Kim, Ah Hyeong;Kim, Seon Bo;Han, Ki Don;Kim, Heung Tae
The Korean Journal of Pesticide Science
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v.18
no.3
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pp.161-167
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2014
This study was conducted to investigate the resistance of Botrytis cinerea to azoxystrobin, which belongs to strobilurin fungicides. The sensitivity of B. cinerea isolates, which were collected from infected pepper, strawberry, cucumber and tomato by a single spore isolation, to the fungicide was tested through a agar dilution method on PDA amended with fungicides and $100{\mu}g\;mL^{-1}$ of salicylhydroxamic acid (SHAM). All isolates of B. cinerea tested in this study were classified as a sensitive and a resistant group by $1.0{\mu}g\;mL^{-1}$ of $EC_{50}$ value to azoxystrobin. While the sensitive isolates accounted for 46.5% of B. cinerea population, the resistant ones did for 53.5%. According to the regions isolating B. cinerea, the highest isolation frequency was showed as 81.1% in Chungnam among the all. Among 4 host plants as pepper, strawberry, cucumber and tomato, the highest isolation frequency was obtained in strawberry, while the lowest was done in pepper. The isolate resistant to azoxystrobin showed the cross resistance to other fungicides included into strobilurins as kresoxim-methyl and trifloxystrobin. In spite of an excellent efficacy of strobilurins, it should be taken care to use them in the field, because of the high risk in the fields.
These surveys were conducted to check the occurrence of disease in various horticultural crops in alpine areas, especially Daekwallyong areas, Pyongchang-Gun, and Hyeongseong-Gun in Kangwon province. TuMV on Chinese cabbage was one of the most serious diseases, especially in 1994 and 1997. The incidence of soft rot and clubroot has been increased gradually. Brittle root rot on Chinese cabbage was significantly decreased. Soft rot, gray mold, downy mildew, powdery mildew, bottom rot and Alternaria leaf spot were the common diseases on most vegetable crops. Gray mold (Botrytis cinerea) on celery, cercospora leaf spot (Cercospora sp.) on melon, powdery mildew (Erysiphe cichoracearum) on lettuce, and clubroot (Plasmodiophora brassicae) on parsley are newly found in Korea. The most common and predominant diseases were viruses, especially CMV, TMV, TuMV, BBMV, and gray mold, wilts, and cercospora leaf spot on many flowers in alpine areas. Fusarium oxysporum f. sp. eustomae causing wilting on lisianthus (Eustoma grandiflorum), Turnip mosaic virus causing mosaic and color breaking on stock, Cercospora spp. causing cercospora leaf spot on various wild lily, Cladosporum echinulatum causing leaf spot on carnation, and phytoplasma causing witches' broom on statice (Limonium sinuatum) and blazing star (Liatris spp.) were newly found during these surveys in Korea.
In the present study, we analyzed the defensin protein deduced from Korean radish (Raphanus sativus L.) seeds.To express the genes in E. coli, we constructed a recombinant expression vector with a defensin gene, named rKRs-AFP gene isolated from Korean radish seeds. Over expressed rKRs-AFP proteins was separated by SDS-PAGE to determine the purity, and protein concentration was determined by the Bradford method. Antifungal activity was assessed by disk assay method against the tested fungi. As a result, when 500 mL of cell culture were disrupted by sonicator, 32.5 mg total proteins were obtained. The purified protein showed a single band on SDS-PAGE with estimated molecular weight about 6 KDa, consistent with the molecular mass calculated from the deduced amino acid sequence. The purified rKRs-AFP protein showed remarkable antifungal activities against several fungi including Aspergillus niger, Botrytis cinerea causing the gray mold disease, and Candida albicans. In field tests using the purified rKRs-AFP protein, the protein showed the reducing activity of disease spot and the mitigating effect of spreading of disease like agrichemicals. The immuno-assay of rKRs-AFP protein showed that the purified protein entirely accumulated at B. cinerea cytoplasm through the hyphal septa shown by fluorescence imaging. There was no fluorescence inside the cell, when the hypha was incubated without the protein. These all results indicate that the recombinant rKRs-AFP proteins can be utilized as a potential antifungal drug to control harmful plant fungal pathogens.
Park, Myung-Soo;Ahn, Ji-Ye;Choi, Gyung-Ja;Choi, Yong-Ho;Jang, Kyoung-Soo;Kim, Jin-Cheol
The Plant Pathology Journal
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v.26
no.3
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pp.253-259
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2010
In vitro and in vivo mycofumigation effects of the volatileproducing fungus Nodulisporium sp. CF016 isolated from stem of Cinnamomum loureirii and the role of its volatile compounds were investigated against phytopathogenic fungi. The volatile compounds produced by Nodulisporium sp. CF016 inhibited and killed a wide range of plant and storage pathogens including to Pythium ultimum, Rhizoctonia solani, Fusarium oxysporum, Phytophthora capsici, Sclerotinia sclerotiorum, Colletotrichum coccodes, Magnaporthe oryzae, Alternaria panax, Botrytis cinerea and Penicillium expansum. Mycofumigation with wheat bran-rice hull cultures of Nodulisporium sp. CF016 showed in vivo antifungal activity against gray mold caused by B. cinerea and blue mold caused by P. expansum of apple. The most abundant volatile compound produced by Nodulisporium sp. CF016 was $\beta$-elemene followed by 1-methyl-1,4-cyclohexadiene, $\beta$-selinene and $\alpha$-selinene. Nodulisporium sp. CF016 could be an attractive mycofumigant in controlling postharvest diseases of various fruits including apple.
Effects of fungicides on the mycelial growth of Botrytis cinerea isolated from ginseng leaves were investigated by an agar dilution method. By using a agar dilution method, it was investigated the effect of fungicides, procymidone, carbendazim and the mixture with both of carbendazim and diethofencarb, on the mycelial growth of Botrytis cinerea isolates, which were isolated from infected leaves of ginseng in 2005 and 2006. With MIC (minimum inhibiton concentration) of procymidone against B. cinerea, pathogens were divided into two groups. While one showed the low MIC between 0.8 and $4.0{\mu}g/ml$, the other showed higher MIC above $20{\mu}g/ml$. In terms of the inhibition ratio of mycelial growth at the indicated concentration of procymidone, isolates of B. cinerea were divided into three groups; the sensitive, the intermediate resistant, and the resistant group. Each group was differentiated by $EC_{50}$; the sensitive group showed below $2.0{\mu}g/ml$, the intermediate resistant group between 2.0 to $5.0{\mu}g/ml$, and resistant group above $5.0{\mu}g/ml$. Compared with the ratio of resistant isolates of B. cinerea in 2005, the ratio in 2006 increased from 19.3% to 27.5%. Furthermore, the average $EC_{50}$ value of them increased from $10.0{\mu}g/ml$ in 2005 to $237.3{\mu}g/ml$ in 2006. The ratio of isolates showing the multiple resistance between procymidone and carbendazim was 40.2%, whereas the ratio was 4.0% showing the multiple resistance in the mixture.
Kim, Ah Hyeong;Kim, Seon Bo;Han, Kee Don;Kim, Heung Tae
The Korean Journal of Pesticide Science
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v.19
no.3
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pp.329-334
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2015
With 86 isolates of Botrytis cinerea obtained from diseased fruits of tomato, strawberry and cucumber, it was conducted to detect the fungicide resistance of B. cinerea against mepanipyrim through an agar dilution method. FGA medium was used for monitoring the resistance. Among 86 isolates of B. cinerea, resistant isolates were composed by 23.3%, which was different according to regions isolating the pathogen. In accordance with isolation region, the isolation frequency of resistant isolates was as follows; that of Gyeonggi, Gyeongnam/Pusan and chungnam was 28.6%, 33.3% and 12.8%, respectively. The resistant isolates of B. cinerea showed the cross resistance between mepanipyrim and pyrimethanil. Also the pathogenicity of B. cinerea resistant to mepanipyrim was high as like that of sensitive isolates. Because of them, it should be necessary to manage the spraying system of mepanipyrim and the monitoring for the fungicide resistance.
Shin, Teak Soo;Yu, Nan Hee;Lee, Jaeho;Choi, Gyung Ja;Kim, Jin-Cheol;Shin, Chul Soo
The Plant Pathology Journal
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v.33
no.3
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pp.337-344
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2017
To develop a commercial product using the mycoparasitic fungus Simplicillium lamellicola BCP, the scale-up of conidia production from a 5-l jar to a 5,000-l pilot bioreactor, optimization of the freeze-drying of the fermentation broth, and preparation of a wettable powder-type formulation were performed. Then, its disease control efficacy was evaluated against gray mold diseases of tomato and ginseng plants in field conditions. The final conidial yields of S. lamellicola BCP were $3.3{\times}10^9conidia/ml$ for a 5-l jar, $3.5{\times}10^9conidia/ml$ for a 500-l pilot vessel, and $3.1{\times}10^9conidia/ml$ for a 5,000-l pilot bioreactor. The conidial yield in the 5,000-l pilot bioreactor was comparable to that in the 5-l jar and 500-l pilot vessel. On the other hand, the highest conidial viability of 86% was obtained by the freeze-drying method using an additive combination of lactose, trehalose, soybean meal, and glycerin. Using the freeze-dried sample, a wettable powder-type formulation (active ingredient 10%; BCP-WP10) was prepared. A conidial viability of more than 50% was maintained in BCP-WP10 until 22 weeks for storage at $40^{\circ}C$. BCP-WP10 effectively suppressed the development of gray mold disease on tomato with control efficacies of 64.7% and 82.6% at 500- and 250-fold dilutions, respectively. It also reduced the incidence of gray mold on ginseng by 65.6% and 81.3% at 500- and 250-fold dilutions, respectively. The results indicated that the new microbial fungicide BCP-WP10 can be used widely to control gray mold diseases of various crops including tomato and ginseng.
Methanol extracts of fresh materials of 57 plants were screened for in vivo antifungal activity against Magna-porthe grisea, Corticium sasaki, Botrytis cinerea, Phyto-phthora infestans, Puccinia recondita, and Blumeria graminis f. sp. hordei. Among them, seven plant extracts showed disease-control efficacy of more than 90% against at least one of six plant diseases. None of the plant extracts was highly active against tomato gray mold. The methanol extracts of Chloranthus japonicus (roots) (CjR) and Paulownia coreana (stems) (PcS) displayed the highest antifungal activity; the CjR extract controlled the development of rice blast, rice sheath blight, and wheat leaf rust more than 90%, and tomato gray mold and tomato late blight more than 80%. The PcS extract displayed control values of more than 90 % against rice blast, wheat leaf rust, and barley powdery mildew and more than 80% against tomato gray mold. The extract of PcS also had a curative activity against rice sheath blight and that of CjR had a little curative activity against rice blast. On the other hand, the extract of Rumex acetocella roots reduced specifically the development of barley powdery mildew. Further studies on the characterization of antifungal substances in antifungal plant extracts are underway and their disease-control efficacy should be examined under greenhouse and field conditions.
In order to establish the method to prepare and use the sulfur dioxide gas generating agent in low temperature storage of grape fruits, the $SO_2$ generation capacity from various sulfite compounds was investigated, and the method to regulate $SO_2$ gas generation and to detect the gas was developed. The conidial germination and mycelium growth of Botrytis cinerea which causes gray mold disease during grape fruit storage was completely inhibited at the $SO_2$ gas concentration of 400 ppm and 3200 ppm, respectively. Sodium hydrosulfite generated the most amount of $SO_2$ gas among the investigated 5 different sulfite or bisulfite compounds. By adjusting the number of pinholes on packaging film of the compound or by adding pH adjusting agent, e.g. citric acid or phosphates, it was possible to regulate the amount and duration of $SO_2$ gas generation from the compound. Because malachite green was quantitatively discolored by $SO_2$ gas, the solution or impregnated paper with the compound could be practically utilized as a indicator detecting $SO_2$ gas. Finally, when Muscat Bailey A grape was stored at low temperature with $SO_2$ gas generating agent, the disease incidence was reduced after storage.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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