsal root ganglia was markedly induced by water and alcohol extracts of ginseng, total ginseng saponin, protopanaxadiol and protopanaxatriol glycosides as well as ginsenosides R/sub b1/, R/sub d/, R/sub 0/+R/sub a/+R/sub b1/, and R/sub b2/+R/sub c/+R/sub e/ mixtures. The life span of the cultured chick embryonic dorsal root ganglia and potentiation of nerve cell density were also observed with all of these ginseng saponins. The effect of ginseng saponin on chick embryonic dorsal root ganglia organ culture was more marked in the absence of the chick embryonic extract which was known to contain nerve growth factor-like material in the culture media. However, the ginseng saponin did not influence the cultured central nervous system such as brain and spinal cord cells and cultured skeletal muscle cells with respect to the morphological changes, maturation and life span of these cells.
Background: The chemical characteristics of the exo-secretion from Phellinus linteus (referred to as exo-secretion) including the compositions of amino acids and monosaccharides were investigated. In addition, cytotoxicity of the exo-secretion on 5 tumor cell lines derived from human cancers and its antitumor activity against ascitic sarcoma-180 cells were examined. Methods: The antitumor activity of exo-secretion from Phellinus linteus was determined by measuring parameters including tumor weight, life span of mice, chemotatic activity of leukocytes, counts of immune cells, and activity of cytokines. Results: The exo-secretion from Phellinus linteus showed no direct cytotoxicity to the five tumor cell lines tested, but it had a strong antitumor activity against sarcoma-180 cells in ICR mice as measured by tumor weight and life span of mice. The exo-secretion stimulated the chemotaxis of leukocytes and production of immune cells and cytokines. Conclusion: These results suggest that the exo-secretion from Phellinus linteus do not act as a direct cytotoxic substance to cancer cells but as an immunomodulator.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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