본(本) 실험(實驗)의 목적(目的)은 천원(天原), 영동(永東), 괴산(塊山)에서 재배(栽培)하고 있는 호두나무(Juglans sinensis Dode)에 가지마름과 고사(枯死)를 일으키는 병원균(病原菌)을 분리(分離)하여 동정(同定)하고 이들 병원균(病原菌)의 병원성(病原性) 및 배양적(培養的) 특성(特性), 발병율(發病率) 등(等)을 조사(調査)하는 것이었다. 분리(分離)된 병원균(病原菌)의 균학적(菌學的) 특성(特性)을 조사(調査)한 결과(結果), 이들균(菌)은 Botryosphaeria dothidea (Mou g. ex Fries) Casati et de Notaris(가지마름병(病)), Phomopsis albobestita Fairman (Phomopsis 가지마름병(病)), Melanconis juglandis (Ellis et Everhart) Graves(검은 돌기 가지마름병(病))로 동정(同定)되었다. 온실내(溫室內)에서 이들균(菌)의 병원성(病原性)을 검정(檢定)한 결과(結果) 2년생(年生) 호도나무 묘목(苗木)에서 병원성(病原性)이 입증(立證)되었다, 균사생육(菌絲生育)에 미치는 온도(溫度)의 영향(影響)을 조사(調査)한 결과(結果) B. dothidea와 P. albobestita는 $25{\sim}30^{\circ}C$ 사이에서 생육(生育)이 양호(良好) 하였으며, M. juglandis는 $20{\sim}25^{\circ}C$에서 생육(生育)이 가장 좋았으며 세 가지 균(菌)모두 $4^{\circ}C$와 $40^{\circ}C$에서는 생장(生長)하지 않았다. 분리(分離)된 세 균(菌)의 생육(生育)은 배지(培地)에 따라 차이(差異)를 보이지 않았으며 생육최적(生育最適) pH는 B. dothidea와 M. juglandis의 경우 4.0~8.0의 범위(範圍)이며 P. albobestita의 경우(境遇) 4.0~5.0으로 나타났다. 균사생육(菌絲生育)에 미치는 탄소원(炭素源)과 질소원(窒素源)의 영향(影響)을 조사(調査)한 결과(結果) B. dothidea의 경우(境遇) 탄소원(炭素源)으로는 glucose, sucrose, starch 및 maltose을, 질소원(窒素源)으로는 histidine과 potassium nitrate를 첨가(添加)한 배지(培地)에서 생육(生育)이 좋았다. P. albobestita의 경우(境遇) 탄소원(炭素源)으로 glucose 와 sucrose를 질소원(窒素源)으로 alanine과 potassium nitrate를 함유(含有)한 배지(培地)에서 생육(生育)이 좋았으며 M. juglandis는 glucose, sucrose, potassium nitrat, 함유(含有) 배지(培地)에서 생육(生育)이 좋았다. 주요 호도나무 재배지역(栽培地域)에서 발병(發病) 상황(狀況)을 조사(調査)한 결과(結果) 조사지역(調査地域) 모두에서 P. albobestita에 의한 피해(被害)가 가장 심하였으며, 15년생(年生) 이상(以上)된 수목(樹木)이 어린나무보다 더 피해(被害)가 큰 것으로 나타났다.
For the purpose of acquiring microbial agents that can be utilized to biologically control the major airborne diseases to apple trees, such as canker(Botryosphaeria dothidea), bitter rot(Glomerella cingulata), alternaria leaf spot(Alternaria mali), root rot(rosellinia necatrix), canker(Valsa ceratosperma) and gray mold rot(Botrytis cinerea), the effective microorgaisms were isolated, tested for antagonistic activity to the pathogens causing major diseases to apple trees and identifed. Screening of more than 5,000 species of microorganisms collected in nature for them antagonistic action to the pathogens causing 5 major diseases to apple trees resulted in selection of effective species. Out of the 11 species, one species designated as CAP134 demonstrated outstanding activity. The bacterial strain, CAP134 exerted antagonistic efficiency of 57% on an isolated strain and 40% on a donated strain of Botryosphaeria dothidea., 52% on an isolated strain and 46% on a purchased strain of Alternaria mali, 60% on Valsa ceratosperma 25% on Glomerella cingulata, and 64% Rosellinia necatrix. The CAP134 was identified as a bacterial strain to Bacillus subtilis ATCC 6633 based on morephology, culture conditions, and physio-biochemical characteristics.
The anti-fungal activity of plant extractives was investigated and the lacquer extractives were selected. The lacquer extractives were coated on anti-fungal paper and confirmed its effect. Water repellency, tensile index and brightness of anti-fungal paper treated with natural extractives were similar to commercial pesticide-treated paper. The incidence of Fusicaladium leuieri MAGNUS of commercial pesticide-treated paper and anti-fungal paper treated with lacquer were similar but, the incidence of Botryosphaeria dothidea (Moug.) Ces & De Not and Gloeodes pomigena of those were increased 10-60 % than commercial pesticide-treated paper.
Ripe rot caused by Botryosphaeria dothidea is one of the serious diseases of postharvest kiwifruit. In order to control ripe rot on Actinidia chinensis cultivar 'Zesy002', several commercial agrofungicides were selected by an antifungal test on an artificial medium. Furthermore, disease suppression by the selected fungicides was evaluated on the kiwifruit by inoculation with a conidial suspension of B. dothidea. On the artificial media containing boscalid + fludioxonil was shown to be the most effective antifungal activity. However, in the bio-test pyraclostrobin + boscalid and iminoctadinetris were the most effective agrochemicals on the fruit. On the other hand, the infection structures of B. dothidea on kiwifruit treated with pyraclostrobin + boscalid were observed with a fluorescent microscope. Most of the fungal conidia had not germinated on the kiwifruit treated with the agrochemicals whereas on the untreated fruit the fungal conidia had mostly germinated. Electron microscopy of the fine structures showed morphological changes to the conidia and branch of hyphae on the kiwifruit pre-treated with pyraclostrobin + boscalid, indicating its suppression effect on fungal growth. Based on this observation, it is suggested that ripe rot by B. dothidea may be suppressed through the inhibition of conidial germination on the kiwifruit treated with the agrochemicals.
사과 재배에 피해를 주고 있는 사과 겹무늬썩음병, 탄저병, 라이족토니아병을 복합적으로 방제하기 위한 기초연구로서 각 병원균에 대하여 우수한 길항력을 동시에 가지는 길항미생물을 선발하고 Streptomyces sp. S-1110으로 동정하였다. 분리된 길항미생물은 배양상등액으로 길항물질을 분비하였으며 우수한 열안정성과 pH 안정성을 가지는 특성이 있었으며 각 병원균에 대한 감수성이 조금씩 달라서 2 종 이상의 길항물질이 동시에 생산되어 길항작용을 하는 것으로 추정되었다. 또한 분리균이 생산하는 길항물질을 사과 과실에 직접접종된 사과 겹무늬썩음병과 탄저병의 방제를 위해 실험한 결과 높은 방제력을 보였다. 따라서 분리된 길항미생물은 사과 과수원 및 저장소에서 동시에 수종의 질병방제에 쓰일 수 있는 천연 복합방제제의 개발을 위한 기초 균주로의 가치가 높은 것으로 판단된다.
Responses of Botryosphaeria dothidea to interrupted wetness periods were investigated under in vivo and in vitro conditions. Conidia of B. dothidea were allowed to germinate on apple fruits under wetting condition at $25^{\circ}C$ for 5 hr. They were air-dried for 0, 1, 2 or 4 hr, and then rewetted at $25^{\circ}C$ for 5 hr. Following an initial wetness period of 5 hr, 83% of the conidia germinated. The percent conidial germination increased to 96% when wetting was extended continuously another 5 hr. However, no further conidial germination was observed when wetting was interrupted by dry periods of 1, 2 and 4 hr, resulting in 83, 81 and 82%, respectively. The mean length of the germ tubes was $37{\mu}m$ after 5 hr of wetting and elongated to $157{\mu}m$ after 10 hr of continuous wetting. On the other hand, interruption of wetting by a dry period of 1 hr or longer after the 5 hr of initial wetting arrested the germ tube elongation at approximately $42{\mu}m$ long. Prolonged rewetting up to 40 hr did not restore germ tube elongation on slide glasses under substrate treatments. Model simulation using weather data sets revealed that ending infection periods by a dry period of at least 1 hr decreased the daily infection periods, avoiding the overestimation of infection warning. This information can be incorporated into infection models for scheduling fungicide sprays to control apple white rot with fewer fungicide applications.
Apple ring rot disease, caused by Botryosphaeria dothidea (Moug. ex. Fr) Ces. et de Not., is one of the most important diseases on apple fruits. In this study, strain 9001 isolated from healthy apple fruits from an infested orchard was evaluated for its biocontrol activity against apple ring rot in vitro and in vivo. Strain 9001 showed obvious antagonistic activity to B. dothidea YL-1 when plated on potato dextrose agar. Soaking healthy apples in the bacterial suspensions of strain 9001 prior to artificial inoculation of fungal pathogen resulted in a dramatic decrease in disease incidence when compared to the control. Moreover, either field application in the growth season or postharvest treatment of apples from infected orchards with bacterial suspensions of strain 9001 resulted in significantly reduced disease incidence within the storage period for 4 months at room temperature. Based on the phylogenetic analysis of 16S rRNA and the gyrA gene, strain 9001 was identified as Bacillus amyloliquefaciens. These results indicated that B. amyloliquefaciens 9001 could be a promising agent in biocontrol of apple ring rot on fruit, which might help to minimize the yield loss of apple fruit during the long postharvest period.
친환경농자재 11종을 대상으로 황색참다래 과실무름병에 대한 항균활성 검정결과 SS (B. subtilis 10%), WS (Microbial extract 70%), DS (Sulfur 78%) 3종을 선발하였다. SS, WS, DS를 PDA 배지에 10일 동안 처리 시 B. dothidea의 균사 생장 저해 정도는 각각 94.2%, 65.2%, 58.9%였다. 선발 친환경농자재를 이용한 저장시험에서 WS와 SS가 병 방제 효과가 좋았다. 포장시험에서는 SS와 WS 단독 처리, DS-WS와 WS-SS 교호처리가 효과적이었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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