This study was conducted to investigate the developmental potential of cloned embryos derived from bovine fetal fibroblast cells, and the effect of quiescent treatment, passage number and origin of donor cells on in vitro development of cloned embryos. Fetal skin and liver-derived fibroblast cells were transferred to enucleated oocytes after serum starvation or nontreatment (cycling). After electrofusion. reconstituted embryos were activated with $Ca^{++}$-ionophore and cycloheximide, and cocultured for 7~9 days with BRL cells. Some blastocysts were transferred to recipient cows 7~8 days post estrus. The development rate to the blastocyst stage of serum starved cell-derived embryos was higher (25.3%) than that of actively dividing cells-derived embryos (15.9%), The rates of blastocyst formation were 23.1~25.0% after transfer of cell passaged 4 to 6 times, and 23.8 and 25.2% after transfer of fetal skin and liver cells, respectively. After embryo transfer, 34.4% and 15.6% of recipient cows were pregnant on Day 60 and 120, respectively, and one male calf was produced from skin-derived vitrified blastocyst. The result of this study showed that the development of cloned embryos. was enhanced by quiescent treatment, but did not different among the cells passaged 4 to 6 times, and between skin and liver cells. This result also confirms that offspring can be obtained from the vitrified clone embryo derived from fetal skin cell.
The random insertion of useful gene in genome has been a common method to produce transgenic animals. This method is inefficient for induction of high levels gene expression in transgenic animals. To improve this limit, we tried to develop the system which target the gene at the specific genomic region. Thus, in our experiment, the vector system to target the human thrombopoietin (TPO) gene was developed. Targeting vector including TPO, neo and DT genes was transfrcted into bovine embryonic fibroblasts (bEF) or bovine ear skin fibroblasts (bESF). First of all, we determined concentration of the geneticin (G418) for selection of transfected cell lines. Our results showed that 1200 and 900 $\mu\textrm{g}$/ml of G418 were the most proper for selection of transfscted bEF and bESF cells. In this study, lipofectamine was used as a transfection reagent. Thus, the proper ratio of DNA:lipofectamine for transfection was also required to elevate targeting efficiency in primary mammalian cells. Our result indicates that the most proper ratios of DNA:lipofectamine were 4:2 and 1:2 in bEF and bESF cells. According to the optimized these conditions, single colonies were picked following transfection and were analyzed by PCR. More than 90% of the single colonies have TPO gene. However, there were no colonies with targeted TPO at the specific genomic region. Therefore, further experiments to select the specifically targeted colonies and to find more efficient methods such as reducing selection time and shortening a size of TPO gene are required.
Park, Joo-Hee;Choi, Yong-Lak;Kwon, Dae-Jin;Hwang, In-Sun;Park, Choon-Keun;Yang, Boo-Keun;Cheong, Hee-Tae
Reproductive and Developmental Biology
/
v.33
no.4
/
pp.223-228
/
2009
We attempted to control the maturation promoting factor (MPF) activity and investigated the subsequent reprogramming of bovine somatic cell nuclear transfer (SCNT) embryos. Serum-starved adult skin fibroblasts were fused to enucleated oocytes treated with 2.5 mM caffeine or $150\;{\mu}M$ roscovitine. The MPF activity, nuclear remodeling patterns, chromosome constitutions and development of SCNT embryos were evaluated. Methylated DNA of embryos was detected at various developmental stages. The MPF activity was increased by caffeine treatment or reduced by roscovitine treatment (p<0.05). Blastocyst development was higher in the caffeine-treated groups (27.6%) than that of the roscovitine-treated group (8.3%, p<0.05). There was no difference in the apoptotic cell index among the three groups. However, the mean cell number of blastocysts was increased in the caffeine-treated group (p<0.05). Higher methylation levels were observed in the Day 3 embryos of the roscovitine-treated group (50.8%), whereas lower methylation levels were noted at Day 5 in the caffeine-treated group (12.5%, p<0.05). These results reveal that the increase in MPF activity via a caffeine-treatment creates a more suitable condition for nuclear reprogramming after SCNT.
The effect of addition of inorganic salts in polyethersulfone (PES) polymer solution on the membrane formation and ultrafiltartion performance was studied through the thermodynamic and kinetic properties of casting solution. To control the thermodynamic and kinetic properties of casting solution, various inorganic salts $[CaC1_2, LiCl, LiClO_4, ZnC1_2 $and Mg(ClO_4)_2]$ were added in the PES/NMP solution. Variation of membrane morphology and performance of the resulting membranes with change of the salt type and content added in tasting solution were discussed using viscosity, coagulation value, light transmittance measurement, overall membrane porosity, ultrafiltration experiment and cross-sectional SEM image. For all kind of inorganic salts, according as increase of the salt content in casting solution, viscosity is increased, coagulation value becomes lower, top layer thickness below the skin surface is increased, bovine serum albumin(BSA) rejection decreased and pure water flux is increased except $CaC1_2$ and LiCl. In case of $CaC1_2$ and LiCl, it is found that when the salt content is increased, the formation of macrovoids is suppressed and the precipitation rate becomes slow while instantaneous demixing of precipitation type is maintained. However, in case of $LiClO_4$ and $Mg(ClO_4)_2,$ it is found that precipitation rate becomes faster.
Yeo, Hyeon Jung;Kim, Jun Hyung;Jung, Yung Jin;Son, Dae Gu;Han, Ki Hwan
Archives of Plastic Surgery
/
v.36
no.4
/
pp.385-392
/
2009
Purpose: In the partial thickness burn management, despite of several advantages, the use of human amniotic membrane has been limited. The authors applied dried bovine amniotic membrane(DBAM) to overcome disadvantages of amniotic membrane for partial thickness burn and compared the effectiveness with cultured allogenic keratinocytes(CAK) that have been recently used for the management of burn. Methods: 16 patients with partial thickness burn, the mean age of 38 ranging 12 to 59 years, between August 2007 and May 2008 were assigned to this study. Either DBAM or CAK was applied, and the secondary dressing was removed on the following day. To compare treatment effect, time for epithelization, Vancouver scar scale and chromameteric results were evaluated. Results: The time for epithelization of DBAM was 10.1 days, that of CAK was 9.1 days, and they were shorter than the previous 2 - 3 weeks. At the follow up Vancouver scar scale was 2.8 for DBAM and 3.0 points for CAK and showed good results. The result of chromameter showed that the $L^*$, $a^*$, and $b^*$ values of the area applied DBAM were 60.1, 13.6, and 13.3, respectively, and the values of the area applied CAK were 60.1, 12.4, and 12.4, respectively. It was found that the skin color of the healed area after burn was darker, the redness was higher, and the yellowness was lower. After dressing, significant side effects were not observed, and in the cases of applying CAK, it was inconvenient as the moving area had to be fixed. Conclusion: With CAK, DBAM has several advantages such as the shortening of the epithelization period, reduction of scar and pigmentation, and convenient application, etc. Thus it is an effective method for the partial thickness burn management.
Determining the origin of the components in commercially available gelatin, a purified protein derived mostly from pig skin and bovine tissue, is a challenge, leading to concerns on the grounds of religious beliefs and health. Therefore, regular monitoring of labeling compliance by food control authorities is also necessary. In this study, we monitored the origin of gelatin capsules from 181 commercial dietary supplements that were available for purchase on the internet, using species-specific PCR assays. Fifty five products were labeled correctly, declaring that they used bovine-, fish- and plant-derived gelatin, whereas the other 126 capsules were labeled "gelatin" without specifying the origin. Gelatin in these capsules was obtained from cattle (n = 51), pigs (n = 31), or both (n = 44). Therefore, it is important to declare all of the raw materials used to produce gelatin capsules on the labels to best protect consumers' rights, religious beliefs, and health.
In Korea, bovine tuberculosis (bTB) is a representative zoonotic disease that causes considerable economic loss. In determining the positive bTB, the ELISA method for examining the amount of interferon-gamma (IFN-γ) is included in Korea's diagnostic standard method. Recently, commercially available BIONOTE TB-Feron ELISA Plus (TB-Feron Plus) that detects IFN-γ has been introduced. However, since the scientific basis for the performance is limited, we evaluated performance by comparing it with the results of another IFN-γ ELISA assay kit (BOVIGAM®) certified by Office International des Epizooties. In our research, 42 positive blood samples preliminarily tested with a tuberculin skin test and/or BOVIGAM® and 54 negative blood samples collected from three bTB free farms were subjected to IFN-γ assay using the TB-Feron Plus and the BOVIGAM®, respectively. The result shows that the sensitivity, specificity and accuracy were 81.0% (34/42), 100% (54/54), 91.7% (88/96) in TB-Feron Plus kit and 78.6% (33/42), 100% (54/54), 90.6% (87/96) in BOVIGAM® kit, respectively. Moreover, the overall accordance percentage of the two kits was 99.0% (95/96) and there was almost perfect agreement between two assays (Kappa=0.977, P<0.0001). Furthermore, additional studies confirmed that elevated lymphocyte numbers in blood did not interfere with the results of the TB-Feron Plus kit. And, delayed time from sampling to culture decreased the optical density (OD) value. Therefore, we concluded that the TB-Feron Plus kit was not inferior to BOVIGAM® in performance. High lymphocyte numbers in blood did not impact on TB-Feron Plus results, while delayed time before culture interfered with OD value.
Kim, Soo Hyun;Lee, AhReum;Kim, SuJi;Kim, Kyeong Jo;Kwon, Ojun;Choi, Joon Young;Koo, Jin Suk;Roh, Seong-Soo
The Korea Journal of Herbology
/
v.32
no.4
/
pp.17-24
/
2017
Objectives : Advanced glycation end products (AGEs) is bind formation of glucose and protein. Acceleration of AGE formation during hyperglycemia is associated with the pathogenesis of diabetic complications and causes kidney and skin damage. The aim of this study was investigated the AGEs inhibitory activity and antioxidant activity of water extracts from young persimmon (YP) and heated young persimmon (HYP). Methods : Paeoniae Radix Alba (YP) is prepared by heating with 30% ethanol. AGEs formation inhibitory activities of YP and HYP measured using bovine serum albumin. To evaluate the protective effects of YP and HYP in diabetic rats induced with streptozotocin (STZ) and methyl glyoxal (MGO), SD rats were distributed into four groups; normal mice (Nor), AGEs-induced rats (Con), AGEs-induced rats treated with 100 mg/kg YP (YP), AGEs-induced rats treated with 100 mg/kg heated YP (HYP) for 3weeks. Heated young persimmon respectively decrease AGEs construction. Results : YP and HYP administration inhibited the biomarkers of AGEs in serum, kidney and skin tissues. AGE-induced rats revealed that the significant decreased collagen however, heat processing methods of young persimmon up regulated inhibits AGEs-induced collagen decrease. The expressions of AGEs were decreased in YP and HYP treated group compared with the control group in tissues. It specifies that HYP has potential to serve as a positive regulator of via AGEs path way. Conclusion : It has proposed that may have an improvement effect on diabetic complications, heated young persimmon has AGEs inhibitory excellent activities and antioxidant effect.
Back J. J.;Park C. K.;Yang B. K.;Kim C. I.;Cheong H. T.
Reproductive and Developmental Biology
/
v.29
no.3
/
pp.175-180
/
2005
This study was conducted to examine the effects of demecolcine-assisted enucleation and recipient cell cycle stage on the development of bovine somatic cell nuclear transfer (NT) embryos. In vitro cultured oocytes for $16\~20$ h were classified by first polar body (1st PB) extrusion and cell cycle stage (MI and MII) and treated $0.4\;{\mu}L/mL$ demecolcine for 40 min before enucleation. Enucleated oocytes were fused electrically with bovine ear skin cells, activated by Ca-ionophore+DMAP, and cultured in vitro. Most of eggs ($86.2\%$) treated with demecolcine protruded a chromosome mass and enucleated efficiently ($98.8\%$, (P<0.05). Demecolcine did not have a deteriorative effect on the development of NT embryos. Developmental rate of NT embryos reconstituted with oocytes extruded 1st PB significantly higher than that of NT embryos produced by oocytes without 1st PB ($18.2\%\;vs.\;4.6\%\cdot$, P<0.05). Cleavage and blastocyst formation rate of embryos reconstituted with MI oocytes ($69.4\%\;and\;5.9\%$, respectively) were significantly lower than those of embryos reconstituted with MII oocytes ($96.7\%\;and\;23.9\%$, respectively, P<0.05). From the present result, it is suggested that domecolcine is useful for the enucleation of recipient oocytes in bovine NT procedures, and MII oocytes rather than MI oocytes are more appropriate for recipient cytoplasm. Although, the potential to develop into blastocysts of NT embryos produced by 1st PB-nonextruded and MI oocytes was very low, these oorytes could be used for NT.
This study was performed to investigate the effects of concentration and degree of unsaturation of fatty acids on cellular proliferation and lipid peroxide production, using primary skin fibroblasts from neonate rats Fibroblasts (CPD : 2.8-5.4). Cells were cultured either in control medium (Dulbecco's modified Eagle's medium supplement with 10% fetal bovine serum) or in media supplemented with various kinds (stearic, oleic, linoleic, arachidonic, linolenic, eicosapentaenoic acid) and amounts (5, 10, 25, 50, 100, 150uM)of fatty acids. Cellular proliferation ratio and lipid peroxice production were measured and morphological changes were observed. Cellular proliferation was inhibited and morphological changes were observed. Cellular proliferation was inhibited and morphological changes were observed in cells grown in stearic containing media. Oleic, arachidonic, and eicosapentaenoic aicd tend to stimulate cellualar proliferation, and linolenic acid had no effects. Lipid peroxide concentrations in fibroblasts increased in proportion to the contents and unsaturation of fatty acids in media. Especially supplementation of arachidonic acid accelerated cellualr lipid peroxidation. Free radicals may cause severs damage to biological molecules, so lipid peroxidation probably contributes cellular membrane damages. However there were little relationship between lipid peroxide production and cellular proliferation in this study. (Korean J Nutrition 29(2) : 159~165, 1996)
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.