Surface membrane proteins of virulent RH strain and tissue cyst-forming Fukaya strain of Toxoplasma gondii were analysed by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis after LPO-catalyzed surface iodination and lectin blotting, then identified the zoite-specific antigens. Prior to the analyses, purification of RH tachyzoites from mouse peritoneal exudate and of Fukaya bradyzoites from mouse brain tissues were performed by centrifugation - on the discontinuous Percoll density-gradient. Ta- chysoites were obtained at the interface of 50U and 60% Percoll solution and brain cysts were harvested at the interfaces of 40-50% and 50-60%, then bradyzoites were obtained by treating the cysts with hypertonic solution. The LPO-catalyzed iodination detected 15 KDa and 14 KDa proteins o( brady- zoites and 30 KDa protein of tachysoites as major bands with several other minor bands. But Con A blotting revealed some bands of 200 K∼50 KDa glycoproteins of bradyzoites and 52 KDa band as major and minor bands of 33 K∼20 KDa of tachyzoites. Phytohemagglutinin did not detect any band in the two forms. EITB with anti- Fukaya antibody and anti-RH antibody revealed cross-reactivities between the two forms. Despite the cross-reactivity, anti-Fukaya antibody reacted with 15 KDa band of bradyzoites specifically and, anti-RH antibody with 52 KDa, 30 KDa, and 25 KDa bands of tachyzoites, respectively. It was identified that 15 KDa protein in bradyzoite, which was not a glycoprotein, was a major membrane protein with sufficient antigenicity, and in the case of tacky- zoite, 52 KDa surface glycoprotein (gp52) with specific antigenicity might be added to the major surface protein, p30.
Kim, Bang-Oul;Kim, Kyoung-Sun;Jeon, Hong-Yeol;Kang, Hwa-Jeong;Kim, Jeong-Sang;Hong, Seok;Kim, Yong-Jin
The Journal of Internal Korean Medicine
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v.23
no.2
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pp.191-201
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2002
Objectives : This study was designed to investigate the effects of Yukmijihwang-tang on contusion of the mice induced with medicine. Methods : I observed the effects of light and electron microscopes. and examined hematological changes and VEGF-immunohistochemistry. Results : Hematology: Leukocytes were increased significantly in a control group of mice compared with the experimental group. Light microscope : A few neurons were condensed in the 7-day experimental group, but condensed remarkedly in the 3-day control group. Most glial cells were observed in the 3-day experimental group. Edema and dilatation of vessels occurred significantly in the 3-day control group, and these results occurred weakly in the 7-day experimental group. VEGF-immunohistochemistry : VEGF-immunohistochemical reactivity for the glial cells was the highest in the 3-day experimental group, and immunoreactivity for the vessels and neurons highly increased in the 7-day experimental group. Electron microscope : In the 3-day control group, protoplasmic astrocytes concerned with angiogenesis contained weakly developed rough endoplasmic reticulum. and a few of glial filaments were observed. In the 7-day experimental group, the bundles of glial filaments were found in the cytoplasmic process of astrocytes. Conclusion : medication using Yukmijihwang-tang of mice contused by medical stress is highly effective in inflamatory response, curing cell damage and angiogenesis.
To build autonomous agents who can make a decision on behalf of humans in time-critical complex environments, the formulation of operational knowledge base could be essential. This paper proposes the methodology of how to formulate the knowledge base and evaluates it in a practical application domain. We analyze threat data received from the multiple sensors of Aircraft Survivability Equipment(ASE) for Korean helicopters, and integrate the threat data into the inductive model through compilation technique which extracts features of the threat data and relations among them. The compiled protocols of state-action rules can be implemented as the brain of the ASE. They can reduce the amounts of reasoning, and endow the autonomous agents with reactivity and flexibility. We report experimental results that demonstrate the distinctive and predictive patterns of threats in simulated battlefield settings, and show the potential of compilation methods for the successful detection of threat systems.
Skin metastasis from papillary thyroid carcinoma is extremely rare. Due to similar histopathologic features, it is difficult to differentiate skin metastatic papillary thyroid carcinoma and some primary skin neoplasms without a clinical history. However, most of metastatic skin lesions showed a strong reactivity to the antithyroglobulin antibodies unlike primary skin neoplasms. Metastatic skin lesions must be completely removed and radiotherapy can be added. Investigators reported that prognosis of skin metastases from thyroid carcinoma is dismal and the average survival after it's diagnosis was only 19 months because distant metastases were often discovered at diagnosis of skin metastasis or during follow-up period. We report a case of skin metastasis from tall cell variant of papillary thyroid carcinoma. In our case, the anti thyroglobulin antibodies measured from cystic fluid from a skin lesion was more than 2000 IU/ml. Skin metastasis was diagnosed at 20 months after primary surgery for thyroid cancer and brain metastasis at 12 months after diagnosis of skin metastasis. Although skin metastasis is an ominous prognostic indicator in patients with thyroid carcinoma, a radical treatment for skin lesions and early diagnosis of distant metastasis could provide a chance to the patients to improve their survival.
Leptin gene, an obesity gene, has been known to involve in the regulation of food intake and body weight. It is also thought to be related to the glucose metabolism, insulin secretion and type II diabetes mellitus. Recently, the production of recombinant leptin protein has been attempted for the application in the treatment of obesity and the correction of hereditary obesity and type II diabetes. In the present study, leptin cDNA was cloned from mouse fat cells by RT-PCR and prokaryotic expression of leptin was attempted in order ot prepare a leptin-specific antigen. Immunization of a rabbit with the leptin-specific antigen into a rabbit resulted in the generation of leptin-specific antiserum that could be useful in the detection of leption expressed in various tissues. The sequence of leptin cDNA prepared in the present study wa identical to the previously reported one. Transformation of E. coli(DH5a) cells with the leptin cDNA-inserted translation vector, pGEX-4T-3-leptin followed by treatment with IPTG (0.1mM) resulted in the expression of a large amount of GST-leptin fusion protein with a molecular weight of 44 KDa as an inclusion body. Denaturation of the insoluble fusion protein by 8M urea, 6M guanidium-HCI or 0.1% 2-mercaptoethanol followed by a slow oxidation could not solubilize the inclusion body. The cell extract was subjected to SDS-PAGE and GST-leptin protein electroeluted from the gel was then injected into a rabbit subcutaneously for the immunization. Anti-GST-leptin rabbit antiserum which had a cross reactivity to the GST-leptin protein was generated. Leptin protein expressed in mouse brain and fat tissues was detected by Western blot immunodetection system using the antiserum generated in the present study.
Purpose : Cerebral blood flow (CBF) reactivity to acetazolamide (ACZ) is useful to select patients with hemodynamic failure. However, it is still a matter of speculation that varying degrees of regional CBF increases after ACZ administration represent the severity or stage of regional hemodynamic failure as assessed by positron emission tomography (PET). We studied to elucidate whether ACZ challenge $^{123}I-IMP$ brain single photon emission tomography (SPECT) can accurately grade the seventy of regional hemodynamic failure. Materials and Methods: Eighteen patients (M: 16, F: 2, average age: 61 years) with unilateral occlusive disease of the internal carotid artery or the trunk of the middle cerebral artery (MCA). Patients undewent $^{123}I-IMP$ brain SPECT study with acetazolamide challenge and PET study was carried out within 2 weeks before and after SPECT study. Five healthy volunteers with a mean age of 48 years (range: 28-73 yr, M: 3, F: 2) underwent PET studies to determine normal values. In SPECT study, an asymmetry index (Al)-the percentage of radioactivity of region of interest (ROI) in the occlusive cerebrovascular lesion to the contralateral homologous ROI-was used for numerical evaluation of relative $^{123}I-IMP$ distribution. In PET study, regional CBF, oxygen extraction fraction (OEF), cerebral metabolic rate of oxygen ($CMRO_2$) and cerebral blood volume (CBV) values were measured with $^{15}O-labeled$ gas inhalation method and the values were used for comparison with Al (Al during acetazolamide challenge-Al of basal study) on the SPECT study. ROls were classified by severity into three groups (normal, stage I and stage II). Results: Mean values of Al in areas with normal, stage I and stage II hemodynamic failure were $6.25{\pm}7.77%\;(n=107),\;-10.38{\pm}10.41%\:(n=117)\;and\;13.30{\pm}10.51%\;(n=140)$, respectively. Al significantly differed with each groups (p<0.05). Correlation between Al and CBF, OEF and CBV/CBF in hemisphere with occlusive cerebrovascular lesion was 0.20 (p<0.01), -0.28 (p<0.01) and -0.28 (p<0.01), respectively. Conclusion: We concluded that $^{123}I-IMP$ brain SPECT with acetazolamide challenge could determine the severity ad stage of regional hemodynamic failure as assessed by PET.
Background : There have been many debates about the effects of nitric oxide on the neurogenic inflammation. The role of nitric oxide in the neurogenic inflammation of airways will be required a better understanding of the localization and types of nitirc oxide synthase(NOS) activity in the neurogenic inflammation of airways. Method : To investigate the role of nitric oxide in airway neurogenic inflammation, 1) the effects of neurokinin receptor antagonist (FK224) and nitric oxide synthase inhibitor, $N^{\omega}$-nitro-L-arginine (L-NNA) on plasma extravastion were evaluated in four groups of Sprague-Dawley rats ; sham operation group(sham NANC group), electrical vagal stimulation group(NANC2 group), intravenous pretreatment groups with FK224 (1mg/kg ; FK224 group), and L-NNA(1mg/kg ; L-NNA group) 15 minutes before vagal NANC stimulation. 2) NOS activity in trachea with neurogenic inflammation was localized by immunohistochemical stain. Immunohistochemical stain was performed by antibodies specific for inflammatory cells(iNOS), brain(bNOS), and endothelium (eNOS) on trachea obtained from sham NANC, NANC2, and FK224 groups. Results : The results are that plasma extravsation in neurogenic inflammation of rat airways was inhibited by FK224, but enhanced by L-NNA pretreatment(P<0.05). There was significantly increased infiltration of inflammatory cells in subepithelium of neurogenic inflammatory trachea, but the reduction of subepithelial infiltration of inflammatory cells was observed after pretreatment with FK224(P<0.05). Immunostaining with anti-iNOS antibody showed strong reactivity only in infiltrated inflammatory cells in neurogenic rat trachea, and these iNOS reactivity was reduced by pretreatment with FK224. bNOS immunoreactivity was significantly increased only in the nerves both of neurogenic inflammatory and FK224 pretreated trachea compared with sham NANC trachea(p<0.05). eNOS immunoreactivity was not significant change in endothelium in neurogenic inflammation of rat trachea. Conclusion : These results suggest that nitric oxide released from iNOS in infiltrated inflammatory cells has main role in neurogenic inflammation of rat trachea. The presence of bNOS immunoreactivity in the nerves indicates that nitric oxide may be released from the nerves in rat trachea with neurogenic inflammation.
목 적 : 본 연구의 목적은 시상하부에서 침처치에 대한 nitric oxide synthase (NOS)발현을 nicotinamide adenine dinucleotide phosphate-diaphorase (NADPH-d)를 이용한 조직화학 염색법으로 관찰하였다. 실험방법 : 동물은 Balb/c (wild type) 와 Stat 4 knockout (KO) 생쥐를 사용하였다. 염증유도는 1% carrageenan 용액 (20ul/마리)을 발 뒤꿈치 표피에 주사하였고, 침 처치는 족삼리 (ST36)에 시침하였다. 침 처치 후 5시간까지 부종율을 부종측정기로 측정하였으며, 마지막으로 부종을 측정한 후 동물을 희생하여 뇌를 적출하여 고정하였다. 침에 대한 효과를 확인하기 위하여 NADPH-d 반응의 조직염색을 실시하였다. 염증유도와 그룹간의 유의성 검증은 one-way ANOVA를 사용하였다. 결 과 : 대조군인 Balb/c와 실험군인 stat4 KO 생쥐를 carrageenan으로 염증을 유도시에 대조군은 90%이상 유도된 반면, Stat4 KO 그룹은 50% 정도의 염증만이 유도되었다. 염증을 유도한 생쥐의 족삼리에 침 처치시 대조군은 1시간에서 약 40%정도 감소하였고 (P<0.05), Stat4 KO 실험군은 유의한 염증 감소율을 보이지 않았다. 시상하부의 lateral hypothalamic area (LHA)와 paraventricular nucleus (PVN)부위의 침에 대한 효과를 NADPH-d 에 양성으로 반응하는 세포수로 비교하여 다음과 같은 결과를 얻었다. (1) 대조군에서 염증 유도시 시상하부의 PVN는 NADPH-d 양성세포수가 감소하였고, LHA에서는 증가하였다. (2) 염증을 유도한 대조군에 침을 처치시 PVN은 세포수가 증가하였고, LHA에서는 감소하는 경향을 보였다. (3) 염증을 유도한 Stat4 KO 군에서는 시상하부의 PVN과 LHA부위 모두에서 NADPH-d 양성세포수가 감소하였고, 염증유도그룹에 침을 처치시 PVN과 LHA부위 모두에서 세포수가 증가함을 관찰 할 수 있었다. (4) 대조군과 실험군 모두에 salicylic acid로 비교하였더니 염증유도 효과 및 NADPH-d 세포 수에서 침 처치와 비슷한 결과를 나타내었다. 결 론 : 침은 염증을 유도한 생쥐에서 염증 감소에 유의한 효과가 있다. 염증을 유도한 Balb/c 와 Stat4 KO 생쥐에 침을 처치 시 시상하부의 NADPH-d 발현이 LHA부위와 PVN에서 서로 다르게 나타나는 것으로 나타난다. 이러한 현상은 침 효과가 시상하부의 위치에 대한 작용이 다르기 때문이라고 생각된다.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.43
no.6
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pp.799-806
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2014
The present study was conducted to evaluate the effects of extract from Eriobotrya japonica leaves (EJE) on cognitive impairment induced by scopolamine, a muscarinic antagonist, in rats. Scopolamine injection (1 mg/kg, i.p.) impaired performance in rats in the passive avoidance test as well as in water maze test and severely reduced cholinergic system reactivity, as indicated by reduced acetylcholine levels and increased acetylcholinesterase activity. Daily administration of EJE significantly increased step-through latency in the passive avoidance test, reduced escape latency, and increased time spent in the platform quadrant in the Morris water maze test. EJE protected against scopolamine-induced cholinergic system deficit, including reduced acetylcholine levels and increased acetylcholinesterase activity in whole brain homogenates. These results suggest that EJE provides a significant anti-amnesic effect against scopolamine-induced cholinergic system deficits and cognitive impairment.
So, Byoung-Gyoum;Kim, Kee-Won;Ko, Myoung-Kyu;Yang, Won-Mo;Cho, Kyu-Park
The Korean Journal of Pharmacology
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v.22
no.2
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pp.88-95
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1986
Clinically, subhypnotic doses of barbiturates have been known to elicit hyperalgesia. In this experiment, effect of acute or chronic phenobarital treatment on the response to pain in rat was reevaluated by hot-plate method. To elucidate its mechanism, changes of ${\beta}-endorphin$ contents and [3H]-morphine binding of the rat midbrain as well as functional opiate receptor in vas deferens were also measured. Intraperitoneal injection of sub anesthetic dose phenobarbital induced initial hyperalgesia followed by successive analgesia, while chronic phenobarbital-treatment decreased reactivity to pain. Naloxone (10mg/kg, i.p.) markedly shortened hot plate latency period, and significantly inhibited the analgesic action of phenobarbital. Single dose of phenobarbital did not affect ${\beta}-endorphin$ contents and [3H]-morphine binding in rat mid brain, but in the chronic phenobarbital-treated groups, ${\beta}-endorphin$ contents was increased, while Bmax of opiate receptor binding was decreased. Moreover, very significant correlations among responses to pain, changes of ${\beta}-endorphin$ contents and opiate receptor binding were observed. However, Kd values of opiate receptor bindings were not changed in all preparations. In the chronic phenobarbital-treated vas deferens preparations, ID50 of morphine was increased witb concomittant decrease of maximum effect. But $pA_2 $, value for naloxone was not changed. From these results, it is suggested that phenobarbital can produce analgesia due to changes of ${\beta}-endorphin$ contents as well as functional opiate receptors by receptor regulation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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