Protoplasts isolated from inbred lines of Brassica oleracea L. var capitata (cabbage) and Brassica campestris L. ssp. pekinensis (Chinese cabbage) were fused by PEG-mediated method, and somatic hybrid cells were differentiated into plants. for the identification of somatic hybrid plants, ploidy level, plant morphology, and cytological analysis were performed. All of the regenerated plants derived from fused protoplasts were shown to be 2X-4X, or higher ploidy level, presumably due to somatic hybridization or chromosome doubling. The morphology of leaves, petioles, and flowers showed an intermediate phenotype between Chinese cabbage and cabbage. Chromosome numbers in these somatic hybrids ranged mostly from 33 to 38. According to Genomic in situ hybridization (GISH) pattern, signals from both fusion parents of B.campestris or B.oleracea were detected in different colors when chromosomes of putative somatic hybrids were observed.
To develop a selection system for regenerating plants from transformed tissues, effects of four antibiotics (kanamycin, hygromycin, carbenicillin, cefotaxime) and herbicide (phosphinotricin) on shoot regeneration from cotyledon and hypocotyl explants of Chinese cabbage (Brassica campestris L. ssp. pekinensis) were studied. For cotyledon, shoot induction was not significantly affected by kanamycin at $1mg{\cdot}L^{-1}$, but the number of shoots formed was significantly reduced at $2mg{\cdot}L^{-1}$, and no shoots were regenerated from any explants at $6mg{\cdot}L^{-1}$ or higher. Hypocotyl explants showed similar result as cotyledon. Kanamycin at $7mg{\cdot}L^{-1}$ may be adequate for selecting Chinese cabbage transformants. Hygromycin at $4mg{\cdot}L^{-1}$ or higher completely inhibited the growth and shoot regeneration of Chinese cabbage explants. Therefore, resistance gene to hygromycin may also be used as a selective marker for Chinese cabbage transformation. Carbenicillin and cefotaxime, the cephalosporin type of antibiotics, had little effect on shoot regeneration of Chinese cabbage explants. Since carbenicillin and cefotaxime have low toxicity to Chinese cabbage, they are suitable for use in tissue culture to eliminate Agrobacterium in transformation experiments after co-cultivation. Shoot regeneration from cotyledon and hypocotyl explants was significantly reduced in presence of $1mg{\cdot}L^{-1}$ phosphinotricin (PPT) and completely inhibited by $2mg{\cdot}L^{-1}$ or higher. PPT, same as antibiotics, may also be used to select transformed cells. Since Chinese cabbage is known to be recalcitrant to in vitro shoot regeneration compared to other Brassica species, even though lower levels of selectable markers result in more transformants but simultaneously allow more untransformed escapes to develop, lower levels of antibiotics and herbicides could be successfully used as a selectable marker to reduce selection pressure.
To investigate phytotoxic substances in Equisetum arvense, the aqueous extracts(25 and 8$0^{\circ}C$) or the freeze-drying matter from aqueous extracts($25^{\circ}C$) of E. arvense were tested at different concentrations for biological activities on callus induction and growth, seed germination, seedling growth and antibacterial function. Callus induction and growth of Oryza sativa and Brassica campestris ssp. pekinensis were inhibited by the aqueous extracts at 8$0^{\circ}C$ than at $25^{\circ}C$ and the higher concentrations. Callus growth of four receptor species was inhibited in order of Platycodon grandiflorum, Sesamum indicum, Brassica campestris ssp. pekinensis and Oryza sativa. Seed germination of Ο. sativa, S. indicum, and B. campestris ssp. pekinensis was not affected at low concentration, but it was proportionally inhibited by the higher concentrations. The greatest inhibition of seed germination was 28.3% compared to control, when 2,000$\mu\textrm{g}$/ml of freeze-drying matter was applied to B. campestris ssp. pekinensis. Shoot growth was stimulated by 500$\mu\textrm{g}$/ml of freeze-drying matter, but it was inhibited by the higher concentrations. Root growth was significantly inhibited compare to control at all concentrations. Antibacterial activity of freeze-drying matter didn't showed against Xantomonas oryzae and Eschrichia coli, but a small clear zone was formed by 500$\mu\textrm{g}$ of freeze-drying matter against Erwinia carotovora ssp. carotovora.
The study was carried out to develop a simple and efficient system to regenerate plants from cotyledon and hypocotyl tissues of Chinese cabbage (Brassica campestris L. ssp. pekinensis cv Seoul). Among the various combinations of naphthalene acetic acid (NAA) and 6-benzyladenine (BA) tested, the best shoot induction medium for cotyledon, with 2.67 shoots per explants, contained $2.0mg{\cdot}L^{-1}$ NAA, $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ BA and $16.7mg{\cdot}L^{-1}$$AgNO_3$. The shoot induction medium with $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ NAA, $5.0mg{\cdot}L^{-1}$ BA and $16.7mg{\cdot}L^{-1}$$AgNO_3$, was best for shoot induction from hypocotyl explants, with 1.87 shoots per explants. After shoot induction, regenerated shoots were excised and rooted on rooting medium. Rooted plantlets were then hardened in the high humidity growth chamber and transplanted to pots, and then grown in the greenhouse. Regenerated plants appeared phenotypically normal and there were no changes in chromosome number.
This study was conducted to evaluate the effect of phosphorus acid (H3PO3) addition to the horticultural bed soil on the initial growth of red pepper (Capsicum annuum L. cv.), cucumber (Cucumis sativus L. cv.), and kimchi cabbage (Brassica campestris L. ssp. pekinensis (Lour.) Rupr. cv.). The stem heights of red pepper and cucumber were 46.1% and 23.0% greater in the 50 mg/L of phosphorus acid treatment than the untreated (control). Further, the stem diameter of pepper and cucumber were 48.7% and 23.0% greater in the 50 mg/L of phosphorus acid treatment than the control. In addition, the number of kimchi cabbage leaves was 47.5% greater in the 50 mg/L of phosphorus acid treatment than the control. The dry weights of red pepper, cucumber and kimchi cabbage were 72.9%, 16.5%, and 30.4% heavier in the 50 mg/L than the control, respectively. Cations (K, Ca, and Mg) and total phosphorus (T - P) were quantitatively analyzed for these three horticultural crops. The concentrations of K, Ca, and Mg, and T - P were higher in the 50 mg/L of phosphorus acid than the control, respectively. Based on the results obtained in this study, it appears that treatment of phosphorus acid in horticultural bed soil enhanced the growth of red pepper, cucumber and Kimchi cabbage.
Phenylalanine ammonia-lyase (PAL; EC 4.3.1.5), the first enzyme in the phenylpropanoid biosynthesis, catalyzes the elimination reaction of ammonium ion from L-phenylalanine. PAL was purified from the cytosolic fraction of Chinese cabbage (Brassica campestris ssp. napus var. pekinensis) through ammonium sulfate fractionation, DEAE-cellulose chromatography, Sephadex G-200 chromatography, and Q-Sepharose chromatography. It consists of four identical subunits, the molecular mass of which was estimated to be about 38,000 daltons on SDS-PAGE. The optimal pH and temperature of the purified enzyme are 8~9 and $45^{\circ}C$, respectively. Its activity is greatly inhibited by $Zn^{2+}$ ion, and strongly activated by caffeic acid. The purified PAL has some different characteristics compared to those obtained with other PALs.
Thioltransferase, also known as glutaredoxin, was previously purified and characterized from Chinese cabbage (Brassica campestris ssp. napus var. pekinensis). However, in the process of gel filtration on Sephadex G-75, there were two activity peaks. In this study, a second thioltransferase (TTase CC-2) in the minor peak of the Sephadex G-75 elution profile was further purified using affinity chromatography on an S-hexylglutathione-agarose column by eluting with buffer solution containing 2.5 mM S-hexylglutathione. It showed a single band on SDS-PAGE indicating that TTase CC-2 is electrophoretically homogeneous. The molecular weight of TTase CC-2 was estimated to be about 22,000 daltons, and its isoelectric point was determined to be 6.73. Its size appears to be atypical and much larger than that of the first thioltransferase (TTase CC-1) from Chinese cabbage, and it can utilize 2-hydroxyethyl disulfide, S-sulfocysteine, and insulin as substrates. S-sulfocysteine was found to be a superior substrate for TTase CC-2. TTase CC-2 also displayed the reducing activity for non-disulfides such as dehydroascorbic acid. Its optimum pH was 8.5, which was consistent with that of TTase CC-1. TTase CC-2 activity was greatly activated by L-cysteine and reduced glutathione, and was found to be less heat-stable compared with TTase CC-1. Molecular and physiological differences between TTase CC-1 and TTase CC-2 remain to be elucidated. Chinese cabbage is the first plant which is known to contain two kinds of thioltransferases.
To improve regeneration efficiency of Brassica campestris ssp. pekinensis (chinese cabbage) in vitro, the effect of ehtylene inhibitors [AgNO$_3$ and silver thiosulfate (STS)] and optimal age of explantse were investigated. On the effect of ethylene inhibitors either 100 $\mu$M of AgNO$_3$ or 5 $\mu$M of STS enhanced shoot regeneration from cotyledons when it was added in basal shoot induction media(MS salts, B5 vitamine, sucrose 2%, BA 2.0mg/L, NAA 1.0mg/L). But at higher concentrations, AgNO$_3$ induced abnormal shoots, and STS greatly reduced regeneration frequency. On the other hand, the maximum regeneration rate was obtained from the cotyledons taken from 3-day old seedlings. However there was no distinctive effect among the containers used for cultivation. The most optimal condition of root induction was a minimal Murashige and Skoog media containing 0.1 mg/L NAA. In order to induce bolting and flowering from in vitro regenerated chinese cabbage, the plant were healed at 4$^{\circ}C$ for weeks in a cold chamber. When they were planted in pots, the plane produced phenotipically normal flowers and seeds. The overall results suggest that ethylene inhibitors promote regeneration of shoot from cotyledons of chinese cabbage without alleviating fertility.
Korean cabbage, a member of the Brassicaceae family which also includes cauliflower, mustard, radish, and turnip plants, is a crucial leafy vegetable crop. Korean cabbage is harvested after completion of the leaf heading process and is often prepared for use in "baechu kimchi", a traditional Korean food. Many of the components in Korean cabbage are essential for proper human nutrition; these components can be divided into two groups: primary metabolites, which include carbohydrates, amino acids, fatty acids, and organic acids, and secondary metabolites such as flavonoids, carotenoids, sterols, phenolic acids, alkaloids, and glucosinolates (GSLs). Using gas chromatography-mass spectrometry, this study examined the variety of volatile compounds (including isothiocyanates) contained in Korean cabbage and its seed, which resulted in the identification of 16 and 12 volatile compounds, respectively. The primary volatile compound found in the cabbage was ethyl linoleolate (~23%), while 4,5-epithiovaleronitrile (~46%) was the primary volatile component in the seed.
This study was carried out to investigate the level of total glucosinolates in different parts (outer and inner part) of fresh, salted Chinese cabbage ($Brassica$$campestris$ L. ssp. $Pekinensis$) and Kimchi at different harvesting periods (June-July, August-September, October-November, December-April, and May). For determination of total glucosinolates, Chinese cabbage was used for analytical sample preparation, provided with an anion exchanges column and measured by UV-visible Spectrophotometer. The fresh Chinese cabbage (FCC) that was harvested in June-July contained the highest level of total glucosinolates and was higher in outer part than inner part in all harvesting periods. The salted Chinese cabbage (SCC) that was harvested in May contained the lowest level of total glucosinolates. Total glucosinolates level of SCC in outer part was higher in June-July and August-September. The manufactured Kimchi (K) using harvested Chinese cabbage in June-July and August-September contained the highest level of total glucosinolates while that harvested in May contained the lowest level. The level of total glucosinolates in different parts was higher in inner part than outer part in all harvesting periods except for May. In all harvesting times, the level of total glucosinolates of FCC was higher than processed Chinese cabbage (SCC and K). Based on these results, levels of total glucosinolates are influenced by harvesting periods, parts and processing conditions of Chinese cabbage.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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