Cellular retinol-binding protein II (CRBP II) belongs to the family of cellular retinol-binding proteins and plays a major role in absorption, transport, and metabolism of vitamin A. In addition, because vitamin A is correlated with reproductive performance, we measured CRBP II mRNA abundance in erlang mountainous chickens by real-time PCR using the relative quantification method. The expression of CRBP II showed a tissue-specific pattern and egg production rate-dependent changes. The expression was very high (p<0.05) in jejunum and liver, intermediate in kidney, ovary, and oviduct, and lowest (p<0.05) in heart, hypothalamus, and pituitary. In the hypothalamus, oviduct, ovary, and pituitary, CRBP II mRNA abundance were correlated to egg production rate, which increased from 12 wk to 32 wk, peaked at 32 wk relative to the other time points, and then decreased from 32 wk to 45 wk. In contrast, the expression of CRBP II mRNA in heart, jejunum, kidney, and liver was not different at any of the ages evaluated in this study. These data may help to understand the genetic basis of vitamin A metabolism, and suggest that CRBP II may be a candidate gene to affect egg production traits in chickens.
Background: Arm protein lost in epithelial cancers, on chromosome X (ALEX) is a novel subgroup within the armadillo (ARM) family, which has one or two ARM repeat domains as opposed to more than six-thirteen repeats in the classical Armadillo family members. Materials and Methods: In the study, we explore the biological functions of ALEX1 in breast cancer cells. Overexpression of ALEX1 and silencing of ALEX1 were performed with SK-BR3 and MCF-7 cell lines. Cell proliferation and colony formation assays, along with flow cytometry, were carried out to evaluate the roles of ALEX1. Results: ALEX1 overexpression in SK-BR3 breast cancer cells inhibited proliferation and induced apoptosis. Furthermore, depletion of ALEX1 in MCF-7 breast cancer cells increased proliferation and inhibited apoptosis. Additional analyses demonstrated that the overexpression of ALEX1 activated the intrinsic apoptosis cascades through up-regulating the expression of Bax, cytosol cytochrome c, active caspase-9 and active caspase-3 and down-regulating the levels of Bcl-2 and mitochondria cytochrome c. Simultaneouly, silencing of ALEX1 inhibited intrinsic apoptosis cascades through down-regulating the expression of Bax, cytosol cytochrome c, active caspase-9, and active caspase-3 and up-regulating the level of Bcl-2 and mitochondria cytochrome c. Conclusions: Our data suggest that ALEX1 as a crucial tumor suppressor gene has been involved in cell proliferation and apoptosis in breast cancer, which may serve as a novel candidate therapeutic target.
Background: Increasing evidence has indicated that high Forkhead box protein C2 (FOXC2) level is closely associated with the development, progression, and poor prognosis of a variety of tumors. However, the relationship between FOXC2 and the progression of human gliomas remains to be clarified. The aim of present study was to assess FOXC2 expression and to explore its contribution in human gliomas. Materials and Methods: Realtime quantitative PCR was performed to examine FOXC2 expression in 85 pairs of fresh frozen glioma tissues and corresponding non-neoplastic brain tissues. Associations of FOXC2 expression with clinicopathological factors and prognosis of glioma patients were statistically analyzed. Results: The relative mRNA expression of FOXC2 was significantly higher in glioma tissues than the corresponding non-neoplastic brain tissues (p<0.001). In addition, high FOXC2 expression was significantly associated with advanced pathological grade (P=0.005) and the low Karnofsky performance score (KPS) (p=0.003), correlating with poor survival (p<0.001). Furthermore, multivariate Cox regression analysis showed that high FOXC2 expression was an independent predictor of overall survival (p=0.006). Conclusions: FOXC2 may act as an oncogenic gene and represent a potential regulator of aggressive development and a candidate prognostic marker in human gliomas.
Background: Coptisine, an isoquinoline alkaloid extracted from Coptidis rhizoma, has many biological activities such as antidiabetic, antimicrobial and antiviral actions. However, whether coptisine exerts anti-cancer metastasis effects remains unknown. Materials and Methods: Effects of coptisine on highly metastatic human breast cancer cell MDA-MB-231 proliferation were evaluated by trypan blue assay and on cell adhesion, migration and invasion by gelatin adhesion, wound-healing and matrigel invasion chamber assays, respectively. Expression of two matrix metalloproteinases (MMPs), MMP-9, MMP-2 and their specific inhibitors tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (TIMP-1) and tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP-2) were analyzed by RT-PCR. Results: Coptisine obviously inhibited adhesion to an ECM-coated substrate, wound healing migration, and invasion through the matrigel in MDA-MB-231 breast cancer cells. RT-PCR revealed that coptisine reduced the expression of the ECM degradation-associated gene MMP-9 at the mRNA level, and the expression of TIMP-1 was upregulated in MDA-MB-231 cells, while the expression of MMP-2 and its specific inhibitor TIMP-2 was not affected. Conclusions: Taken together, our data showed that coptisine suppressed adhesion, migration and invasion of MDA-MB-231 breast cancer cells in vitro, the down-regulation of MMP-9 in combination with the increase of TIMP-1 possibly contributing to the anti-metastatic function. Coptisine might be a potential drug candidate for breast cancer therapy.
Van, Kyujung;Lestari, Puji;Park, Yong-Jin;Gwag, Jae-Gyun;Kim, Moon-Young;Kim, Dong-Hyun;Heu, Sung-Gi;Lee, Suk-Ha
Journal of Crop Science and Biotechnology
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v.10
no.3
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pp.147-158
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2007
Xanthomonas axonopodis pv. glycines(Xag) is a pathogen that causes bacterial leaf pustule(BLP) disease in soybeans grown in Korea and the southern United States. Typical and early symptoms of the disease are small, yellow to brown lesions with raised pustules that develop into large necrotic lesions leading to a substantial loss in yield due to premature defoliation. After Xag infects PI 96188, only pustules without chlorotic haloes were observed, indicating the different response to Xag. To identify differentially expressed genes prior to and 24 hr after Xag inoculation to PI 96188 and BLP-resistant SS2-2, an oligonucleotide macroarray was constructed with 100 genes related to disease resistance and metabolism from soybean and Arabidopsis. After cDNAs from each genotype were applied on the oligonucleotide macroarrays with three replicates and dye swapping, 36 and 81 genes were expressed as significantly different between 0 hr and 24 hr in PI 96188 and SS2-2, respectively. Six UniGenes, such as the leucine-rich repeat protein precursor or 14-3-3-like protein, were selected because they down-regulated in PI 96188 and up-regulated in SS2-2 after Xag infection, simultaneously. Using tubulin and cDNA of Jangyeobkong(BLP-susceptible) as controls, the oligonucleotide macroarray data concurred with quantitative real-time RT-PCR(QRT RT-PCR) results in most cases, supporting the accuracy of the oligonucleotide macroarray experiments. Also, QRT RT-PCR data suggested six candidate genes that might be involved in a necrotic response to Xag in PI 96188.
To develop eco-friendly microbial inoculants, siderophore-producing bacteria were isolated and identified, and their production characteristics and plant growth-promoting abilities were investigated. A strain S21 was isolated from rhizosphere of Korean perilla (Perilla frutescens) and identified as Enterobacter amnigenus by phenotypic properties and 16S rRNA gene sequencing. The highest siderophore production was obtained in a medium containing 0.5% fructose, 0.1% urea, 0.5% K2HPO4 and 0.1% succinic acid. By using this improved medium, siderophore production increased by 2.5 times compared to that of basal medium. The strain S21 showed insoluble phosphate solubilizing, ammonification and antifungal activities, and also produced hydrolytic enzymes (protease and lipase), indoleacetic acid and 1-aminocyclopropane-1-carboxylate deaminase. Our data suggest that E. amnigenus S21 is a potential candidate that can be used as eco-friendly biocontrol agent and biofertilizer.
Truong, Anh Duc;Hong, Yeojin;Lee, Janggeun;Lee, Kyungbaek;Lillehoj, Hyun S.;Hong, Yeong Ho
Korean Journal of Poultry Science
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v.44
no.3
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pp.199-209
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2017
Mitogen-activated protein kinase (MAPK) signaling pathways play a key role in innate immunity, inflammation, cell proliferation, cell differentiation, and cell death. The main objective of this study was to investigate the expression level of candidate MAPK pathway genes in the intestinal mucosal layer of two genetically disparate chicken lines (Marek's disease-resistant line 6.3 and Marek's disease-susceptible line 7.2) induced with necrotic enteritis (NE). Using high-throughput RNA sequencing, we investigated 178 MAPK signaling pathway related genes that were significantly and differentially expressed between the intestinal mucosal layers of the NE-afflicted and control chickens. In total, 15 MAPK pathway genes were further measured by quantitative real-time PCR(qRT-PCR) and the results were consistent with the RNA-sequencing data. All 178 identified genes were annotated through Gene Ontology and mapped onto the KEGG chicken MAPK signaling pathway. Several key genes of the MAPK pathway, ERK1/2, JNK1-3, p38 MAPK, MAP2K1-4, $NF-{\kappa}B1/2$, c-Fos, AP-1, Jun-D, and Jun, were differentially expressed in the two chicken lines. Therefore, we believe that RNA sequencing and qRT-PCR analysis provide resourceful information for future studies on MAPK signaling of genetically disparate chicken lines in response to pathogens.
Park, Tae-Joon;Kang, Jung-Mi;Na, Byoung-Kuk;Sohn, Woon-Mok
Parasites, Hosts and Diseases
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v.47
no.4
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pp.359-367
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2009
Paramyosin is a myofibrillar protein present in helminth parasites and plays multifunctional roles in host-parasite interactions. In this study, we identified the gene encoding paramyosin of Clonorchis sinensis (CsPmy) and characterized biochemical and immunological properties of its recombinant protein. CsPmy showed a high level of sequence identity with paramyosin from other helminth parasites. Recombinant CsPmy (rCsPmy) expressed in bacteria had an approximate molecular weight of 100 kDa and bound both human collagen and complement 9. The protein was constitutively expressed in various developmental stages of the parasite. Imunofluorescence analysis revealed that CsPmy was mainly localized in the tegument, subtegumental muscles, and the muscle layer surrounding the intestine of the parasite. The rCsPmy showed high levels of positive reactions (74.6%, 56/75) against sera from patients with clonorchiasis. Immunization of experimental rats with rCsPmy evoked high levels of IgG production. These results collectively suggest that CsPmy is a multifunctional protein that not only contributes to the muscle layer structure but also to non-muscular functions in host-parasite interactions. Successful induction of host IgG production also suggests that CsPmy can be applied as a diagnostic antigen and/or vaccine candidate for clonorchiasis.
Goats (Capra hircus) are one of the oldest species of domesticated animals. Native Korean goats are a particularly interesting group, as they are indigenous to the area and were raised in the Korean peninsula almost 2,000 years ago. Although they have a small body size and produce low volumes of milk and meat, they are quite resistant to lumbar paralysis. Our study aimed to reveal the distinct genetic features and patterns of selection in native Korean goats by comparing the genomes of native Korean goat and crossbred goat populations. We sequenced the whole genome of 15 native Korean goats and 11 crossbred goats using next-generation sequencing (Illumina platform) to compare the genomes of the two populations. We found decreased nucleotide diversity in the native Korean goats compared to the crossbred goats. Genetic structural analysis demonstrated that the native Korean goat and cross-bred goat populations shared a common ancestry, but were clearly distinct. Finally, to reveal the native Korean goat's selective sweep region, selective sweep signals were identified in the native Korean goat genome using cross-population extended haplotype homozygosity (XP-EHH) and a cross-population composite likelihood ratio test (XP-CLR). As a result, we were able to identify candidate genes for recent selection, such as the CCR3 gene, which is related to lumbar paralysis resistance. Combined with future studies and recent goat genome information, this study will contribute to a thorough understanding of the native Korean goat genome.
Potato Rpi-blb2 encodes a protein with a coiled-coil-nucleotide binding site and leucine-rich repeat (CC-NBSLRR) motif that recognizes the Phytophthora infestans AVRblb2 effector and triggers hypersensitive cell death (HCD). To better understand the components required for Rpi-blb2-mediated HCD in plants, we used virus-induced gene silencing to repress candidate genes in Rpi-blb2-transgenic Nicotiana benthamiana plants and assayed the plants for AVRblb2 effector. Rpi-blb2 triggers HCD through NbSGT1-mediated pathways, but not NbEDS1- or NbNDR1-mediated pathways. In addition, the role of salicylic acid (SA), jasmonic acid (JA), and ethylene (ET) in Rpi-blb2-mediated HCD were analyzed by monitoring of the responses of NbICS1-, NbCOI1-, or NbEIN2-silenced or Rpi-blb2::NahG-transgenic plants. Rpi-blb2-mediated HCD in response to AVRblb2 was not associated with SA accumulation. Thus, SA affects Rpi-blb2-mediated resistance against P. infestans, but not Rpi-blb2-mediated HCD in response to AVRblb2. Additionally, JA and ET signaling were not required for Rpi-blb2-mediated HCD in N. benthamiana. Taken together, these findings suggest that NbSGT1 is a unique positive regulator of Rpi-blb2-mediated HCD in response to AVRblb2, but EDS1, NDR1, SA, JA, and ET are not required.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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