경북 북부지역의 양잠농가에 피해를 주고 있는 누에(Bombyxmnri)의 미화용 유발 문제에 대한 원인과 기작을 밝혀내는 데, 이 연구의 궁극적 목적을 두었다. 일반 사육환경에서 나타날 수 있는 발육온도(20, 25, 3$0^{\circ}C$)와 최종령 초기 유충 체중 변이(412.6-1,616.0 mg)는 누에의 용화 결정에 영향을 주지 많았다 한편 유약호르몬(juvenile hormone:計I)동력제인 피리프록시팬(pyriproxyfen)은 10-s M의 낮은 농도에서도 난포세포 개방화를 유도하여, 이 약제가 누에에서도 동력제라는 것을 확인하였다. 피리프록시펜은 약제 농도 및 처리 시기별로 특이하게 누에 미화용 유발 효과를 보였다. 피리프록시펜은 JH 에스테라제(JH esterase: JHE)를 직접적으로 억제하지 못하고, 오히려 활성을 증가시키는 것으로 나타났으며, JH 결합단백질(JH binding protein:JHBP)의 유전자 발현을 억제하는 것으로 나타났다. 즉, 피리프록시펜은 체내에 JH 동력제로 작용하면서 JHE 유전자 활성을 제고시켰지만, JHE활성 증가에 따른 체내 JH함량이 줄어듬에 따라 JHBP의 유전자 활성을 억제하는 것으로 해석된다. 양잠농가 주변으로 살포 가능성이 있는 농약을 대상으로 난포세포 개방화 분석을 실시 한 결과, 제초제 3종(simazine, molinate, alachlor)이 JH 동력제 효과를 가지고 있는 것으로 나타났다. 누에 미화용 원인체 규명을 위해서 이들에 대한 직접 노출 시험이 요구된다.
본 연구에서는 식품의약품안전처에서 식품 원료로 사용 허용이 된 갈색거저리 유충(Tenebrio molitor larvae, Mealworm), 쌍별귀뚜라미(Gryllus bimaculatus), 번데기(Bombyx mori pupa, Silkworm pupa) 등 단백질이 풍부한 식용곤충 원료를 이용하여 된장 형태의 조미료를 제조하였다. 또한 된장 제조 시 발효에 관여하는 대표적인 미생물인 A. oryzae와 B. subtilis 균주를 사용하여 메주분말과 입국을 제조한 후 선행연구에 따른 저염 된장의 발효방식을 이용하여 곤충의 페이스트형 발효조미료를 개발하고자 하였다. 식용곤충을 이용하여 제조한 페이스트형 발효조미료의 수분은 47.58-49.58%로 나타났고 염도는 11.34-11.99%의 값을 보였다. pH는 발효가 진행되면서 천천히 감소하였으며 TMP가 가장 낮은 값으로 나타났다. 적정산도는 모든 시료에서 발효기간이 지남에 따라 계속 증가하는 경향을 보였다. 색도의 L값은 번데기 가장 높게 나타났으며, a값은 귀뚜라미와 번데기 비슷하게 나타났다. b값은 번데기 가장 높은 값을 보였다. 환원당의 경우 발효 기간에 따라 증가하다가 다시 감소하였으며, TMP의 환원당 함량을 가장 낮게 나타났다. 아미노질소는 모든 시료에서 발효 시간에 지남에 따라 증가하는 경향을 나타났으며, TMP가 가장 높은 값을 보였다. 총 질소는 큰 변화를 나타내지 않으며, 전반적으로 SBP에 비해 곤충소재 페이스트형 발효조미료가 높게 분석되었다. DPPH라디칼 제거능은 콩에 비해 곤충소재 페이스트형 발효조미료에서 높게 나타났으며, SPP가 80.95%로 가장 높은 값을 나타내었다. 유리 아미노산 함량은 발효가 진행되면서 전반적으로 2배 이상 증가하였다. 또한 맛의 기호성과 상관성이 높은 아미노산으로는 글루탐산, 아스파트산, 라이신, 페닐알라닌, 아르지닌, 세린 등으로 분석되었다. 전반적인 향, 맛, 전체적 기호도의 경우 곤충소재 페이스트형 발효조미료는 콩 된장보다 낮은 값을 나타내었는데, 이는 소비자들이 콩으로 만든 된장에 익숙해져 있는 상태로, 곤충소재에서 나타나는 특유의 맛이 전체적인 기호도에 영향을 미친 것으로 파악되었다. 곤충에 대한 관능적 차이는 있었으나 콩된장과 번데기로 만든 페이스트형 발효조미료는 유의적으로 비슷한 선호도를 보였다. 이를 통해 다양한 식용곤충 중에서 적절한 곤충을 선별하고 장류 미생물을 이용할 경우 차별화 된 페이스트형 발효조미료의 제조가 가능할 것으로 판단하였다.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제45권1호
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pp.17-21
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2022
The present study aimed to determine whether a hemolymph prepared from Antheraea yamamai larvae had the same biological activities using a Bombyx mori hemolymph prior to exposure to lipopolysaccharide (LPS) in order to induce an inflammatory response. The effects of the hemolymph were determined using a reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction to assess the expression of pro-inflammatory molecules. The A. yamamai hemolymph exerted anti-inflammatory effects on LPS-activated human monocytic leukemia cells via Toll-like receptor (TLR) 4-mediated suppression, similar to the B. mori hemocyte extract. Treatment with the A. yamamai hemolymph significantly suppressed LPS-induced upregulated inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2) mRNA expression at all tested concentrations compared with the control, similar to the B. mori immune-challenged hemolymph. Finally, the A. yamamai hemolymph, like the B. mori immune-challenged hemolymph, suppressed all of these concentrations in a dose-independent manner. These results demonstrate that the hemolymph of A. yamamai exhibited important biologically active substances. Further in-depth functional studies are required to fully understand the mechanisms underlying the biological activities of wild-type silkworm hemolymphs.
Kumar P. M. Pratheesh;Bhargava S.K.;Prabhakar C.J.;Kamble C.K.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제14권1호
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pp.45-50
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2007
Ethanol extract of 20 botanicals in 3 concentrations i.e., 2.5%, 5% and 10% were evaluated for their efficacy to improve reproductive performance of mulberry silkworm (Bombyx mod L.) through feeding botanical enriched mulberry leaves during $2^{nd}$ day of $4^{th}$ age as well as $1^{st}$ and $3^{rd}$ day of $5^{th}$ age larvae. The preliminary screening was done by ranking the botanicals based on influence in most important reproductive contributing parameters such as single cocoon weight, effective rate of rearing, pupation rate, fecundity and recovery of eggs/kg cocoon. Five botanicals viz., Asparagus recemosus, Achyranthes aspera, Tribulus terrestris, Withania somnifera, Parthenium histerophorus ranked first were further evaluated at 8% 5% and 3% concentrations to confirm their effectiveness and standardize effective concentration. Among the rearing parameters, mature larval weight, shell ratio and number of cocoons/kg were not significantly influenced by the treatments. However, reproductive parameters such as effective rate of rearing (wt), pupation rate (%), fecundity (No.) and egg recovery (g)/kg cocoon were significantly (P<0.05) influenced by the botanicals. Higher fecundity and egg recovery were obtained on treatment with Withania somnifera irrespective of concentrations. However at 5% concentration, pupation rate, fecundity as well as egg recovery were found significantly higher than that of other concentrations, confirming its effectiveness for improving reproductive efficiency.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제3권1호
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pp.89-92
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2001
The effect of topical application with 5,10 and 15 $\mu$g/ ml androstenedione and methyltesterone to the fifth stadium larvae of the si1kworm,B. mori on fat body glycogen, protein, tota1 lipids, phospholipids, neutral lipids and haemolymph trehalose and protein has been studied. The fat body glycogen increased significantly in all the treated groups except in the 15$\mu$g/ml androstenedione treated group. However the fat body glyco- gen increased significantly in 10 ${\mu}g$/ml methyltesterone treated group. The androstenedione treated groups showed increased haemolymph trehalose but the increase was not significant. However the haemolymph trehalose increased significantly in all the methyltestosterone treated groups. The fat body protein decreased in all the androstenedione and methyltesterone treated groups except 15 ${\mu}g$/ml methyltesterone where the decrease in fat body protein was significant. Whereas that of haemolymph protein significantly decreased in all the groups except in the group treated with 5 ${\mu}g$/ml androstenedione where the decrease was not significant. The total lipids, phospholipids and neutral lipids of the fat body decreased significantly in all the groups treated with androstenedione and methyltestosterone when compared with those of carrier control.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제11권2호
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pp.81-86
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2005
The mode of transmission, effect on fecundity, hatching and tissues specificity of a microsporidian $(Lb_{ms})$ recovered from Lamerin breed of the silkworm Bombyx mori L. was studied and compared with standard strain Nosema bombycis. Peroral inoculation of $Lb_{ms}$ or N. bombycis to zeroday of $4^{th}$ instar larvae of silkworm was the most suitable method for producing information on development of stage specific mortality, pupation and obtaining infected adults for transovarial transmission studies. It was observed that pupal mortality, the percentage of moths emerged and the percentage of moths infected were significantly high in N. bombycis infected batches as compared $(Lb_{ms})$ in all the three tested breeds of the silkworm. However no significant difference was observed in larval mortality. The fecundity and hatchability was not affected significantly in $(Lb_{ms})$ infected adults, however significant reduction in egg production, fecundity, hatchability and increased egg retention was observed in mother moths infected with N. bombycis. The $(Lb_{ms})$ is transmitted both horizontally and vertically at lower rate due to its low rate of proliferation. The trans ovarial transmission of $(Lb_{ms})$ to the $F_1$ progeny generation through eggs averaged only $61.33\pm5.10\%$ whereas N. bombycis was transmitted at $100\%$. The $(Lb_{ms})$ had low oral infectivity and low transovarial transmission in silkworm B. mori.
To develope the novel baculovirus transfer vector, the p10 gene was cloned from the Bombyx mori nuclear polygedrosis virus (BmNPV) vB2 strain isolated from the B. mori larvae of sericultural farms. The novel transfer vector was constructed by using the p10 gene of BmNPV vB2 strain was 210 bp. The TAAG sequence at the -71 bp of upstream from translation initiator ATG and two polyadenylation signal site at the downstream from terminator TAA were also detected in the p10 gene. The 5' and 3' flanking region of the p10 gene amplified by PCR was cloned into pBluescriptII SK(+) and then transfer vector pBm10 was construceted. The 7.9 kb pBm10 was analysed by restriction enzymes and the map was confirmed. In order to determine the expression of foreign gene of pBm10, $\beta$-galactosidase gene was inserted in the SmaI site of foreign gene cloning site of pBm10. The pBm10 containing $\beta$-galactosidase gene was cotranfected wth genomic DNA of BmNPV vB2 into BmN-4 cells. The recombinant baculovirus expressing $\beta$-galactosidase was also produced polygedra in the infected cells. The results indicated that pBm10 is functional, suggesting that in the baculovirus expression vector system, the recombinant virus produced by pBm10 was effective by oral infection for the producing recombinant proteins in in vivo expression.
Thyroxine을 5, 10, 15$\mu$g/ml의 수준으로 이화성 누에 NB18 품종의 유충에 도말처리한 결과 유충, 견사선, 고치, 고치층 등의 무게가 증가되고 유충경과 일수는 단축되는 등, 누에의 실용형질이 개선됨을 확인하였다. 이러한 결과는 전반적으로 10-15$\mu$g/ml의 thyroxine 처리구에서 얻어졌고 5$\mu$g/ml처리구는 대조구와 유의차를 보이지 않았다. 화아율과 부화율은 thyroxine처리의 영향을 받지 않았고 유충경과일수는 단축되었다.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제23권1호
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pp.129-135
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2011
Cathepsins are well-characterized proteases that are ubiquitously expressed in lysosomes. Previous work revealed that $Bombyx$$mori$ cathepsins B and D are expressed in the fat body and undergo decomposition during larval-pupal metamorphosis. Quantitative RT-PCR was performed to detect cathepsin gene expression at the transcription level when challenged by $B.$$mori$ nuclear polyhedrosis virus (BmNPV), temperature and hormones (20-hydroxyecdysone (20E) and juvenile hormone analogue (JHA)). mRNAs encoding cathepsins B and D were significantly enhanced after the larvae were infected with BmNPV, and the peak of the induction appeared at 1 day before spinning. This attenuated the inducing effect on cathepsin expression caused by infection. Temperature shock induced cathepsin expression at the later stage of the $5^{th}$ instar, and transcription levels varied with development stage and temperature. Cathepsin B and D mRNA expression in the fat body were significantly induced by JHA at the day before spinning, and with 20E, the expression reached a peak at the last day of the $5^{th}$ instar. Cathepsin B and D mRNA expression exhibited detectable changes post-treatment, without significant differences between or among the hormone concentrations.
Bacillus thuringiensis var. alesti (H. Serotype III)로부터 분리된 단백질 독소의 물리화학적 성질 및 누에에 대한 생물학적 검정에 있어서 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. Nutrient agar 배지를 사용하여 항온기에서 3$0^{\circ}C$에 세균을 배양했을 때 완전한 Bacterial lysis는 30일 걸렸고 액체 배지를 사용하여 발효기(Fermentation Jar)에 배양했을 때는 그 기간이 반으로 단축되었다. 2. 분리된 결정체들만으로부터 추출된 단백질 독소와 포자-결정체의 혼합들로부터 분리된 독소와는 단백질 독소의 순수도에 있어서 차이가 없었다. 3. 단백질 결정체를 알카리(pH 9.5)에 용해시켜 Sodium Lauryl Sulphate Polyacrylamide gel을 사용한 전기영동 을 행했을 때 분자량이 120,000, 87,000, 74,000의 3개의 단백질의 분리되었다. 4. 분리된 독소의 누에에 대한 생물학적 검정에 있어서 4령기 누에 체중 g당 LD$_{50}$는 0.080$\mu\textrm{g}$이었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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