The construction of the T-shaped post-column flow cell has been changed to enhance the practicability as a UV-visible absorbance detector for capillary electrophoresis. In this new design, a rectangular cube-shaped inner structure is employed, which completely fits the outer rectangular tubing. This arrangement has greatly facilitated the fabrication of the T-cells. In addition, the volume for the auxiliary flow has been dramatically reduced down to 300 ${\mu}L$, and its volume flow rate is optimized at 4.2 ${\mu}L$/min. The short optical path length in the sheath flows (500 ${\mu}m$ on each side) minimizes background absorption, and thus enhances its performance in low-UV wavelengths. We have optimized the auxiliary flow rate at 50 ${\mu}m$/s, so that migration times are insensitive to the flow rate. This optimization has improved repeatabilities in migration times and peak heights. A double-beam detection scheme using a pair of photodiodes is employed to increase the signal-to-noise ratio.
A photodiode array multichannel detector system for capillary electrophoresis was developed. The photodiode array detector for capillary electrophoresis (CE-PDA) has 1024 photodetectors and can analyze sample by measuring UV/VIS absorption spectrum in 275~675 nm wavelength range. The CE-PDA instrument can get a spectrum in 30 ms during sample separation and can be programmed by a PC to control various experimental conditions required for sample analysis. The performance of the multichannel CE-PDA instrument was tested using L-ascorbic acid and alizarin yellow GG mixture. The reproducibility test of the CE-PDA system showed 5.6% RSD.
The effects of various hydroxide compounds on base stacking (BS) were investigated for pre-concentration of DNA molecules in capillary electrophoresis (CE). In BS, hydroxide ions ($OH^-$) were electrokinetically introduced after DNA sample injection. A neutralization reaction occurred between the $OH^-$ and $Tris^+$ of the running buffer, which resulted in a zone of lower conductivity. Within the low conductivity zone of the high electric field, the DNA molecules moved more rapidly and were concentrated in front of the low conductivity zone. At the same BS conditions of CE, the enhanced sensitivity of the DNA samples was dependent on the kind of multivalent cations in the hydroxide compounds. Except for LiOH, the hydroxide compounds with monovalent cations showed more effective BS than those with divalent cations because of solubility, ionic strength and electronegativity. The order of hydroxide compounds that enhance the detection sensitivity of DNA molecules was as follows: NaOH > $NH_4OH$ > KOH > $Ba(OH)_2$ > $Sr(OH)_2$ > LiOH > $Ca(OH)_2$ > $Mg(OH)_2$. $NH_4OH$, KOH and $Ba(OH)_2$ proved to be efficient hydroxide compounds to use as effective BS reagents in CE instead of NaOH.
Journal of Korean Society for Atmospheric Environment
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v.22
no.E1
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pp.27-34
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2006
Although the importance of size-resolved raindrops study has been known, it has not been popularized up to the present. In the present study, an attempt was made to generalize the size-resolved raindrops study by a combination of the frozen raindrop collection method and a commercially available high-performance capillary electrophoresis (HPCE). Samplings were carried out at Kyoto, Japan in October 2002. The inorganic ions (chloride, nitrate, sulphate, calcium, ammonium, sodium, magnesium, potassium) in size classified raindrop samples were successfully analyzed by HPCE with good repeatability. To assure the accuracy and precision of HPCE data, t-test was conducted with paired analytical data, which were experimentally constructed by analyzing standard solutions with HPCE and IC, respectively. T-test showed that there is no notable difference between the concentrations determined by the two analytical methods. Every ionic concentration in both cation and anion was found to be strong raindrop size dependence. Though there was slight increase of sodium and sulphate concentrations between 0.85 mm and 1.15 mm raindrop radius, it showed a strong decrease for every ionic component with increasing droplet radius. The combination of the frozen raindrop collection method and a commercially available HPCE can meet the need of size-resolved raindrops study.
Chiral separation of arylalcohols such as 1-phenyl-1-propanol, 1-phenyl-2-propanol, and 2-phenyl-1-propanol by capillary electrophoresis was studied using sulfonated $\beta$-cyclodextrin (CD) as a chiral selector and Ag colloids as an additive. The optimum separation condition of arylalcohols was found to be the chiral selector concentration of 6.5 mM, applied voltage of 15 kV, and pH of 7.0. In order to improve chiral separation, an Ag colloid was mixed with a running buffer. The resolution in the Ag colloid-mixed running buffer was considerably superior to that obtained with the sulfonated $\beta$-CD alone. The molar ratio of sulfonated $\beta$-CD to Ag colloid, which is one of critical parameters affecting resolution, was found to be optimum at 65 : 1. In order to elucidate the resolution mechanism, an inclusion-complex of the arylalcohols with sulfonated $\beta$-CD was prepared by mixing and shaking in solution, and then characterized by cyclic voltammetry (CV). The inclusion mechanism was also discussed using experimental results.
Kim, Kyeon-Ho;Kim, Hyu-Ju;Jeun, Eu-Young;Seo, San-Hun;Hong, Seon-Pyo;Kang, Jong-Seong;Youm, Jeong-Rok;Lee, Sang-Cheal
Archives of Pharmacal Research
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v.24
no.4
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pp.281-285
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2001
Enantiomers of five racemic ${\beta}_2$-agonists were investigated by capillary electrophoresis employing a hydroxypropyl-${\beta}$-cyclodextrin (HP-${\beta}$-CD). The effects of the concentration of HP-${\beta}$-CD added to the background electrolyte and of the pH of the buffer on the effective mobility and resolution of the studied compounds were examined. Very good resolution was achieved for terbutaline and clenbuterol; salbutamol and bambuterol was able to be partially resolved. Enantioselectivity and resolution were influenced by the concentration of the HP-7-CD, buffer composition and pH.
A simple assay method of recombinant human epidermal growth factor (rhEGF) in a pharmaceutical preparation was studied and validated by capillary electrophoresis (CE) using micellar electrokinetic chromatography (MEKC) techniques. Factors affecting the migration behavior and separation performances of the peptide; type of buffers pH, butler concentration, and concentration of sodium dodecyl sulfates (SDS) were investigated to optimize the analytical performance. CE was performed using running buffers 50.0 mM borate (pH 8.5) containing 12.5 mM SDS at 20 $mutextrm{V}$ of the applied voltage. Calibration curves for the rhEGF showed good linearity (r>0.999) over the wide dynamic range from 1.25 to $100{\mu\textrm{g}}/ml$. Sample analysis was performed by using standard addition method to eliminate the matrix effects of dosage vehicle. This method is assumed to be useful for quality control (QC) of various forms of pharmaceutical products of the peptide.
A simple, accurate and reproducible Capillary electrophoresis (CE) assay has been developed for the determination of baicalin, baicalein, wogonin and chrysin in Scutellaria baicalensis. Successful separation of these compounds has been obtained in 35 mM phosphate butter (pH 7.0) using a untreated fused silica capillary ($57{\;}cm{\times}75{\;}{\mutextrm{m}}$ i.d.) at $25^{\circ}C$ with the electric field of 19kV. Baicalin, baicalein wogonin and chrysin was separated and detected at 280 nm 13 min. The detection limits of CE were acceptable compared to HPLC. Reproducibilities of migration time and peak area were 0.66~1.11% (within-run), 2.18~3.38% (between-run) and 3.50~4.55% (within-run), 3.97~4.82%(between-run) at CE. The results indicate that CE could be a promising technique for quality and quantity control analysis of Scutellaria baicalensis as a validation method.
Capillary zone electrophoresis (CZE) which is highly efficient separation technique has been domestically established having optimum detection sensitivity. By applying 20∼35 kV of electric potential to the narrow (50 ${\mu}m$ i.d.) capillary tubing filled with running buffer, this technique can quickly (< 20 min) separate the small quantities of sample with high separation efficiency (number of theoretical plates : 200,000∼500,000). Factors affecting the separation efficiency and resolution in CZE were examined by analyzing adenine and catecholamine derivatives.
The contents of pentachlorophenol (PCP) and 2,3,5,6-tetrachlorophenol (TeCP) in textile products are regulated for safety. Since an organic solvent such as 2-methoxyethanol is needed to extract chlorinated phenols from textile samples, nonaqueous capillary electrophoresis has been applied to achieve the separation of PCP and isomers of TeCP. The run buffer was 100 mM Tris/acetate in methanol whose pH was adjusted to 8.0. All of the analytes were negatively charged at pH 8.0 and their electrophoretic velocities were higher than the electroosmotic flow of the methanol buffer. A reverse voltage of -20 kV was applied along a 27-cm fused silica capillary with ID of 50 μm, and PCP and 3 TeCP isomers were separated based on the difference in $pK_a$ values in less than 4 min. The limits of detection (S/N = 3) were about 0.02 μM. By varying pH of the methanol run buffer, $pK_a$ values of the 4 chlorinated phenols were also estimated.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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