In order to express the CDC70 gene of Saccharomyces cerevisiae by heat shock, we have designed heat inducibe hybrid promoters using the Drosophila melanogaster heat shock elements (HSEs). A 220 bp-long upstream fragment of the D. melanogaster hsp70 gene comprised of four HSEs was placed upstream of the putative proximal TATA box of the CDC70 gene. Hybrid promoters containing different fusion joints were tested for their ability to drive the CDC70 gene expression by heat shock. The results showed that the HSEs of D. melanogaster conferred the heat-induced CDC70 gene expression, but the heat inducibility was much lower than that in D. melanogaster.
In order to elucidate and characterize the signal transduction pathway(s) whereby yeast cells respond to mating pheromone, we have isolated mutants which are able to conjugate in the absence of the alpha-factor receptor. Sixty-one suppressors of a ste2-deletion mutation which also confer a ts conditional "start" arrest phenotypw have been subjected to genetic analysis. The mutants could be assigned to three complementation groups designated CDC70, CDC72 and CDC73, which are unlinked to each other as well as to the previously identified start genes. Quantitation of mating ability of the cdc70, cdc72 and cdc73 mutations in a ste2-deletion background gives levels ranging from 0.1% to 0.3% of wild type, depending on the allele and the gene. The results indicate that the signals from mating pheromone might be mediated by the CDC70, CDC72 and CDC73 products. products.
효모의 mating pheromone에 의한 세포내 Slgnal을 전달하는 물질을 coding 하거나 조절할 수 있는 유전자에 대한 정보를 얻기 위해서 효모에서 G-protein의 ${\alpha}-subunit$를 coding 하는 유전자 CDC70에 돌연변이가 얼어난 균주 $A14-3(MAT{\alpha},\;cdc70-5)$에 UV를 조사하여 돌연변이 cdc70-5를 억제할수 있는 또 다른 돌연변이를 획득하였다 . 돌연변이 cdc70-5의 표현형은 온도 감수성 (temperature sensitivity)이며, $38^{\circ}C$에서 배양하면 세포주기가 G1에서 정지되고 shmoo모양을 보인다 . 균주 A14-3에서 UV를 조사하였을 때 $38^{\circ}C$에서 colony를 형성할 수 있고 세포분열이 정상적으로 진행되어 출아를 하고 있다는 것은 새로운 돌연변이가 cdc70-5 의 표현형을 억제 한다는 사실을 의미한다 . 이러한 억제돌연변이 중 signal transducer와 직접적으로 관련이 없는 유전자들인 $sir^-$ 및 $mat{\alpha}2^-$ 돌연변이를 배제한 다음 선택된 15개의 돌연변이들를 중심으로 분석을 행하였다 . 어느 유전자에서 유발 되었는지 그리고 유전자 종류는 몇 가지나 되는지를 암기 위하여 tetrad analysis를 통해 연관여부를 조사하여 분리된 15개의 돌연변이중 12개는 4개의 연관군(sga1, sga2, sga3, sga4)에 속함을 알았다.
대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.1
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pp.222.1-222.1
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2003
The signal transduction pathway leading to the activation of the p70s6k plays an important role in the progression of cells from G0/G1 to S phase of the cell cycle but remains incompletely characterized. We investigated the role of the Rho family G protein Rac1 in H2O2-mediated p70s6k activation. Transient expression of a dominant negative mutants of the small GTP-binding proteins Rac1 (Rac1N17) and Cdc42(Cdc42N17) showed reduced levels of slower migration on Western blots of one-dimensional SDS-PAGE in p70s6k and ERK1/2 by PDFG stimulation. (omitted)
이 연구에서는 방부제로 사용되는 아질산나트륨이 질편모충에 어떤 영향을 주는지 알 아보고자 in vivo 및 in vitro에서 관찰하였다 Metronidasole 감수성인 KT9 분리주 및 내성인 CDC85주의 배양배지에 아질산나트륨을 넣은 경우 10% 이하로 증식이 억제되는 농도는 KT9주에서는 6mM, CDC85주에서는 10 mM로 KT9 분리주가 CDC85주에 비해 아질간나트륨의 더 낮은 농도에서 증식이 억제되었다. KT9 분리주 및 CDC85주를 마우스 피하에 주사하고 마우스 체중 g당 $70{\;}\mu\textrm{g},{\;}100{\;}\mu\textrm{g}및{\;}130{\;}\mu\textrm{g}$의 아질산나트륨을 복강내로 주입하였을 때 농양크기가 약제를 넣지 않은 대조군에 비해 약간씩 감소하였으나 유의성은 없었다 질편모충에 아질산나트륨을 처리하고 전자현미경으로 관찰하였을때 약제를 넣지 않은 질편모충체 비해 공포(vacuole)수가 증가했으며. 자식 성공포(autophagic vacuole)의 출현,. 전자밀도가 낮은 부위 (electron-translucent zone)가 관찰되었으며 hydrogenosomal matrix의 변화와 세포막 및 핵막의 파괴가 관찰되었다. 이상의 결과로 아질산나트늄은 배양배지내에서 질편모충의 증식을 억제시키고 미세구조에 변화를 가져오나, 마우스 질편모충 감염에 의한 농양크기를 감소시키지는 못하있다.
With increasing environmental demands in surface treatment of steel sheets, the passivation layers containing hexavalent chromium $(Cr^{+6})$ are being replaced by non-chromium or trivalent chromium compounds. After review on the various types of inorganic compounds, the zirconates was chosen as the candidate for alternative to sodium dichromate in the aspect of its barrier properties with excellent adhesion to organics. The ammonium zirconium carbonate (AZC) and sodium hexafluorozirconate (SFZ) could be reach $70-80\%$ level of CDC (cathodic dichromate) treatment by their single applications. But high porosity in the AZC layer and poor electrical conductivity of SFZ solution limit the single application of zirconate. Mixed composition of zirconates to compensate their inferiorities or incorporation of organic compounds to seal the porosity seems to be inevitable to match up the target level of Cr-free passivation of tinplate.
두개의 검출기를 사용한 상호상관함수법으로 원자로의 잡음을 해석하여 TRIGA MARK-II 원자로의 동특성과 원자로의 안전을 위한 계수율 및 미임계시의 반응도를 측정하였다. 본 실험결과 원자로의 영출력과 전출력시의 임계상태에서 α값은 각각 46.67과 70.04로 얻어졌으며 안전봉낙하에 의한 임계미미상태에서는 79.47, 그리고 조정봉낙하에 의한 임계미만에서는 97.57로 얻어졌다. 이때 l*값은 β가 0.0075때에 107μsec와 160μsec로 나타났으며 Shut down margin의 미임계도는 안전봉낙하시에 -10.03×10-4이었고 조정봉낙하시에는 -29.43×10-4이었다. 본 실험에서는 CDC 3100/MSOS Digital 전자계산기, HITACH 505 Analog 전자계산기와 직접 제작한 Preamplifier, Bandpass filter, FM-Moulator, FM-Demodulator 등을 이용하여 계산 측정하였다.
In this study, in vitro maturation system using fetal bovine serum (FBS) or porcine follicular fluid (pFF) was investigated to produce comparable oocytes to those derived from in vivo. Control group of oocytes was cultured in TCM 199 supplemented with 0.1% polyvinyl alcohol (PVA). Other three groups of oocytes were cultured in TCM 199 supplemented with 10% FBS, 10% pFF or 5% FBS + 5% pFF, respectively. After 44 h maturation, oocytes with the first polar body were activated with two electric pulses (DC) of 1.2 kv/cm for 30 ${\mu}sec$. Also, matured oocytes of four groups were reconstructed and fused. Reconstructed embryos were cultured in PZM-3 under 5% $CO_2$ in air at $38.5^{\circ}C$ for 6 days. The oocytes matured in the medium supplemented with FBS or/and pFF showed significantly higher maturation rates (64.0 vs. 73.9 to 85.2%). In PA embryos, cleavage rates (89.7 vs. 77.1 to 86.6%) and blastocysts rates (30.0 vs. 16.2 to 26.2%) were significantly higher in pFF group (p<0.05). In NT embryos, there was no difference among treatments in cleavage rate, but the blastocyst rates (28.5 vs. 15.5 to 24.6%) were significantly higher in pFF group (p<0.05). The apoptosis rate was significantly higher (p<0.05) in the control than other groups (10.8 vs. 4.9 to 8.2% for PA, 3.1 vs. 0.5 to 1.3% for NT). In order to select the comparable oocyte to in vivo oocytes, each group of oocytes was stained with Brilliant cresyl blue (BCB) after 42h maturation. The matured oocytes were separated according to color of cytoplasm; stained group (BCB+) and unstained group (BCB-). The oocytes matured in the presence of FBS or/and pFF showed significantly higher staining rates (70.3 to 72.7 vs. 35.1%) (p<0.05). To verify the fact that the supplementation of FBS or/and pFF can increase the maturation rates, cdc2 kinase activity, the catalytic subunit of MPF, was determined. The cdc2 kinase activity of the oocytes matured in the medium supplemented with FBS or/and pFF was significantly higher than control group (6.7 to 9.3 vs. 3.8). In conclusion, the supplementation of FBS or/and pFF can support in vitro maturation rate of porcine oocytes through the increment of cdc2 kinase activity level in the cytoplasm.
본 연구에서는 토양균이 생성하는 2차 대사산물로부터 세포증식 촉진인자 (Maturation Promoting Factor. MPF)인 cdc2/cdk2-cyclin의 복합체를 특이적으로 억제하는 물질을 분리하고 그 물질의 생리활성을 조사하였다. 토양으로부터 순수분리된 300여개의 토양균에서 생성된 배양액을 취하여 MPF의 특이적인 기질인 합성 peptide (CSH103 :HATPPKKKRK)를 사용하여 인산화 활성을 측정하였다. 그중 MPF 활성 억제능이 90% 이상인 19개의 균주를 1차적으로 선정한 후 각각에 대하여 열/pH에 대한 안정성, 각종 용매에 대한 추출성 등 이화학적 성질을 규명하였으며 이중 균주 LPL 931로부터 MPF 활성 억제제를 분리하고자 하였다. 예비실험의 결과로부터 토양균 LPL 931을 대량배양하여 열처리하고, 비이온성 수지인Amberlite XAD-2에 결합시키고 70% acetone으로 용출시켰다. 이 추출물로부터 ethylacetate와 n-butanol을 사용하여 MPF 억제 활성물질을 추출하였다. 이 추출액을 실리카겔 관 크로마토그래피, 분취 TLC, 분취 HPL를 하여 MPF 활성 억제 분획을 분리하였다.
Misra, Swati;Lairson, David R.;Chan, Wenyaw;Chang, Yu-Chia;Bartholomew, L. Kay;Greisinger, Anthony;Mcqueen, Amy;Vernon, Sally W.
Journal of Preventive Medicine and Public Health
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제44권3호
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pp.101-110
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2011
Objectives: Screening for colorectal cancer is considered cost effective, but is underutilized in the U.S. Information on the efficiency of "tailored interventions" to promote colorectal cancer screening in primary care settings is limited. The paper reports the results of a cost effectiveness analysis that compared a survey-only control group to a Centers for Disease Control (CDC) web-based intervention (screen for life) and to a tailored interactive computer-based intervention. Methods: A randomized controlled trial of people 50 and over, was conducted to test the interventions. The sample was 1224 partcipants 50-70 years of age, recruited from Kelsey-Seybold Clinic, a large multi-specialty clinic in Houston, Texas. Screening status was obtained by medical chart review after a 12-month follow-up period. An "intention to treat" analysis and micro costing from the patient and provider perspectives were used to estimate the costs and effects. Analysis of statistical uncertainty was conducted using nonparametric bootstrapping. Results: The estimated cost of implementing the web-based intervention was $40 per person and the cost of the tailored intervention was $45 per person. The additional cost per person screened for the web-based intervention compared to no intervention was $2602 and the tailored intervention was no more effective than the web-based strategy. Conclusions: The tailored intervention was less cost-effective than the web-based intervention for colorectal cancer screening promotion. The web-based intervention was less cost-effective than previous studies of in-reach colorectal cancer screening promotion. Researchers need to continue developing and evaluating the effectiveness and costeffectiveness of interventions to increase colorectal cancer screening.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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