Although there are many reports on the splenic (systemic) T cell response after Toxoptasma gondii infection, little information is available regarding the local T cell responses of peritoneal exudate cells (PEC) and gut intraepithelial Iymphocytes (IEL) following peroral infection with bradyzoites. Mice were infected with 40 cysts of the 76K strain of T. gondii, and then sacrificed at days 0, 1, 4, 7 and 10 postinfection (PI). The cellular composition and T cell responses of PEC and IEL were analyzed. The total number of PEC and IEL per mouse increased after infection, but the ratio of increase was higher in IEL. Lymphocytes were the major component of both PEC and IEL. The relative percentages of PEC macrophages and neutrophils/eosinophils increased signiflcantly at day 1 and 4 PI, whereas those of IEL did not change significantly. The percentage of PEC NK1.1 and ${\gamma\delta}T$ cells peaked at day 4 PI (p < 0.0001), and CD4 and $CD8{\alpha}T$ cells increased continuously after infection. The percentages of IEL $CD8{\alpha}$ and ${\gamma\delta}T$ cells decreased slightly at first, and then increased. CD4 and NK1.1 T cells of IEL did not change significantly after infection. $IFN-{\gamma}-producing$ PEC NK1.1 T cells increased significantly from day 1 PI, but the other T cell subsets produced $IFN-{\gamma}$ abundantly thereafter. The proportion of IEL $IFN-{\gamma}-producing$$CD8{\alpha}$ and ${\gamma\delta}T$ cells increased significantly after infection, while IEL NK1.1 T cells had similar $IFN-{\gamma}$ production patterns. Taken together, CD4 T cells were the major phenotype and the important $IFN-{\gamma}$ producing T cell subsets in PEC after oral infection with T. gondii whereas $CD8{\alpha}T$ cells had these roles in IEL. These results suggest that PEC and IEL comprise different cell differentials and T cell responses, and according to infection route these factors may contribute to the different cellular immune responses.
Kim, Ji-Eun;Seol, Hee-Yun;Cho, Woo-Hyun;Kim, Ki-Uk;Jeon, Doo-Soo;Park, Hye-Kyung;Kim, Yun-Seong;Lee, Min-Ki;Park, Soon-Kew
Tuberculosis and Respiratory Diseases
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v.68
no.4
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pp.218-225
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2010
Background: Bronchoalveolar lavage (BAL) is a useful technique to recover lower airway fluid and cells involved in many respiratory diseases. Miliary tuberculosis is potentially lethal, but the clinical manifestations are nonspecific and typical radiologic findings may not be seen until late in the course of disease. In addition, invasive procedures are often needed to confirm disease diagnosis. This study analyzed the cells and the T-lymphocyte subset in BAL fluid from patients with miliary tuberculosis to determine specific characteristics of BAL fluid that may help in the diagnosis of miliary tuberculosis, using a less invasive procedure. Methods: On a retrospective basis, we enrolled 20 miliary tuberculosis patients; 12 patients were male and the mean patient age was $40.5{\pm}16.2$ years. We analyzed differential cell counts of BAL fluid and the T-lymphocyte subset of BAL fluid. Results: Total cells and lymphocytes were increased in number in the BAL fluid. The percentage of CD4+ Tlymphocytes and the CD4/CD8 ratio in BAL fluid were significantly decreased and the percentage of CD8+ T-lymphocytes was relatively higher. These findings were more prominent in patients infected with the human immunodeficiency virus (HIV). In the HIV-infected patients, the proportion of lymphocytes was significantly higher in BAL fluid than in peripheral blood. There were no significant differences between the BAL fluid and the peripheral blood T-lymphocytes subpopulation. Conclusion: BAL fluid in patients with miliary tuberculosis demonstrated lymphocytosis, a lower percentage of CD4+ T-lymphocytes, a higher percentage of CD8+ T-lymphocytes, and a decreased CD4/CD8 ratio. These findings were more significant in HIV-infected subjects.
Shin, Yong-Jae;Lenardo, Michael J;Park, Tae-Kyu;Lee, Kwang-Ho
The Journal of Korean Society of Virology
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v.29
no.1
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pp.33-38
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1999
Retroviral vector provide a highly efficient method for gene transfer into eukaryotic cells. This vector system can be divided into two components; the retroviral vector itself and the retroviral packaging cell line. The key improvement in the design of these two components are, focused on two aspects; the reduction of helper virus production and high titer-virus. We used PA317 for retrovirus packaging cell line, for its high producibility of viral titer. To test the ability of the vectors to generate high titer-virus, we have chosen four different retroviral vectors; LN, LNSX, LNCX and LXSN. To test easily the viral titer, we have made recombinant construction with CD4 and CD8, checked their viral titer and stained their surface expression. LXSN which contain SV40 early promoter in front of neo gene showed best results in viral transient transfection assay, dot blot assay and surface expression. In addition, recombinant containing CD8 generally showed much higher viral titration and surface expression than CD4.
The Artemisia capillaris THUNB is a perennial herb that belongs to the family Compositae spp and probably the most common plant among the various herbal folk remedies being used in the treatment of abdominal pain, hepatitis, chronic liver disease, jaundice and coughing in Korea. Recently the biological and pharmacological actions of herb have been studied well such as antibacterial, antidiabetic and antitumor activities. This experiment was conducted to investigate antitumor and immunomodulatory effects of Artemisia capillaris extracts against Hepa-1c1c7 and Sarcoma 180 cancer cells in in vivo experimental tests. In in vivo experimental tests using 210 ICR mice, based on flow cytometry, CD3+, CD4+, CD8+ and TNF-${\alpha}+$ splenocytes were significantly (p<0.05) reduced in the Hepa-1c1c7 and Sarcoma 180 inoculated vehicle controls, HP and SP, compared to those of the intact vehicle control on both the $28^{th}$ day and the $42^{nd}$ day, respectively. These decreases of CD3+, CD4+, CD8+ and TNF-${\alpha}+$ cells induced by tumor inoculations were significantly (p<0.05) inhibited by mACH treatment regardless of the type of experiments and tumor cells inoculated. The results suggest that Artemisia capillaris methanol extracts have prominent antitumor effects on the cancer cell lines Hepa-1c1c7 and Sarcoma 180.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.40
no.9
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pp.1227-1234
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2011
We investigated the immunostimulatory effects of doenjang, a famous Korean traditional food made from fermented soybean paste, on the immunohistochemical reaction in the gastrointestinal (GI) tract and immune response in mice. Male C57BL/6N mice (6 weeks-old) were divided into 4 experimental diet treatment groups and a basal diet (control) group, and fed with different diets for 4 weeks. The immunoreactive density of $CD4^+/CD8^+$ lymphocytes were strongly stained in the jejunum and colon in Group III. The immunoreactivity of universal nitric oxide synthase (uNOS) was strongly stained in the myenteric plexus in the colon of all doenjang-fedgroups (I, II and III). The colonic immunoreactive density of protein kinase C-${\alpha}$ (PKC-${\alpha}$) was strongly increased in Groups II and III, while that of stem-cell factor (c-kit) was increased in colonic mucosa of all doenjang-fedgroups (I, II and III) and especially increased in the colonic muscle layer of Group III. These morphological and immunological results indicated that the intake of doenjang could improve the mucosal immune reaction, gastrointestinal motility, blood circulation in the GI tract, and the immuneactivity of the body. These results provide experimental evidence about the health benefits of doenjang.
Lung-resident memory T cells (TRM) play an essential role in protecting against pulmonary virus infection. Parenteral administration of DNA vaccine is generally not sufficient to induce lung CD8 TRM cells. This study investigates whether intramuscularly administered DNA vaccine expressing the nucleoprotein (NP) induces lung TRM cells and protects against the influenza B virus. The results show that DNA vaccination poorly generates lung TRM cells and massive secondary effector CD8 T cells entering the lungs after challenge infection do not offer sufficient protection. Nonetheless, intranasal administration of non-replicating adenovirus vector expressing no Ag following priming DNA vaccination deploys NP-specific CD8 TRM cells in the lungs, which subsequently offers complete protection. This novel 'prime and deploy' strategy could be a promising regimen for a universal influenza vaccine targeting the conserved NP Ag.
Objectives : The purpose of this study is to investigate the effect of Jeseupwiryeongtang-gagam(JWTG) on atopic dermatitis by in vivo experiment using NC/Nga atopic dermatitis mouse, which has histological and clinical similarities to the atopic dermatitis of human. Methods : To investigate the effect of JWTG on AD, we evaluated atopic dermatitis-like skin lesions by clinical skin index and analyzed immunological parameters in peripheral blood mononuclear cells(PBMCs), splenocytes, draining lymph node(DLN) and performed skin histology in ears and dorsal skin of atopic dermatitis-like skin NC/Nga mouse in vivo. Results and Conclusions : In vivo, clinical skin severity score were significantly lower in JWTG group than control group. IgE, IL-6, $TNF-{\alpha}$, IgM, IgG2a and IgG2b levels in serum were decreased remarkably in JWTG group than control group and $IFN-{\gamma}$ production, secreted in Th1 cell were increased by JWTG. After experiment ended, we analyzed immunological cells ($CD3^+$, $CD19^+$, $CD4^+$, $CD8^+$, $CD3^+$$CD69^+$, $CD4^+$$CD25^+$ and $CD49b^+$) by flow cytometry. It resulted that total absolute number of $CD3^+$, $CD19^+$, $CD4^+$ and $CD8^+$ cells were recovered as normal and $CD3^+$$CD69^+$ were decreased significantly compared with control group in isolated DLN and PBMCs from NC/Nga mouse and total absolute number of $Gr-1^+$, $CD11b^+$ and $CD3^+$ in dorsal skin of NC/Nga mouse were decreased by JWTG. We analyzed ear, DLN, and neck-back skin after biopsy and dyeing by hematoxyline/eosin(H&E) and toluidine staining (mast cells marker) and obtained results that JWTG were effective to histological symptoms (dermal and epidermal thickening, hyperkeratosis and inflammatory cell infiltration). Ear thickness was decreased significantly than the control group and the size of inflammatory lymphocytes cells(ILC) and plasma cells(PC) in DLN were also decreased.
Background: Interleukin-12 (IL-12) can induce antitumor effects in vivo. This antitumor effect is associated with T cell infiltration but the effect of IL-12 on the steps of T cell migration into the tumor tissue has not been fully elucidated. This study focused on the effect of IL-12 on the tumor growth and the metastasis and on the expression of E-selectin, an adhesion molecule which is activated endothelial specific in its expression. In addition, we studied whether the expression of E-selectin is associated with the TNF-$\alpha$, a cytokine that its production is increased by IL-12 and has functions inducing a variety of adhesion molecules. Methods: Mice of C57BL/6 strain were injected with Lewis lung cancer cells followed by either IL-12, TNF-$\alpha$, or normal saline by intraperitoneal route. Twenty eight days after tumor cell inoculation, metastatic nodules of lung were enumerated and immunohistochemical staining of the subcutaneous tumors were performed with monoclonal antibodies to CD4, CD8, CD16, and E-selectin. In IL-12 treated mice, the subcutaneously implanted Lewis lung tumors were decreased in size and the metastases were also decreased in number compared to control mice. On tumor tissues, increased infiltration of CD4+, CD8+, and CD16+ cells were oberved in IL-12 treated mice compared to control mice. In control mice, E-selectin was absent on tumor vessels, but the expression of E-selectin was increased on tumor vessels of IL-12 treated mice. Administration of TNF-$\alpha$ increased not only the expression of E-selectin but also infiltrations of CD4+, CD8+, and CD16+ cells on tumor tissues. Conclusions: These results demonstrate that IL-12 inhibits tumor growth and metastases through infiltrations of inflammatory cells in mouse model of Lewis lung carcinoma and E-selectin may playa role in inflammatory cell recruitment on tumor tissue following IL-12 administration. Also, TNF-$\alpha$ may have a role as a mediator responsible for the IL-12 induced expression of E-selectin.
Objectives The purpose of this study is to investigate the effect of KKHS on atopic dermatitis in an in-vivo experiment using an NC/Nga atopic dermatitis mouse, which has histological and clinical similarities to this condition in humans. Methods To investigate the effect of KKHS on atopic dermatitis (AD), we evaluated atopic dermatitis-like skin lesions by clinical skin index and analyzed immunological parameters in peripheral blood mononuclear cells(PBMCs), splenocytes, draining lymph node(DLN) and performed skin histology in ears and dorsal skin of atopic dermatitis of NC/Nga mouse in vivo. Results In vivo, clinical skin severity score was significantly lower in the KKHS group than in the control group. IgE, IL-6, TNF-${\alpha}$, IgM, IgG2a and IgG2b levels in serum decreased remarkably in the KKHS group than in the control group, and the level of IFN-${\gamma}$ production which is secreted from Th1 cell was increased by KKHS. After this experiment we analyzed immunological cells ($CD3^+$, $CD19^+$, $CD4^+$, $CD8^+$, $CD3^+CD69^+$, $CD4^+CD25^+$ and $CD49b^+$) by flow cytometry. It results that the total absolute number of $CD3^+$, $CD19^+$, $CD4^+$ and $CD8^+$ cells were recovered as much as normal state, and the level of $CD3^+CD69^+$ in isolated DLN and PBMCs were significantly decreased, and total absolute number of $Gr-1^+$, $CD11b^+$ and $CD3^+$ in dorsal skin of NC/Nga mouse were decreased by KKHS. We analyzed ear, DLN, and neck-back skin after biopsy and dyeing by hematoxyline/eosin(H&E), toluidine staining (mast cells marker). KKHS were very effective to the histological symptoms which are in dermal and epidermal thickening, hyperkeratosis and inflammatory cell infiltration. Ear thickness was significantly decreased compared with the control group and the size of inflammatory lymphocytes cells (ILC) and plasma cells (PC) in DLN were also decreased. Conclusions KKHS on atopic dermatitis in an in-vivo experiment using an NC/Nga atopic dermatitis mouse was very effectiveness to the atopy dermatitis treatment.
Ha, Ji Hoon;Choi, Hyeong;Hong, In Ki;Han, Sang-Kuen;Bin, Bum Ho
Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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v.48
no.1
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pp.77-85
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2022
Retinaldehyde (RA), vitamin A derivative, is an intermediate between retinol and retinoic acid and has an excellent wrinkle improving effect. In this study, Drug-in-cyclodextrin-in-liposome (DCL) was used to enhance the stability and skin penetration of RA. The complex of RA and hydroxypropyl-beta-cyclodextrin (HP-β-CD) was prepared by the freeze-drying method, and the presence or absence of inclusion of retinal was confirmed by UV-Vis spectrometer, FT-IR and SEM images. RA was captured in HP-β-CD about 95.6% on 1 : 15 (w/w). The retinal-HP-β-CD complex was encapsulated in liposomes using a homomixer and microfluidizer, with an average particle size of 215 ± 4.2 nm and a zeta potential of -31.2 ± 0.5 mv. In the evaluation of the degradation stability of RA, degradation rate of RA-HP-β-CD-liposomes in water was 1.8% higher than RA-liposome (5.8%), RA-HP-β-CD complex (9.7%) and RA alone (37.6%). RA cream (0.05% RA) including RA-HP-β-CD-liposomes was prepared for clinical test with wrinkle-improving efficacy and skin dermis denseness evaluated for 2 or 4 weeks. RA cream showed a significant wrinkle improving effect without skin irritation. In conclusion, it was confirmed that the double stabilization technology using the DCL system contribu tes to the effect of improving skin wrinkles by increasing the stabilization of retinal.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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