A variety of important roles for branched-chain amino acids in metabolic regulation has been suggested. Branched-chain $\alpha$-keto acid dehydrogenase(BCKAD) complex is a rate limiting enzyme in branched-chain amino acid metabolism. The purpose of this study was to examine the effects of exercise on the activity and activity state of branched-chain $\alpha$-keto acid dehydrogenase in rat hert and liver thssues. Forty-eight Sprague-Dawley rats were assigned into three experimental groups : sedentary control, exercised, or exercised-rested. Submaximal exercise(running) for two hours significantly increased basal activity without a change in total activity in both tissues, with a concomitiant increase in activity state of the enzyme complex. At 10 min post-exercise, heart enzyme activity significantly decreased, though not to the control level, while liver enzyme activity remained unchanged. These data suggested that the exercise-induced increase in branched-chain $\alpha$-keto acid decarboxylation in rat tissues may not be the result of enzyme synthesis, but rather is due to increased activity of the BCKAD.
The amino acids found in plants play important roles in protein biosynthesis, signaling processes, and stress responses, and as components in other biosynthesis pathways. Amino acid degradation helps maintain plant cells' energy states under certain carbon starvation conditions. Branched-chain amino acid transferases (BCATs) play an essential role in the metabolism of branched-chain amino acids (BCAAs) such as isoleucine, leucine and valine. In this paper, we performed genome-wide RNA-seq analysis using CsBCAT7-overexpressing Arabidopsis plants. We observed significant changes in genes related to flowering time and genes that are germination-responsive in transgenic plants. RNA-seq and RT-qPCR analyses revealed that the expression levels of some BCAA catabolic genes were upregulated in these same transgenic plants, and that this correlated with a delay in their senescence phenotype when the plants were placed in extended darkness conditions. These results suggest a connection between BCAT and the genes implicated in BCAA catabolism.
The distribution and Properties of branched chain amino acid aminotransferase (EC 2.6. 1.42) was investigated in adult Fasciola hepatica. Fascicla hepatica was fractionated by differential centrifugation into nuclear, mitochondrial and cytosolic fractions. The activity of branched chain amino acid aminotransferase was measured by the method of Ichihara and Koyama (1966) . Isozyme patterns of this enzyule was also examined by DEAE-cellulose column chromatography. The results obtained were as follows; 1. The activity in homogenate was found to be 12.69 units/g wet tissue. The activity of this enzyme was relatively high compared with those in rat tissues. 2. The distribution of branched chain amino acid aminotransferase in the subcellular organelles showed that 87.8% of the activity was in cytosolic, 10.9% in mitochondrial and 1.3% was in nuclear fraction. 3. Cytosolic fraction of Fasciola hepatica contained Enzyme I, but not Enzyme II and III, of branched chain amino acid aminotransferase. Ensyme I was eluted by 50mM phosphate buffier from DEAE-cellulose column and catalyzed the transamination of all three branched chain amino acids. 4. The Enzyme I was purified about 22-folds increase in specific activity after chromatography on DEAE-cellulose. 5. The best substrate among three amino acids (leucine, isoleucine and valise) was L-isoleucine. 6. The optimal temperature of Enzyme I was $45^{\circ}C$ and the optimal pH was 8.2. 7. The Km value for leucine of Enzyme I was 4.17 mM. 8. The Km values for a-ketoglutarate and pyridoxal phosphate of Enzyme I were 0.41mM and $4.76{\times}10^{-3}{\;}mM$, respectively.
Sohn Ho- Yong;Kum Eun-Joo;Kwon Gi-Seok;Jin Ingnyol;Kuriyama Hiroshi
Journal of Microbiology
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제43권4호
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pp.375-380
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2005
Autonomous ultradian metabolic oscillation (T$\simeq$50 min) was detected in an aerobic chemostat culture of Saccharomyces cerevisiae. A pulse injection of GSH (a reduced form of glutathione) into the culture induced a perturbation in metabolic oscillation, with respiratory inhibition caused by $H_2S$ burst pro-duction. As the production of $H_2S$ in the culture was controlled by different amino acids, we attempted to characterize the effects of GSH on amino acid metabolism, particularly with regard to branched chain and sulfur-containing amino acids. During stable metabolic oscillation, concentrations of intra-cellular glutamate, aspartate, threonine, valine, leucine, isoleucine, and cysteine were observed to oscil-late with the same periods of dissolved $O_2$ oscillation, although the oscillation amplitudes and maximal phases were shown to differ. The methionine concentration was stably maintained at 0.05 mM. When GSH (100 $\mu$M) was injected into the culture, cellular levels of branched chain amino acids increased dramatically with continuous $H_2S$production, whereas the cysteine and methionine concentrations were noticeably reduced. These results indicate that GSH-dependent perturbation occurs as the result of the promotion of branched chain amino acid synthesis and an attenuation of cysteine and methionine synthesis, both of which activate the generation of $H_2S$. In a low sulfate medium containing 2.5 mM sulfate, the GSH injections did not result in perturbations of dissolved $O_2$ NAD(P)H redox oscillations without burst $H_2S$ production. This suggests that GSH-dependent perturbation is intimately linked with the metabolism of branched-chain amino acids and $H_2S$ generation, rather than with direct GSH-GSSG redox control.
The optimum conditions of Cordyceps militaris mycelial growth, purification and characteristics of branched-chain amino acid aminotransferase [BCAT(EC 2.6.1.42)] in this mycelium were studied. Optimum pH, temperature and medium of culture of mycelia were 5.5, $22.5^{\circ}C$ and Hamada medium (HM), respectively. BCAT in homogenate of this mycelia was precipitated by 20-40% saturated solution of ammonium sulfate and then purified by DEAE (diethylaminoethyl)-Sephadex A-50 column chromatography with linear concentration gradient and Sephadex G-200 gel filtration. A single band of purified enzyme was detected on SDS-PAGE (sodium dodecylsulfate-polyacrylamide gel electrophoresis). Optimum pH and temperature of BCAT were found to be 7.8 and $29^{\circ}C$, respectively. It showed activity toward L-leucine, L-isoleucine and L-valine as a substrate. The Km values of this enzyme for L-leucine were determined to be 5.88 mM for L-leucine.
Maple syrup urine disease or branched chain ketoacidurias caused by a deficiency in activity of the branched-chain ${\alpha}$-keto acid dehydrogenase(BCKD) complex. This metabolic block results in the accumulation of the branched-chain amino acids(BCAAs) leucine, isoleucine and valine, and the corresponding branched chain ${\alpha}$-keto acids (BCKAs). Based on the clinical presentation and biochemical responses to thiamine administration, MSUD patients can be divided into five phenotypes : classic, intermediate, intermittent, thiamine responsive and dihydrolipoyl dehydrogenase(E3)-deficient. Classic MSUD has a neonatal onset of encephalopathy, and is the most severe ad most common form. Variant forms of MSUD generally have the initial symptoms by 2 years of age. The majority of untreated classic patients die within the early months of life from recurrent metabolic crisis and neurologic deterioration. Treatment involves both longterm dietary management and aggressive intervention during acute metabolic decompensation. We report here our experience of longterm diet therapy and treatment of acute metabolic decompensation of a case of classic MSUD.
Xu, Ye Tong;Ma, Xiao Kang;Wang, Chun Lin;Yuan, Ming Feng;Piao, Xiang Shu
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제31권1호
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pp.106-115
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2018
Objective: The goal of this study was to investigate the effects of dietary standard ileal digestible (SID) valine:lysine ratios on performance, intestinal morphology, amino acids of liver and muscle, plasma indices and mRNA expression of branched-chain amino acid (BCAA) metabolism enzymes. Methods: A total of 144 crossbred pigs (Duroc${\times}$Landrace${\times}$Large White) weaned at $28{\pm}4days$ of age ($8.79{\pm}0.02kg$ body weight) were randomly allotted to 1 of 4 diets formulated to provide SID valine:lysine ratios of 50%, 60%, 70%, or 80%. Each diet was fed to 6 pens of pigs with 6 pigs per pen (3 gilts and 3 barrows) for 28 days. Results: Average daily gain increased quadratically (p<0.05), the villous height of the duodenum, jejunum and ileum increased linearly (p<0.05) as the SID valine:lysine ratio increased. The concentrations of plasma ${\alpha}-keto$ isovaleric and valine increased linearly (p<0.05), plasma aspartate, asparagine and cysteine decreased (p<0.05) as the SID valine:lysine ratio increased. An increase in SID lysine:valine levels increased mRNA expression levels of mitochondrial BCAA transaminase and branched-chain ${\alpha}-keto$ acid dehydrogenase in the longissimus dorsi muscle (p<0.05). Conclusion: Using a quadratic model, a SID valine:lysine ratio of 68% was shown to maximize the growth of weaned pigs which is slightly higher than the level recommended by the National Research Council.
Changes in free amino acid concentrations is blood and various tissues were evaluated in cats adapted to the low-protein diet(20% protein, LPD) or the high-protein diet(60% protein, HPD) for 5 weeks. Cumulative body weigth gain for the 5 week period was 463$\pm$43g, and -128$\pm$40g for cats fed HPD and LPD, respectively. Feeding HPD significantly increased the size of liver and kidney. Cats adapted to HPD for 5 weeks have significantly elevated plasma concrntrations of essential amino acids (branched-chain amino acides, threonine, trytophan, phenylalanine and methoionine), whereas plasma levels of non-essential amino acids(alanine, asparagine, glycine, glutamine and serine) were significantly reduced in animals adapted to HPD(p<0.01, or p<0.001) compared to the values for the cats fed LPD. Changes in free amino acid concentratioks in whole blood induced by the variations in dietary level of protein closely reflect the pattern seen in plasma. Amino acids such as branched-chain amino acids, proline and threonine were most difficult to maintain homeostasis and consistantly elevated in lever, kidney, skeletal muscle and brain, as well as in blood of cats adapted to HPD(p<0.01 or p<0.001). All of the free amino acids in jejunum, excluding taurine and ornithine, were significantly elevated in animals adapted to HPD, most probably due to the rapid absorption of large amount of amino acids across the epithelium of small intestine.
2-Methylbutanoic, 3-methylbutanoic, 4-methylpentanoic, 2-ethylhexanoic, 4-methylhexanoic, 4-methyloctanoic, 6-methyloctanoic, 4-ethylhexanoic. 4-methylhexanoic 및 2-ethylhexanoic acids를 포함하는 다수의 volatile branched-chain fatty acids(VBCFAs)가 쇠고기, 돼지고기, 염소고기(미국산 흰염소고기, 한국산 흑염소고기), 양고기로부터 분리, 동정되었다. 쇠고기 향은 amino acid, carbohydrate, 그리고 lipid의 반응에 의해 생성된 향기성분에 의해 이루어지는 기본 meaty flavor로 결정되어 지는 반면, 염소고기가 양고기의 경우는 쇠고기의 기본향에 4-ethyloctanoic acid와 4-methyloctanoic acid의 독특한 노린내가 더해지므로 염소고기나 양고기 특유의 향을 내었다. 돼지고기는 3-methylbutanoic acid 함량이 다른 세종류에 비해 높고 3-methylbutanoic acid 특유의 꼬린냄새는 돼지고기의 기름층으로부터 나는 unclean flavor 에 중요한 영향을 미치는 것으로 생각된다. 염소고기는 C5-C7 chain length의 volatile branched 및 n-chain fatty acids를 적게 함유하고 있는 반면 4-ethyloctanoc acid는 염소고기의 노린내를 내는 결정적인 화합물이었다. 4-Methyloctanoic acid는 양고기의 sweaty-muttony flavor를 내는 중요한 화합물이었으며 염소고기와는 달리 C5, C6, 그리고 C7 branched-chain fatty acids 도 상당량 함유되어 있었다. 한국산 흑염소고기와 미국산 흰염소고기 중에 들어있는 VBCFAs의 종류는 같으나, 한국산 흑염소고기가 미국산 흰염소고기 보다 노린내가 강하며 4-ethyloctanoic 의 함량도 높았다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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