Purple passion fruit (Passiflora edulis Sims) is one of the introduced tropical plants, an increasing interest has arisen due to its distinctive taste and attractive flavor. It is expected that passion fruit production and planted area will increase gradually in the years ahead because of high profitability and consumer's demands of healthful ingredients. So we tried to investigate the effect of plant growth regulators and antioxidants on in vitro plant regeneration and callus induction from leaf explants of passion fruit for an establishment of optimal mass propagation system. Young leaf explants of purple passion fruit were cultured in Murashige and Skoog (MS) medium containing different growth regulators and antioxidant additives to induce the shoot organogenesis. After 8 weeks, the highest embryogenic callus formation rate was obtained in MS medium supplemented with $1mg{\cdot}L^{-1}$ 6-benzylaminopurine (BAP) and $2mg{\cdot}L^{-1}$ 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D), furthermore, the shoot development via organogenesis was also observed. Silver nitrate ($AgNO_3$), which was added into the medium to minimize the adverse effects of leached phenolics, was effective for reduction of medium browning and sudden explant death. In the medium supplemented with $1mg{\cdot}L^{-1}$ BAP and $1mg{\cdot}L^{-1}$ gibberellic acid ($GA_3$), shoots were most vigorously regenerated and elongated. Most shoots rooted successfully in half strength medium with $1mg{\cdot}L^{-1}$ indol-3 acetic acid (IAA), and more than 90% of plantlets survived after 4-month acclimatization period.
Iris odaesanensis Y. N. Lee. is an important endangered and native plant belonging to the family Iridaceae in Korea. This study describes a method for rapid micropropagation of this species via from leaf, rhizome and root explants derived calli. Leaf, rhizome and root explants were cultured on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 2,4-dichlorophenoxy acetic acid (2,4-D) for callus induction. Rhizome explants yielded calli at a frequency of 72% when cultured at 1.0 mg/l 2,4-D. Calli were maintained at 1.0 mg/l 2,4-D. These calli were transferred to MS medium supplemented with 0, 0.5, 1.0, and 2.0 mg/l 2,4-D in combination with 0, 0.5, 1.0, and 3.0 mg/l BA for adventitious shoot induction. The highest number of adventitious shoot (228.9 per petri-dish) were formed at 1.0 mg/l 2,4-D and 1.0 mg/l BA. WPM medium was the best to convert calli into plantlets, where up to 98.2% of calli were regenerated into plantlets. This in vitro propagation protocol should be useful for conservation of this endangered plant.
In vitro culture and radiation techniques were used for obtaining mutants tin tall fescue. Endophyte free and friendly tall fescue cultivars Kentucky-31 and Jesup were used for induction of genetic variability through in-vitro mutagenesis. Mature seeds was used for callus induction on 6 mg/L 2,4-D. Actively growing and compact callus was treated with three different doses of gamma rays (10 Gy, 30 Gy and 50 Gy). Maximum proliferation and plantlets regeneration growth was observed in control and minimum at 10 Gy. Furthermore, the maximum number of tiller in the irradiated population was observed in 10 Gy. The treatments 30 Gy and 50 Gy exhibited negative impact on the tillering potential of the tall fescue plant. The object of this study was to develop protocols for mutation breeding in tall fescue through radiation techniques.
조직배양을 이용하여 시클라멘의 급속증식체계를 확립하기 위한 기초실험으로 자엽과 엽병을 auxin류와 cytokinin류가 혼용처리된 MS배지에 배양한 후 캘러스 발생 및 기관 재분화에 미치는 치상절편, 부위별, 생장조절제의 효과를 조사하였다. 절편부위별 효과는 자엽조직이 엽병조직보다 캘러스 및 캘러스로부터 shoot 분화에 좋은 반응을 보였다. 2,4-D와 kinetin 혼용처리구에서 자엽은 전혀 반응이 없었고 엽병절편에서는 2,4-D와 kinetin이 1.0 mg/L씩 혼용배지에서만 캘러스로부터 shoot가 재분화되었다. NAA와 BA 혼용배지의 경우 자엽절편에서는 모든 배지에서 캘러스가 유도되었으며 shoot 재분화는 0.2 mg/L NAA와 0.5 mg/L BA 혼용 배지에서 가장 양호하였고, 엽병조직은 0.2mg/L NAA와 2.0 mg/L BA 혼용배지에서 다수의 shoot가 재분화되어 가장 효과적이었다. Shoot로부터 발근에 적합한 NAA와 IAA의 효과를 조사하였던 바 NAA가 IAA보다 뿌리발생에 양호하였고 특히 1.0 mg/L NAA에서 다수의 뿌리가 발생되어 효과적이었다.
Iris koreana (Iridaceae) is an endangered plant native to Korea. In order to develop an in vitro propagation method, we investigated the effect of 2,4-dichlorophenoxy acetic acid (2,4-D) and a-naphthalene acetic acid (NAA) on callus induction in different I. koreana tissues. In addition, we also investigated the effect of 2,4-D and Benzyl aminopurine (BA) treatments on adventitious shoot induction in viable calli and the effect of indole-3-butyric acid (IBA) on root formation in viable shoots. We found that callus production was highest with 1.0 mg/L NAA (94.4% cultured rhizome explants), and adding low concentrations of 2,4-D to BA containing media significantly increased the frequency of shoot primordial formation. The best rooting results were obtained with 1.0 mg/L IBA, on which 98% of regenerated shoots developed roots and produced an average of 7.4 roots within 45 days. This in vitro propagation protocol will be useful for conservation, as well as for mass propagation.
The Cassava(Manihot esculenta Crantz) is a tropical root crop, originally from Amazonia, that provides the staple food of an estimated 800 million people worldwide. It belongs to the family Euphorbiaceae which also includes rubber (Hevea brasiliensis) and castor bean (Ricinus communis). Among tropical crops, rice, sugarcane, maize and cassava are the most important sources of calories for human consumption. Problems in the propagation of cassava are virus diseases and low rates of seed germination. So we tried to optimize protocols for mass production of somatic embryo amenable to large-scale vegetative propagation of Cassava. After in vitro eight-week culture of leaves of Cassava, the medium which contained the 2,4-D, BAP and IBA showed the highest callus induction rate, embryogenesis callus formation rate and somatic embryo formation in Cassava culture. In the medium with GA3 and myo-inositol, shoots were most vigorously regenerated from somatic embryos of Cassava. Our experiments confirmed that in vitro growth and multiplication of plantlets could depend on its reaction to the different medium composition, and this micropropagation techniques could be a useful system for healthy and vigorous plant production.
가시오갈피의 조직배양을 통한 대량증식방법체계 확립의 방법으로 기내배양에서의 캘러스형성 및 식물체 분화에 영향을 미치는 배지와 식물생장 조절물질 및 농도의 최적조건을 구명코자 실시한 실험 결과는 다음과 같다. 1. MS배지를 기본으로하여 여러 가지 식물생장 조절물질(2, 4-D, TDZ, IAA, NAA, BAP) 을 단독 처리할 때 2, 4-D 2mg/l 에서 callus 형성율이 45.5%로 가장 양호하였으며 shoot의 분화는 TDZ 처리시 양호하였으며 간헐적으로 multiple shoot와 root분화가 생겼다. 2. MS배지를 기본으로하여 식물생장조절물질을 2, 4-D와 TDZ의 조합처리시 callus 형성율은 2, 4-D 2mg/ l +TDZ 0.7mg/ l 일때 가장 양호하였으며 shoot의 분화는 2, 4-D의 농도가 낮고 TDZ의 농도가 높은 2, 4-D 0.1mg/ l +TDZ 0.7mg/ l 에서 양호하였다. 3. 배지조성에 따른 callus 형성은 $B_5,\;MSB_5$ 배지 모두 MS배지를 기본으로하여 실시한 실험과 마찬가지로 2, 4-D 2mg/ l +TDZ 0.7mg/ l 에서 양호하였으며, $B_5$배지에서 2, 4-D 2mg/ l +TDZ 0.7mg/ l 처리시 100%의 callus형성율을 나타냈다. Shoot의 분화는 auxin류인 2, 4-D보다 cytokinin류인 TDZ처리시 양호하였고 조합처리 또한 2, 4-D의 농도가 낮은 2, 4-D 0,1mg/ l 일때 shoot분화가 형성되었으며 $MSB_5$ 배지에서 양호한 shoot의 분화가 형성되었다.
Agrobacterium rhizognes $A_4$ Ti-plasmid를 인삼 뿌리에 도입하여 유전적으로 안정하며 반영구적으로 이용할 수 있는 형질전환된 인삼모상근 캘러스(GHC-T78)를 유도하였다. 특정 ginsenoside를 대량으로 생산할 수 있는 최적배양조건을 확립하기 위해서 먼저 모상근으로부터 캘러스의 유도하는 과정에서 BA의 단독 처리구는 auxin과 cytokinin의 혼합 처리구보다 캘러스 형성이 더 우수하였다. 인삼 캘러스 형성율은 Benzyladenine(BA)를 1 mg-3 mg/L 까지 첨가한 배지에서 가장 높게 나타났으며, ginsenoside 함량 역시 bezyladenine 단독처리구는 가장 우수하였다. 캘러스 세포의 액체배양 기간을 4주로 설정할 때 BA의 농도 역시 BA 2 mg/L로 첨가한 배지에서 가장 우수한 캘러스 생장률을 보였다. 실제로 인삼 모상근 캘러스의 생장율은 암상태에서 배양하는 것이 광상태에서 보다 다소 양호하였으나, ginsenoside의 생성에는 연속광상태에서 더 효과적임이 확인되었다. 모상근 캘러스에서 얻은 이러한 결과는 국내외 처음으로 보고되는 내용이며, 액체배양의 캘러스 세포에서 분화된 무수히 많은 단일 모상근 근모의 형성은 액체배양을 통한 특정 ginsenosid의 새로운 생산방법을 개발할 수 있도록 하고 있다.
In order to establish a reliable and highly efficient method for genetic transformation of pepper, a monitoring system featuring GFP (green fluorescent protein) as a report marker was applied to Agrobacteriummediated transformation. A callus-induced transformation (CIT) system was used to transform the GFP gene. GFP expression was observed in all tissues of $T_0$, $T_1$ and $T_2$ peppers, constituting the first instance in which the whole pepper plant has exhibited GFP fluorescence. A total of 38 T0 peppers were obtained from 4,200 explants. The transformation rate ranged from 0.47 to 1.83% depending on the genotype, which was higher than that obtained by CIT without the GFP monitoring system. This technique could enhance selection power by monitoring GFP expression at the early stage of callus in vitro. The detection of GFP expression in the callus led to successful identification of the shoot that contained the transgene. Thus, this technique saved lots of time and money for conducting the genetic transformation process of pepper. In addition, a co-transformation technique was applied to the target transgene, CaCS (encoding capsaicinoid synthetase of Capsicum) along with GFP. Paprika varieties were transformed by the CaCS::GFP construct, and GFP expression in callus tissues of paprika was monitored to select the right transformant.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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