Wang, H.L.;Wang, H.;Zhu, Z.M.;Yang, S.L.;Fen, S.T.;Li, Kui
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제19권7호
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pp.953-957
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2006
The eukaryotic elongation factor 1 A (EEF1A) participates in protein synthesis by forming the eEF1A GTP tRNA complex to deliver aminoacyl-tRNA to the A site of ribosomes. This study described cDNA sequences and partial genomic structure of porcine EEF1A1. The porcine EEF1A1 gene encoded a protein with 462 amino acids, which shared complete homology with human, chimpanzee and dog. The temporal expression pattern showed the diversity of EEF1A1 level in mRNA was relatively minor in prenatal embryo skeletal muscle, however, the expression decreased during aging after birth in skeletal muscle of the Chinese Tongcheng pig. The spatial expression patterns indicated that the gene expressed in skeletal muscle, heart, lung, liver, kidney, fat and spleen. In addition, we assigned the gene to porcine chromosome 1 using a radiation hybrid panel.
A new process to fabricate a composite LSCF-Ag cathode material for SOFCs by electron beam (e-beam) irradiation process has been suggested for operation under intermediate temperature range of $600-700^{\circ}C$. A composite LSCF-Ag cathode with uniformly coated Ag nanoparticles on the surface of the LSCF material was prepared by a facile e-beam irradiation method at room temperature. The morphology of the composite LSCF-Ag material was analyzed using a TEM, FE-SEM, and EDS. The prepared composite LSCF-Ag material can play a significant role in increasing the electro-catalytic activities and reducing the operating temperature of SOFCs. The performance of a tubular single cell prepared using the composite LSCF-Ag cathode, YSZ electrolyte and a Ni/YSZ anode was evaluated at reduced operating temperature of $600-700^{\circ}C$. The micro-structure and chemical composition of the single cell were investigated using a FE-SEM and EDS.
Chemical durability issue in polymer electrolyte membranes has been a challenge for the commercialization of polymer electrolyte membrane fuel cells (PEMFCs). In this study, we proposed a manufacturing method of Nafion composite membrane containing a stable polyimide antioxidant to improve the chemical durability of the membrane. The thermal casting of the Nafion solution with poly (amic acid) induced polyimide reaction. We evaluated proton conductivity, oxidative stability with ex-situ Fenton's test, and fluoride ion emission to analyze the effect of polyimide antioxidants. We confirmed that incorporating the polyimide antioxidant improves the chemical durability of the Nafion membrane while maintaining inherent proton conductivity.
${\beta}Pix$ is a guanine nucleotide exchange factor for the Rho family small GTPases, Rac1 and Cdc42. It is known to regulate focal adhesion dynamics and cell migration. However, the in vivo role of ${\beta}Pix$ is currently not well understood. Here, we report the production and characterization of ${\beta}Pix$-KO mice. Loss of ${\beta}Pix$ results in embryonic lethality accompanied by abnormal developmental features, such as incomplete neural tube closure, impaired axial rotation, and failure of allantois-chorion fusion. We also generated ${\beta}Pix$-KO mouse embryonic fibroblasts (MEFs) to examine ${\beta}Pix$ function in mouse fibroblasts. ${\beta}Pix$-KO MEFs exhibit decreased Rac1 activity, and defects in cell spreading and platelet-derived growth factor (PDGF)-induced ruffle formation and chemotaxis. The average size of focal adhesions is increased in ${\beta}Pix$-KO MEFs. Interestingly, ${\beta}Pix$-KO MEFs showed increased motility in random migration and rapid wound healing with elevated levels of MLC2 phosphorylation. Taken together, our data demonstrate that ${\beta}Pix$ plays essential roles in early embryonic development, cell spreading, and cell migration in fibroblasts.
최근 세포 표면의 다양한 항원들이 발견되고T세포 아형에 대한 정량적 측정이 가능하게 됨에 따라 세포성 면역기전의 규명과 이해에 획기적인 진전을 보이고 있다. T세포 아형의 phenotype은 실험 동물의 모델(model)이나 종(species)에 따라서 다양하며 차이가 나는 것으로 알려져 있다. 우리 나라의 경우 아직도 80만명 이상의 국민이 간 흡충에 감염되어 있을 것으로 추정되는 문제의 기생충이며 감염상태가 만성적일 때에는 간 경화나 간암으로까지 진행되는 흡충으로서 이에 대한 대책이 요구되고 있다. 그동안 간 흡충의 면역에 대한 연구는 체액성 면역에 대한 연구는 많은 규명과 진전이 있어 왔으나 세포성 면역에 대한 기전이나 특성에 대한 연구는 미미한 상태이다. 저자들은 이와 같은 사정을 감안하여 마우스를 실험 모델로 할 때에 요구되는 참고 자료와 기본 정보를 구하고자 하였다. 즉, 간흡충에 대한 세포 면역학적인 일부의 특성을 알아 보았으며,특히 비장 림프구 아형에 대한 phenotype의 특성을 알아 본 결과 다음과 같은 성적을 얻었다. 간흡충의 조항원을 면역증강제와 함께 복강 투여한 후 기간 별로 비장 림프구의 아형 특성을 flow cytometry로 측정한 결과, CD2, CD5 그리고 CD8는 투여 초기에는 감소하다가 투여 7주 후에 다시 증가하는 현상을 보였으며, CD4의 경우 투여 초기에는 약간 증가하다가 투여 7주 후에 다시 증가하는 성적을 보였다.
To culture germline stem cells in vitro, establishment of the cell lines that can be used as the feeder cells is a prerequisite. In this study, we tried to establish gonad-derived cell lines in Siberian sturgeon (Acipenser baerii). Five 1-year-old A. baerii were used as a donor of gonad tissues, and gonad-dissociated cells were cultured in vitro. Subsequently, determination of growth conditions, long-term culture, characterization, and cryopreservation of the cell lines were also conducted. Five gonad-derived cell lines were stably established and cultured continuously over at least the 73th passage and 402 culture days under the media containing 20 % fetal bovine serum at $28^{\circ}C$. All cell lines consisted of two main cell types based on morphology even if the ratio of the two cell types was different depending on cell lines. Despite long-term culture, all cell lines maintained diploid DNA contents and expression of several genes that are known to express in the A. baerii gonad. After freezing and thawing of the cell lines, post-thaw cell viabilities between 57.6 and 92.9 % depending on cell lines were indentified, suggesting that stable cryopreservation is possible. The results and the cell lines established in this study will contribute to the development of an in vitro system for A. baerii germline stem cell culture.
Vitrification has been suggested to be an effective method for the cryopreservation of human ES cells. However, the efficiency of vitrification with different vehicles remains a matter of ongoing controversy. The objective of this study was to assess the efficiency of cryopreservation in human ES cells by vitrification using different vehicles. A human ES cell line and a variety of vehicles, including micro-droplet (MD), open-pulled straw (OPS) and electron microscopic grid (EM-grid), were employed in an attempt to assess vitrification efficiency. In order to evaluate the survivability and the undifferentiated state of the post-vitrified human ES cells, we conducted alkaline phosphatase staining and characterization via both RT-PCR and immunofluorescence assays. The survival rates of the post-vitrified human ES cells using MD, OPS and EM-grid were determined to be 61.5%, 66.6% and 53.8%, respectively. There also exist significant differences between slow-freezing and vitrification (p<0.01). However, no significant differences were detected between the vehicle types. Finally, the pluripotency of human ES cells after thawing was verified by teratoma formation. Cryopreservation using vitrification is more effective than slow-freezing, and the efficiency of vehicles proved effective with regard to the preservation of human ES cells.
흰쥐 성체 전뇌 기저부의 수직 및 수평 대각 Broca대에서 각 형별 ChAT 면역반응 신경세포의 조직학적 및 미세구조적 특징을 면역조직화학 및 전자현미경을 이용한 면역세포화학적 방법으로 조사하였다. ChAT 면역반응 신경세포에서 광학현미경적 면역반응은 세포체의 세포질과 신경돌기에서 확인되었다. 아울러 미세구조적 관찰로 ChAT 면역반응은 핵외막, 조면소포체의 막, 자유리보좀 그리고 polysomes에서 나타났다. 수직 및 수평 대각 Broca대에서 ChAT 면역반응 신경세포는 세포의 모양과 세포체의 장 단축의 비에 따라 원형, 난형, 세장형, 방추형, 삼각형 그리고 다각형으로 분류되었다. 이 각각의 세포형들을 전자현미경을 이용하여 미세구조적으로 관찰한 결과, 세포체의 크기, 세포질에 대한 핵의 상대적 크기, 세포소기관의 종류 및 분포양상, 신경연접의 수 및 종류 등의 기준에 따라 면역반응 신경세포들은 아유형 I, II로 분류되었다. 그러나, 방추형 및 삼각형 면역반응 신경세포에서는 아유형 I만이 관찰되었다. 아유형 I 면역반응 신경세포는 핵막함입을 보이는 작은 핵과 풍부한 세포질을 포함하였다. 이들 면역반응 세포질은 평행한 긴 수조들로 규칙적인 층판을 이룬 잘 발달된 rER를 함유하였다. 1, 2개의 층판체와 nematosome들이 세포질에서 관찰되었다. 축삭-세포체 신경연접은 주로 대칭형이었으며, 축삭-수상돌기 신경연접은 대다수 비대칭형이었다. 아유형 II 면역반응 신경세포는 비교적 깊은 핵막함입을 보이는 큰 핵과 빈약한 세포질을 포함하였다. rER는 발달이 미약하였다. 축삭-세포체 신경연접은 대칭형과 비대칭형이 같은 비율로 나타났고, 축삭-수상 돌기 신경 연접은 주로 비대칭형이었다. 이상과 같은 미세구조적 관찰에서 ChAT 면역반응 신경세포가 방추형과 삼각형을 제외한 모든 세포형에서 아유형 I, II로 분류되는 것은 투사영역의 원근에 의한 세포 대사활성의 차이에 기인한 것으로 생각된다.
Journal of mucopolysaccharidosis and rare diseases
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제4권1호
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pp.26-36
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2018
Mucopolysaccharidosis IIIA is a heritable neurodegenerative disorder resulting from the dysfunction of the lysosomal hydrolase sulphamidase. This leads to the primary accumulation of the complex carbohydrate heparan sulphate in a wide range of tissues and CNS degeneration. Characterization of animal model is the beginning point of the therapeutic clinical trial. Mouse model has a limitation in that it is not a human and does not have all of the disease phenotypes. Therefore, delineate of the phenotypic characteristics of MPS IIIA mouse model prerequisite for the enzyme replace treatment for the diseases. We designed 6-month duration of phenotypic characterization of MPS IIIA mouse biochemically, behaviorally and histologically. We compared height and weight of MPS IIIA mouse with wild type from 4 weeks to 6 months in both male and female. At 6 months, we measured GAG storage in urine kidney, heart, liver, lung and spleen. The brain GAG storage is presented with Alcian blue staining, immunohistochemistry, and electron-microscopy. The neurologic phenotype is evaluated by brain MRI and behavioral study including open field test, fear conditioning, T-maze test and Y-maze test. Especially behavioral tests were done serially at 4month and 6month. This study will show the result of the MPS IIIA mouse model phenotypic characterization. The MPS IIIA mouse provides an excellent model for evaluating pathogenic mechanisms of disease and for testing treatment strategies, including enzyme or cell replacement and gene therapy.
Park, Kwang-Wook;Choi, Sung-Sik;Lee, Dong-Ho;Lee, Hwang;Choi, Seung-Kyu;Park, Chang-Sik;Lee, Sang-Ho
Reproductive and Developmental Biology
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제35권1호
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pp.23-31
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2011
Two piglets and one juvenile pig were used to investigate closely what types of cells express green fluorescent protein (GFP) and if any, whether the GFP-tagged cells could be used for stem cell transplantation research as a middle-sized animal model in bone marrow cells of recloned GFP pigs. Bone marrow cells were recovered from the tibia, and further analyzed with various cell lineage markers to determine which cell lineage is concurrently expressing visible GFP in each individual animal. In the three animals, visible GFP were observed only in proportions of the plated cells immediately after collection, showing 41, 2 and 91% of bone marrow cells in clones #1, 2 and 3, respectively. The intensity of the visible GFP expression was variable even in an individual clone depending on cell sizes and types. The overall intensities of GFP expression were also different among the individual clones from very weak, weak to strong. Upon culture for 14 days in vitro (14DIV), some cell types showed intensive GFP expression throughout the cells; in particular, in cytoskeletons and the nucleus, on the other hand. Others are shown to be diffused GFP expression patterns only in the cytoplasm. Finally, characterization of stem cell lineage markers was carried out only in the clone #3 who showed intensive GFP expression. SSEA-1, SSEA-3, CD34, nestin and GFAP were expressed in proportions of the GFP expressing cells, but not all of them, suggesting that GFP expression occur in various cell lineages. These results indicate that targeted insertion of GFP gene should be pursued as in mouse approach to be useful for stem cell research. Furthermore, cell- or tissue-specific promoter should also be used if GFP pig is going to be meaningful for a model for stem cell transplantation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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