바나나 과실을 시중에서 구입하여 미숙과실과 황숙과실로 구별하고 이것들을 과육부분과 과피부분으로 나누어서 동결건조 및 열풍건조시켜 실험 시료로서 사용하였다. 탄닌 함량을 분석한 결과 황숙과실 보다도 미숙과실에서 높았으며, 과육보다는 과피에서 열풍건조 보다는 동결건조시킨 시료에서 높은 경향을 나타내었다. 탄닌의 분획은 Sephadex LH-20칼럼을 사용하여 분획하였다. 바나나 과실에 함유하고 있는 탄닌은 prodelphinidin, procyanidin을 구성 단위로 하는 proanthocyanidin류의 축합성 탄닌으로 이러한 탄닌은 소화효소인 trypsin(EC 3. 1. 1. 3), ${\alpha}-amylase$(EC 3. 4. 21. 4), lipase(EC 3. 2. 1. 1)에 대하여 in vitro에 있어서 저해작용을 가지고 있는 것이 확인되었으며 또한 탄닌은 중합도가 높을수록 저해율이 높다는 것이 확인되었다.
The factors affecting chemical composition of green tea (Camellia sinensis L.) during extraction process were temperatures and times. The optimum extraction conditions were measured in relation to the changes of chemical compositions from water extracts of green tea (Camellia sinensis L.) under different extraction temperatures (50, 70, 9$0^{\circ}C$) and extraction times (1, 3, 5 minute). The change of color intensity during browning reaction, flavonoid components, contents of total phenols and hydrogen donating activity (reducing activity for $\alpha$, $\alpha$'-diphenyl-$\beta$ -picryhydrazyl) of water extracts form green tea increased as extraction temperatures increased from 50 to 9$0^{\circ}C$ and extraction times prolonged from 1 to 5 min. The contents of important free sugars such as sucrose and glucose slightly increased as the extraction time was prolonged, while little difference in the content of fructose with the prolonged extraction time. Catechins contents extracted from the commercial steamed green tea were increased at higher temperature and longer extraction time. Epigallocatechin (EGC) extracted from 9$0^{\circ}C$ (extraction time 5 min). presented 99.9 mg/g in highest composition of catechin followed by epigallocatechin gallate (EGCg), epicatechin (EC), epicatechin gallate (ECg). The content of vitamin C extracted from green tea was increased about 2 times as the extraction temperature increased from 50 to 9$0^{\circ}C$ and as the extraction time increased from 1 to 5 min. with exception at 9$0^{\circ}C$(extraction time:5 min) which showed less vitamin C content than 7$0^{\circ}C$(extraction time : 3 min) probably due to possible destruction of vitamin C by high temperature.
Cancer preventive activities of green tea and its main constituent, (-)-epigallocatechin gallate (EGCG) have been extensively studied by scientists all over the world. Since 1983, we have studied the cancer chemopreventive effects of EGCG as well as green tea extract and underlying molecular mechanisms. The first part of this review summarizes groundbreaking topics with EGCG and green tea extract: 1) Delayed cancer onset as revealed by a 10-year prospective cohort study, 2) Prevention of colorectal adenoma recurrence by a double-blind randomized clinical phase II trial, 3) Inhibition of metastasis of B16 melanoma cells to the lungs of mice, 4) Increase in the average value of Young's moduli, i.e., cell stiffness, for human lung cancer cell lines and inhibition of cell motility and 5) Synergistic enhancement of anticancer activity against human cancer cell lines with the combination of EGCG and anticancer compounds. In the second part, we became interested in cancer stem cells (CSCs). 1) Cancer stem cells in mouse skin carcinogenesis by way of introduction, after which we discuss two subjects from our review on human CSCs reported by other investigators gathered from a search of PubMed, 2) Expression of stemness markers of human CSCs compared with their parental cells, and 3) EGCG decreases or increases the expression of mRNA and protein in human CSCs. On this point, EGCG inhibited self-renewal and expression of pluripotency-maintaining transcription factors in human CSCs. Human CSCs are thus a target for cancer prevention and treatment with EGCG and green tea catechins.
The purpose of this study was to investigate the effects of green tea catechin on lipid metabolism in streptozotocin(STZ)-induced diabetic rats. Male Sprague-Dawley rats weighing 150$\pm$10gm were randomly assigned to one normal and three STZ-induced diabetic groups. Diabetic animals were fed catechin free diet(DM-0C group), 0.5% catechin diet(DM-0.5C group) and 1% catechin diet(DM-1C group). Diabetes was experimentally induced by intravenous injection of 55mg/kg body wt of STZ in citrate buffer(pH 4.3) after feeding of three experimental diets for 4 weeks. Animals were sacrificed at the 6th day of diabetic states. Levels of blood glucose were three fold higher in all three STZ-induced diabetic groups than that of the normal group. The levels of plasma insulin were markedly lower in three STZ-induced diabetic groups than that of the normal group. The levels of plasma cortisol were increased in DM-0C group compared with that of the normal group. Triglyceride, total-cholesterol and LDL-cholesterol levels in serum were increased in DM-0C groups compared with the normal group but were not significantly different between catechin diet groups and normal group. Serum HDL-cholesterol levels were reduced in DM-0C and DM-0.5C groups by 38% and 25%, respectively and had similar tendency in the DM-1C group compared with that of control group. Atherogenic index have shown same pattern as the result of total cholesterol. Activities of 3-hydroxy-3-methylglutaryl Co enzyme A(HMG-CoA) reductase were higher in DM-0C groups than those of the normal group but were not significantly different between catechin diet groups and the normal group. It is concluded that dietary catechins can modulate lipid levels of serum and liver HMG-CoA reductase activity in diabetic rats.
Flavanone-3-hydroxylase (F3H) is one of the key enzymes for the biosynthesis of flavonals, anthocyanins, catechins and proanthocyanins. F3H catalyzes the $3{\beta}$-hydroxylation of (2S)-flavonones to form (2R, 3R)-dihydroflavonols. In this report, we isolated a full-length cDNA of RocF3H from black raspberry (Rubus occidentalis L.) using a reverse transcriptase-PCR and rapid amplification of the cDNA ends (RACE)-PCR. The full-length cDNA of RocF3H contains a 1,098 bp open reading frame (ORF) encoding a 365 amino acid protein with a calculated molecular weight of about 41.1 kDa and isoelectric point (pI) of 5.45. The genomic DNA analysis revealed that the RocF3H gene had three exons and two introns. Comparison of the deduced amino acid sequence of the RocF3H with other F3Hs revealed that the protein is highly homologous with various plant species. The conserved amino acids ligating the ferrous iron and the residues participating in the 2-oxoglutarate binding (R-X-S) were found in RocF3H at the similar positions to other F3Hs. Southern blot analysis indicated that RocF3H exist a multi-gene family. The isolation of RocF3H gene will be helpful to further study the role of F3H gene in the biosynthesis of flavonoids in R. occidnetalis.
Majewska, Malgorzata P.;Miltko, Renata;Belzecki, Grzegorz;Kedzierska, Aneta;Kowalik, Barbara
Animal Bioscience
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제34권7호
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pp.1146-1156
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2021
Objective: The aim of the study was to compare the effect of two plant additives, rich in polyphenolic compounds, supplemented to sheep diets on microorganisms and carbohydrate fermentation in rumen. Methods: In the experiment, 6 ewes of the Polish Mountain breed were fitted with ruminal cannulas. Sheep were divided into three feeding groups. The study was performed in a cross-over design of two animals in each group, with three experimental periods (n = 6 per each group). The animals were fed a control diet (CON) or additionally received 3 g of dry and milled lingonberry leaves (VVI) or oak bark (QUE). Additionally, plant material was analyzed for tannins concentration. Results: Regardless of sampling time, QUE diet increased the number of total protozoa, as well as Entodinium spp., Diplodinium spp. and Isotrichidae family, while decreased bacterial mass. In turn, a reduced number of Diplodinium spp. and increased Ophryoscolex spp. population were noted in VVI fed sheep. During whole sampling time (0, 2, 4, and 8 h), the number of protozoa in ruminal fluid of QUE sheep was gradually reduced as opposed to animals receiving CON and VVI diet, where rapid shifts in the protozoa number were observed. Moreover, supplementing sheep with QUE diet increased molar proportions of butyrate and isoacids in ruminal fluid. Unfortunately, none of the tested additives affected gas production. Conclusion: The addition of VVI or QUE in a small dose to sheep diets differently affected rumen microorganisms and fermentation parameters, probably because of various contribution of catechins in tested plant materials. However, it is stated that QUE diet seems to create more favorable conditions for growth and development of ciliates. Nonetheless, the results of the present study showed that VVI and QUE additives could serve as potential natural modulators of microorganism populations and, consequently, carbohydrate digestion in ruminants.
Recently, the morphological and molecular features of five stain fungi infecting rubberwood (Hevea brasiliensis), namely Paecilomyces maximus, Paecilomyces formosus, Penicillium crustosum, Paecilomyces lecythidis and Aspergillus chevalieri, have been studied. Prior to this study, the authors revealed that catechin from gambir (Uncaria gambir) could inhibit the growth of the white-rot fungus Schizophyllum commune, and it was important to determine the bioactivity of the aforementioned agent against A. chevalieri. The efficacy of the biocidal agent was examined using a laboratory wooden block test. Rubberwood blocks, 8 mm in thickness, 20 mm in width, and 30 mm in length, were impregnated with catechin solution at concentrations of 6%, 9%, 12%, and 15% (w/v) using the vacuum-pressure method, and their bioactivity was monitored over three weeks through visual and scanning electron microscope assessment of fungal growth as well as the discoloration intensity of the wood samples. The results showed that catechin treatment increased the resistance of wood samples to A. chevalieri. Overall, the higher the catechin concentration, the lower the fungal growth. The lowest fungal growth was observed in the wood samples treated with 12% and 15% catechin (score of 0), demonstrating no discoloration. In contrast, the fungal growth score of the untreated wood samples reached 4, indicating severe discoloration. Catechins appear to be adequate biofungicides against stain fungi in rubberwood.
잔류성이 강하고 높은 지용성질을 가지는 식품오염물질인 benzo[a]pyrene(BaP)은 녹차 섭취에 의해서 소장에서 흡수가 억제되고 총담관으로의 배출이 증가되는 것으로 최근에 보고하였다. 이번 연구는 흰쥐를 이용해서 $^{14}C$-BaP를 복강주사한 후, 사람과 비교해서 1잔에 해당하는 녹차추출물을 4주간 매일 지속적으로 공급하였을 때, $^{14}C$-BaP의 조직분배 및 잔류에 미치는 영향을 조사하였다. 27.4 kBq $^{14}C$-BaP를 복강주사한 후 표준식이와 증류수만 공급된 동물군을 대조군, 표준식이와 녹차추출물(4.7 mg catechins/day)을 공급받은 동물군을 녹차군으로 하여 4주간 사육하였다. 그리고 4주째에 심장, 간장, 뇌, 비장, 신장, 후복막지방, 고환, 부고환지방 조직을 적출하여 무게를 측정하고 각 조직에 잔류하는 $^{14}C$-BaP의 방사선 활성도를 측정하였다. 대조군과 녹차군 모두 연구 시작부터 종료 시까지 지속적으로 체중이 증가하였으나 동물군 간에 유의적인 차이는 없었다. 장기의 무게 또한 각 조직 모두 동물군 간에 유의적인 차이가 없었다. 조직 g당 $^{14}C$-BaP의 잔류량은 심장에서 가장 높았고 다음으로 뇌, 부고환지방, 비장, 신장, 간장, 후복막지방, 고환 순으로 높았으며, 조직 전체의 $^{14}C$-BaP의 잔류량은 부고환지방에서 가장 높았고 다음으로 간장, 후복막지방, 심장, 뇌, 신장, 고환, 비장 순으로 나타났다. 녹차 섭취에 의해서 조직 g당 $^{14}C$-BaP의 방사선 활성도와 조직 전체 당 $^{14}C$-BaP 방사선 활성도 모두 심장, 간장, 뇌, 비장, 부고환지방에서 급격하게 감소된 것으로 나타났다. 이상의 실험결과들을 종합해 볼 때, 4주 동안 하루 1잔에 해당하는 녹차추출물 섭취가 BaP의 조직 분배를 유의적으로 감소시켜 조직 잔류에 영향을 미치는 것을 이 실험을 통해서 확인할 수 있었다.
본 실험에서는 DPPH radical 소거능을 통하여 차잎의 수확시기 및 발효정도에 따른 항산화 활성에 있어서 변화를 비교하고 일상의 녹차 음용으로 섭취되는 항산화 물질을 EGCG 등의 함량으로 추정하고자 하였다. 우전과 같이 수확시기가 빠른 것이 다소 높은 항산화 활성을 보였고, 특히 볕가림 재배한 옥로가 일반 녹차에 비 해 적어도 비슷한 활성을 나타냈다. 중국의 반발효차에 있어서 발효정도에 따라 항산화 활성이 감소한데 비해 완전히 발효된 흥차의 경우 항산화 활성이 녹차의 수준으로 유지하였고, 이러한 홍차의 항산화 물질에 대해서는 보다 체계적 인 연구가 필요하리라 생각된다. 분량 2그램의 녹차를3회 우려 마시는 경우 이로부터 섭취할 수 있는 항산화 물질은 EGCG 기준으로 109∼147 mg정도이고 비타민 C로는 142∼168 mg에 해당한다. 시판되고 있는 녹차티백은 제품에 따라 다소 차이를 보였으나 한 티백으로부터 52∼86 mg정도의 EGCG에 해당하는 항산화 활성을 보였는데 비타민 C로는 63∼96 mg에 해당한다. 증열과정이 긴 냉녹차나 차잎의 분량이 적은 현미 녹차가 낮은 항산화 활성을 보였고, 감잎차, 뽕잎차, 솔잎차에서도 적으나마 항산화 활성이 보인 반면 식 물의 뿌리 인 둥굴레 차는 항산화 활성 이 거의 없다. 전통적 인 방법으로 차를 3회 우려 마시는 경우 차잎 속에 포함된 항산화 물질의 절반정도가 용출되는 셈인데 가능한 분말차로 사용되는 것이 경제적일 수 있다. 세번째 우린 찻물에도 상당량의 항산화 물질이 함유된 반떤, 녹차 티백의 경우 3분이면 충분한 항산화 물질이 용출되는 것을 알 수 있다. 식품 속의 플라보노이드가 섭취되어 실제로 어느 정도 흡수되는가에 대해서 아직 이견이 있고 플라보노이드의 임상적인 효과에 대해 확실하지 않으나 역학적인 근거로는 긍정적이다. 천연의 항산화 물질을 자연스럽게 섭취하는 방법으로서 차의 음용을 생활화하는 것은 퇴행성 또는 노화관련 질환의 예방차원에서 바람직하리라 본다.
건국대학교본 연구는 쑥의 추출물을 이용해 생체내에서 에탄올의 분해효능, 간기능 및 Cd 독성 저하작용에 미치는 효과를 알아보기 위하여 실시하였다. 본 실험에서 에탄올 분해효능은 Rat 1kg 당 25% 에탄을 5g을 경구투여한 후 쑥추출물의 카테킨 농도를 측정하여 이를 기준으로 일일 사료섭취량의 2% 원료수준으로 각각 미정맥주사를 하였다. 에탄올만 경구투여한 대조군과 에탄올을 경구투여한 후 쑥추출물을 미정맥주사한 실험군은 시간별(0, 1, 2, 3시간)로 미정맥에서 혈액을 채취해 3000rpm에서 10분간 원심분리하여 혈장을 분리시킨 후 GC(Gas Chromatography)로 혈중 에탄올 농도를 측정하였다. 또한 같은 방법으로 시간만 달리해 (0시간, 5시간) 혈장을 취해 GOT, GPT의 활성치를 측정하여 간손상정도를 측정하였다. 간기능에 미치는 효과는 간실질세포를 기본배지에 배양한 대조군과 쑥추출물을 배지의 1% 및 2% 원료수준으로 기본배지에 첨가하여 간실질세포를 배양한 실험군으로 나누어 36시간 배양한 후 현미경으로 형태를 관찰하고 생존 세포수와 GOT, GPT의 활성치를 함께 측정하였다. Cd 독성 저하작용은 4주령의 Sprague-Dawley 수컷 흰쥐를 구입하여 대조군(CON,0.85% saline 10ml/kg B.W.)과 Cd단독 투여군(CD, 0.4mg $CdCl_2/kg$ B.W.), Cd과 쑥추출물을 복강내 투여한 군(IP, 쑥 추출물은 일일사료섭취량의 1% 수준) 그리고 쑥추출물을 구강내 투여한 군(PO, 쑥 추출물은 일일사료섭취량의 1%수준)으로 분류하여 4주간 사육하였다. 사육 후 각종 장기 및 혈액을 채취하여 장기에서의 GSH 농도, GSH-Px 및 GR의 활성과 혈장 GOT, GPT 활성을 측정하였고 더불어 각 조직에서 Cd축적량을 조사하였다. 실험결과를 요약하면 다음과 같다. (1) 쑥추출물의 카테킨의 함량을 Iwasa와 Torri의 방법을 변형하여 측정한 결과 네 가지의 추출물중에서 카테킨의 함량은 쑥의 열수추출물이 $8{\sim}10mg/100g$으로 가장 많았으며 쑥의 에탄올 추출물은 $3{\sim}4mg/100g$인 것으로 나타났다. (2) 쑥 추출물을 HPLC를 이용해 주요 카테킨의 성분을 비교한 결과 쑥의 열수추출물 및 에탄올추출물은 (-)-Epigallocatechin (EGC)의 함량이 가장 높았다. (3) 시간에 따른 혈중 에탄올 농도를 GC로 측정한 결과 각각 에탄올을 투여한지 1시간 후의 에탄올 농도에서는 CON-E의 경우가 가장 높은 것으로 나타났고 MDW-E, MOH-E군은 CON-E에 비해 유의하게(p<0.05) 감소하는 것을 알 수 있었다. (4) 간실질세포 배양 36시간 후 배지를 걷어내고 밑면에 모인 세포를 모아 현미경으로 수를 측정하여 평균을 낸 결과는 2% MDW-L가 가장 많았으며 2% MOH-L을 제외하고는 CON-L의 세포수가 가장 적었다. 또한 배양 후 취한 세포내의 GOT, GPT의 활성치는 실험군간의 유의한 차이는 없었다. (6) 간 조직중의 GSH 함량수준은 쑥추출물 투여군들(IP, PO)이 CD군에 비해 유의적으로 증가(p<0.05)하여 대조군과 같은 정상수준으로 되었다. (7) 간 신장에서의 GSH-Px 활성은 저농도의 Cd에 의해서는 영향을 받지 않은 것으로 나타났다. (8) 혈장 GOT활성은 IP군이 대조군에 비해 증가하였으나 CD군에 비해 유의적으로 감소(p<0.05)하였다. 이상의 결과에서 쑥추출물이 체내에서 에탄올 분해를 촉진시키고 간기능을 개선시킴은 물론 GSH농도의 정상회복과 GR의 증가 및 혈장에서의 GOT활성의 감소 등으로 보아 Cd의 간독성도 감소시키는 작용이 있는 것으로 사료되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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