• 제목/요약/키워드: CMCase

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Isolation and Characterization of Bacillus sp. KD1014 Producing Carboxymethyl-Cellulase (Isolation and characterization of Bacillus sp. KD1014 producing carboxymethyl-cellulase)

  • Lee, Kyung Dong;Kim, Jong Ho;Kim Hoon
    • Journal of Microbiology
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    • 제34권4호
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    • pp.305-310
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    • 1996
  • A microorganism producing carboxymethyl-cellulase (CMCase) was isolated from 300 soil and compost samples. The isolate was identified as Bacillus sp. by $Biolog^{TM}$ test and fatty acid analysis, and named as Bacillus sp. KD1014. The isolate could degrade, in addition to CMC, various kinds of polysaccharides such as levan, xylan, starch, and filter paper but hardly degrade microcrystalline Avicel. The optimum growth and CMCase production of the isolate was observed between 16-and 25 hr-culture at 45$^{\circ}C$ and pH 5.0. The maximum CMCase activity was observed at pH 4.5 and 6$0^{\circ}C$. The CMCase was found to bind to Avicel. The CMCase was internally cleaved as growth continued. When crude supernatant was used for activity staining, three major bands were detected on a native gel, however, only one major band was detected on a denaturating gel after removal of the detergent.

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고온성 변이균주 Talaromyces luteus 2004의 분리와 Carboxymethylcellulase의 생성 조절 및 효소의 특성 (Isolation of a Thermophilic Mutant, Talaromyces luteus 2004 in relation to the Regulation of Carboxymethylcellulase Production and Enzymatic characteristics)

  • 홍미경;한효영;정영희;민경희
    • 한국균학회지
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    • 제24권3호통권78호
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    • pp.206-213
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    • 1996
  • Talaromyces luteus 6112 균주에 돌연변이원 N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine을 처리하여 고온성 돌연변이주인 T. luteus 2004를 선별하였다. T. luteus 2004 균주는 고온성 섬유소 분해 효소인 carboxymethylcellulase(CMCase)와 그 외의 다당류 분해효소인 avicellase, xylanase, ${\beta}-glucosidase$ 등을 생성하였다. 고온성 섬유소 분해효소의 생성은 3% carboxymethylcellulose(CMC) 최소배지에서 가장 높게 유도되었으므로 CMC가 CMCase 생성의 유도물질임을 알 수 있었다. 고온성 섬유소분해효소의 생성에 있어서 포도당과 D-cellobiose는 CMCase 생성에 catabolite repressor로 작용함을 보여 주었다. T. luteus 2004의 섬유소 분해효소의 효소학적 특성은 $70^{\circ}C$, pH 4에서 최고의 활성을 보여주는 고온성 효소이므로 대체에너지 개발에 활용 가능한 균주로 사료된다.

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Enhanced Carboxymethylcellulase Production by a Newly Isolated Marine Bacterium, Cellulophaga lytica LBH-14, Using Rice Bran

  • Gao, Wa;Lee, Eun-Jung;Lee, Sang-Un;Li, Jianhong;Chung, Chung-Han;Lee, Jin-Woo
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제22권10호
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    • pp.1412-1422
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    • 2012
  • The aim of this work was to establish the optimal conditions for production of carboxymethylcellulase (CMCase) by a newly isolated marine bacterium using response surface methodology (RSM). A microorganism producing CMCase, isolated from seawater, was identified as Cellulophaga lytica based 16S rDNA sequencing and the neighborjoining method. The optimal conditions of rice bran, ammonium chloride, and initial pH of the medium for cell growth were 100.0 g/l, 5.00 g/l, and 7.0, respectively, whereas those for production of CMCase were 79.9 g/l, 8.52 g/l, and 6.1. The optimal concentrations of $K_2HPO_4$, NaCl, $MgSO_4{\cdot}7H_2O$, and $(NH_4)_2SO_4$ for cell growth were 6.25, 0.62, 0.28, and 0.42 g/l, respectively, whereas those for production of CMCase were 3.72, 0.54, 0.70, and 0.34 g/l. The optimal temperature for cell growth and the CMCase production by C. lytica LBH-14 were $35^{\circ}C$ and $25^{\circ}C$, respectively. The maximal production of CMCase under optimized condition for 3 days was 110.8 U/ml, which was 5.3 times higher than that before optimization. In this study, rice bran and ammonium chloride were developed as carbon and nitrogen sources for the production of CMCase by C. lytica LBH-14. The time for production of CMCase by a newly isolated marine bacterium with submerged fermentations reduced to 3 days, which resulted in enhanced productivity of CMCase and a decrease in its production cost.

독청버섯아재비 균주가 생산하는 Carboxymethyl Cellulase의 정제 및 효소학적 특성 (Purification and Characterization of Carboxymethyl Cellulase from Stropharia rugosoannulata)

  • 유관희;장형수
    • 한국균학회지
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    • 제30권2호
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    • pp.113-118
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    • 2002
  • S. rugosoannulata의 배양액으로부터 4단계를 거쳐 분자량이 54 kDa인 CMCase를 분리 정제하였다. 이 효소는 pH 4.0에서 최대의 활성을 보여주는 acidic CMCase로 $40^{\circ}C$에서 최대활성을 나타냈다. EDTA에 의해 활성이 저해되는 것으로 보아 metalloenzyme으로 추정되며 1,10-phenanthroline과 KCN 및 L-cystein 등의 저해제에 효소활성이 크게 감소하였으며, $AgNO_{3},\;MgSO_{4},\;KCl$등의 금속염에서는 효소활성이 증가되었으나, $ZnSO_{4},\;BaCl_{2},\;CaCl_{2}$ 등에서는 효소활성이 저해되었다.

합성배지에서 Stropharia rugosoannulata가 생산하는 섬유소분해효소에 관한 연구 (Studies on the Celluloytic Enzymes Produced by Stropharia rugosoannulata in Synthetic Medium)

  • 유관희;장형수
    • 한국균학회지
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    • 제27권2호통권89호
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    • pp.94-99
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    • 1999
  • 섬유소자원을 이용하기 위하여 S. rugosoannulata를 합성배지에서 배양하여 cellulase 생산 최적 배양조건을 검토한 결과는 다음과 같다. S. rugosoannulata에 의한 cellulase 생산은 세 효소 모두 $40^{\circ}C$가 최적온도이었고, Avicelase와 ${\beta}-glucosidase$는 pH 5.0, CMCase는 pH 4.0이 최적조건 이었다. 탄소원은 CMCase와 ${\beta}-glucosidase$는 xylose를 Avicelase는 maltose를 탄소원으로 했을 때 최고의 생산을 나타냈으며, xylose의 최적농도는 CMCase는 1.0%, Avicelase는 0.8%, ${\beta}-glucosidase$는 1.1%이었다. 질소원은 무기질소원으로 $NH_4Cl$ 첨가시 최고의 생산성을 나타냈으며, 최적농도는 CMCase는 0.3을 Avicelase와 ${\beta}-glucosidase$는 0.4%이었으며, 유기질소원으로는 malt extarct 첨가시 높은 생산성을 나타냈으며, 최적농도는 CMCase와 Avicelase는 1.0%, ${\beta}-glucosidase$는 1.3%이었다. 무기염류로는 $CoCl_2$ 첨가시 최고의 생산성을 나타냈으며, 최적농도는 세 효소 모두 0.35%이었다.

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혼효림으로부터 셀룰로오스분해 박테리아 분리 및 효소학적 특성규명 (Isolation and characterization of cellulolytic bacteria, Bacillus sp. EFL1, EFL2, and EFP3 from the mixed forest)

  • 박화랑;오기철;김봉규
    • Journal of Applied Biological Chemistry
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    • 제61권1호
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    • pp.59-67
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    • 2018
  • 본 연구는 경상남도 산청군 소재 경남과학기술대학교 학술림에서 채취한 토양으로부터 CMCase와 xylanase를 생산하는 3개의 Bacillus종을 분리하였다. API kit 분석과 16S rRNA 유전자 염기서열 분석을 통해 3개의 균 모두 Bacillus종에 속하였으며, Bacillus sp. EFL1, EFL2, EFP3로 명명하였다. Bacillus sp. EFL1, EFL2, EFP3의 최적 생장온도는 $37^{\circ}C$였으며, CMCase와 xylanase의 활성은 배양 후 12시간에 최고에 달하였다. Bacillus sp. EFL1의 CMCase 효소활성의 최적온도는 $50^{\circ}C$, pH는 5.0이었고, xylanase 효소활성의 최적온도는 $50^{\circ}C$, pH 6.0이었다. Bacillus sp. EFL2의 CMCase활성의 최적온도는 $60^{\circ}C$, pH는 5.0이었고, xylanase 효소활성의 최적온도는 $60^{\circ}C$였고, pH 3.0-9.0까지 비교적 높은 활성을 보였다. Bacillus sp. EFP3의 CMCase의 최적온도는 $50^{\circ}C$, pH는 5.0이었고, xylanase의 최적온도는 $50^{\circ}C$, pH 4.0이었다. Bacillus sp. EFL1, EFL2, EFP3의 CMCase는 모두 온도안정성이 낮았다. 또한 Bacillus sp. EFL1과 EFP3의 xylanase 역시 온도안정성이 낮았지만, Bacillus sp. EFL2의 xylanase는 온도안정성이 높았다.

해양미생물 Psychrobacter aquimaris LBH-10가 생산하는 산성 carboxymethylcellulase의 특성에 대한 연구 (Characterization of Acidic Carboxymethylcellulase Produced by a Marine Microorganism, Psychrobacter aquimaris LBH-10)

  • 김혜진;고와;이유정;정정한;이진우
    • 생명과학회지
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    • 제20권4호
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    • pp.487-495
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    • 2010
  • Carboxymethylcellulose (CMC)를 분해하는 미생물을 해수에서 분리하였으며, 16S rDNA의 염기서열을 분석하여 동정한 결과, Psychrobacter aquinaris로 학인 되어 P. aquinaris LBH-10로 명명하였다. 이 균주는 CMC, 셀로바이오스, 커드란, 여과지, p-nitrophenyl-$\beta$-D-glucopyranoside (pNPG), 풀루란 및 자일란을 분해하였으나, avicel 및 섬유소는 분해하지 못하였다. P. aquinaris LBH-10이 생산하는 carboxymethylcellulase (CMCase)의 최적 반응 온도는 $50^{\circ}C$이었으며, $20^{\circ}C$에서 $50^{\circ}C$의 온도 범위에서 24시간이 경과한 후에도 90% 이상의 활성을 유지하였다. 또한, 이 균주가 생산하는 CMCase의 최적 반응 pH는 3.5이었으며 pH 2.5에서 pH 7.0 사이의 산성 조건하에서 24시간이 경과한 후에도 70% 이상의 활성을 유지하였다. P. aquinaris LBH-10이 생산하는 CMCase의 최적 반응 pH는 지금까지 발견된 섬유소 분해효소 중에서 가장 낮은 pH로 판단된다. 제한된 농도의 $CoCl_2$, EDTA, 및 $PbCl_2$은 P. aquinaris LBH-10가 생산하는 CMCase의 활성을 증가시켰으나, $HgCl_2$, KCl, $MnCl_2$, $NiCl_2$, 및 $SrCl_2$는 이 균주가 생산하는 CMCase의 활성을 감소시켰다.

Isolation and Characterization of Marine Microorganisms Producing Cellulase from the Seashore of the Kyungsang Province in Korea

  • Jo, Kang-Ick;Lee, Bo-Hwa;Kim, Bo-Kyung;Jo, Hae-Young;Kim, Sung-Koo;Nam, Soo-Wan;Lee, Jin-Woo
    • 한국생물공학회:학술대회논문집
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    • 한국생물공학회 2005년도 생물공학의 동향(XVII)
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    • pp.307-311
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    • 2005
  • 해양에서 유용물질을 생산하는 미생물을 분리하기 위하여 경상도 지역의 해안에서 시료를 채취하여 총 371 균주의 해양미생물을 얻었으며 전분, CMC 및 단백질 등과 같은 기질에 대한 분해활성을 측정하여 CMC에 대한 우수한 분해 능력을 가진 30균주를 선별하였다. 이들 30 균주를 배양하여 CMCase의 생산능력이 우수한 12 균주를 선발하였다. 이들 해양미생물을 배양하고 섬유소 분해효소를 생산한다고 알려진 B. amyloliquefaciens DL-3와 CMCase의 활성을 비교하였다. 이 중 다대포에서 분리하여 명명한 A-53 균주가 가장 높은 CMCase 활성을 나타를 생산한다고 알려진 B. amyloliquefaciens DL-3와 CMCase의 활성을 비교하였다. 이 중 다대포에서 분리하여 명명한 A-53 균주가 가장 높은 CMCase 활성을 나타내었다. A-53 균주를 16S rDNA partial sequencing 및 gyrase A partial sequencing하여 동정한 결과, Bacillus subtilis subsp. subtilis로 확인되었으며 B. subtilis subsp. subtilis A-53으로 명명하였다.

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Cloning and DNA Sequence of Carboxymethylcellulase (CMCase) Gene from Cellulomonas sp. YE-5

  • Her, Song;Kim, Dong-Seob;Choi, Sun-Jin
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제3권2호
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    • pp.86-90
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    • 1993
  • CMCase positive clones were screened from Cellulomonas sp. YE-5 and named pCE1, pCE2 and pCE3. Among the positive clones pCE1 was used for this study, because it has the smallest insert and the highest CMCase activity among the 3 clones, and its nucleotide sequence was determined. The CMCase gene in pCE1 was composed of 1071 bp of nucleotides coding 357 amino acids. Computer analysis showed that the pCE1 has 65% sequence homology with the endoglucanase from Cellulomonas fimi.

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산림토양내 carboxymethylcellulase의 분포와 미생물의 생장 및 활성과의 상관에 대하여 (Distribution of abiontic carboxymethylcellulase in relation to microbial growth and activity in forest soils)

  • 이영하;하영칠;홍순우
    • 미생물학회지
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    • 제23권2호
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    • pp.147-156
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    • 1985
  • Seasonal and vertical variations of abiontic soil carboxymethylcellulase (CMCase) activities were assessed every other month for a year in two contrasting forest soils and evaluated the relationships between soil CMCase activity and environmental parameters. In climax deciduous soil, variations in CMCase activities caused by differences in sampling time were greater than those caused by differences in soil depth. On the other hand, counter phenomenon was obserned in coniferous soil at the stage of development. Correlation analyses showed that soil CMCase activities were significantly (p>0.01) correlated with microbial respiration rates ($O_2$ uptake) and all of the microbial population sizes. From these results, it is suggested that determination of abiontic soil CMCase activity is an useful additional index for evaluating the overall microbial growth and activity in soils.

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