Background: Cholangiocarcinoma (CCA), or bile duct cancer, is incurable with a high mortality rate due to a lack of effective early diagnosis and treatment. Identifying cytoplasmic membrane proteins of invasive CCA that facilitate cancer progression would contribute toward the development of novel tumor markers and effective chemotherapy. Materials and Methods: An invasive CCA cell line (KKU-100) was stimulated using TNF-${\alpha}$ and then biotinylated and purified for mass spectrometry analysis. Novel proteins expressed were selected and their mRNAs expression levels were determined by real-time RT-PCR. In addition, the expression of ALCAM was selected for further observation by Western blot analysis, immunofluorescent imaging, and antibody neutralization assay. Results: After comparing the proteomics profile of TNF-${\alpha}$ induced invasive with non-treated control cells, over-expression of seven novel proteins was observed in the cytoplasmic membrane of TNF-${\alpha}$ stimulated CCA cells. Among these, ALCAM is a novel candidate which showed significant higher mRNA- and protein levels. Immunofluorescent assay also supported that ALCAM was expressed on the cell membrane of the cancer, with increasing intensity associated with TNF-${\alpha}$. Conclusions: This study indicated that ALCAM may be a novel protein candidate expressed on cytoplasmic membranes of invasive CCA cells that could be used as a biomarker for development of diagnosis, prognosis, and drug or antibody-based targeted therapies in the future.
Background: Vaspin and Retinol binding protein-4 (RBP4) are new adipokines mainly produced by adipose tissue. Considering that medullary thyroid carcinoma (MTC) is a malignant neuroendocrine tumor, and to date the relationship between serum levels of vaspin and RBP4 with MTC has not been studied, in this matched case-control study we evaluated their possible significance to this tumor type. Materials and Methods: A total of 45 patients with MTC (21 males and 24 females) and 45 healthy persons as a control group (24 males and 21 females) were selected. The two groups were matched for age, sex and body mass index. Serum Vaspin and RBP4 levels were measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) methods in both groups. Also, weight and height were measured and body mass index was calculated too. Results: In total, patients with MTC had significantly higher serum vaspin levels compared to the controls (0.52ng/ml vs. 0.45ng/ml, P=0.0241). However, no significant difference was found in serum RBP4 concentrations between the patients with MTC and the controls ($15.2{\pm}2.55{\mu}g/ml$ versus $15.1{\pm}3.34{\mu}g/ml$, p>0.05). Conclusions: The results of this study demonstrated that serum RBP4 levels in MTC patients are not significantly different from those found in healthy individuals and did not correlate with MTC. On the other hand, higher levels of serum vaspin are associated with an increased risk of MTC. Thus Vaspin may be a novel and promising biomarker for diagnosis or confirmation of MTC in conjunction other specific tumor markers.
The detection of C-reactive protein(CRP) using self-assembled monolayer(SAM) was investigated by a portable surface plasmon resonance(SPR) sensor system. The CRP is a biomarker for the possible cardiovascular disease. The SAM was formed on gold(Au) surface to anchor the monoclonal antibody of CRP(anti-CRP) for detection of CRP. Sequence injection of the anti-CRP and bovine serum albumin(BSA) into the sensor system has been carried out immobilize the antibody and to prevent non-specific binding. The portable SPR system has two flow channels: one for the sample measurements and the other for the reference. The output SPR signal was increased with the injection of the anti-CRP, BSA and CRP due to binding of the proteins on the sensor chip. The valid output SPR signals was linearly related to the critical range of the CRP concentration. The experimental results showed the feasibility of the portable SPR system with newly developed SAM to diagnose a risk of the future cardiovascular events.
The circumsporozoite protein (CSP) of Plasmodium spp. is a diagnostic antigen and useful biomarker for monitoring short-term/seasonal changes to malaria transmission. Using P. vivax CSP antibody ELISA, epidemiological characteristics were analyzed in the residents of Ganghwa, Cheorwon, Paju, and Goseong from 2017 to 2018. In Ganghwa and Cheorwon, 1.6% and 1.2% of residents, respectively, were PvCSP-antibody-positive in 2018, which indicates a decrease of 0.4% in the positive rate compared to 2017. The annual parasite incidence (API) in Ganghwa and Cheorwon was 24.9 and 10.5 in 2017 and 20.3 and 10.7 in 2018, respectively. Although the changes were not significant, the API in Ganghwa decreased slightly by 4.5 in 2018 compared to the previous year. In Paju and Goseong, 3.9% and 2.0% of residents were positive for the PvCSP antibody. The API in Paju was 13.1 in 2017 and 16.0 in 2018, although no malaria patients were reported for the 2 years. Therefore, the results suggest that PvCSP is a useful antigen for confirming initial malaria infection. Additionally, considering that the antibody is relatively transient, it can be employed for sero-epidemiological studies to determine the extent of malaria transmission in the current year.
Ashwaq A. Shenta;Khansaa S. Saud;Ali A. A. Al-Shawi;Mustafa F. Hameed
Journal of Applied Biological Chemistry
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제65권4호
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pp.329-335
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2022
Essential minerals are important for human health because they support biochemical reactions in metabolism and may play a role in the development of glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency (G6PD). We investigated the relationship between calcium, magnesium, urea, creatinine, total protein, glucose and vitamin D levels in G6PD deficiency in this study. The control group consisted of 40 people (23 females and 17 males) and the patient group consisted of 50 people (20 females and 30 males), all of whom were between the ages of (1-12 years). The findings revealed that the calcium level in patients, depending on sex factor, has a highly significant increase (p <0.0001) when compared to the control group, especially in children who are females rather than males who are affected by G6PD deficiency. In addition, the level of magnesium was found to be significantly different (p <0.0001) in children male patients when compared to the control group. On the other side, the level of total protein was found to be significantly high in children patients (p <0.01) when comparing with control group, and the levels of urea, creatinine and glucose were found to be highly significant increase (p <0.001) in patients when comparing to healthy groups, vitamin D levels were significantly lower (p <0.0001) with G6PD deficiency comparing to control group. In conclusion, the low and high significant associations between vitamin D, calcium, magnesium, urea, creatinine, and glucose indicate that more research is needed to better understand their roles in G6PD development.
Austin J. Peters;Saad A. Khan;Seiji Koike;Susan Rowell;Martin Schreiber
Journal of Trauma and Injury
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제36권4호
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pp.354-361
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2023
Purpose: Ketamine has historically been contraindicated in traumatic brain injury (TBI) due to concern for raising intracranial pressure. However, it is increasingly being used in TBI due to the favorable respiratory and hemodynamic properties. To date, no studies have evaluated whether ketamine administered in subjects with TBI is associated with patient survival or disability. Methods: We performed a retrospective analysis of data from the multicenter Prehospital Tranexamic Acid Use for Traumatic Brain Injury trial, comparing ketamine-exposed and ketamine-unexposed TBI subjects to determine whether an association exists between ketamine administration and mortality, as well as secondary outcome measures. Results: We analyzed 841 eligible subjects from the original study, of which 131 (15.5%) received ketamine. Ketamine-exposed subjects were younger (37.3±16.9 years vs. 42.0±18.6 years, P=0.037), had a worse initial Glasgow Coma Scale score (7±3 vs. 8±4, P=0.003), and were more likely to be intubated than ketamine-unexposed subjects (88.5% vs. 44.2%, P<0.001). Overall, there was no difference in mortality (12.2% vs. 15.5%, P=0.391) or disability measures between groups. Ketamine-exposed subjects had significantly fewer instances of elevated intracranial pressure (ICP) compared to ketamine-unexposed subjects (56.3% vs. 82.3%, P=0.048). In the very rare outcomes of cardiac events and seizure activity, seizure activity was statistically more likely in ketamine-exposed subjects (3.1% vs. 1.0%, P=0.010). In the intracranial hemorrhage subgroup, cardiac events were more likely in ketamine-exposed subjects (2.3% vs. 0.2%, P=0.025). Ketamine exposure was associated with a smaller increase in TBI protein biomarker concentrations. Conclusions: Ketamine administration was not associated with worse survival or disability despite being administered to more severely injured subjects. Ketamine exposure was associated with reduced elevations of ICP, more instances of seizure activity, and lower concentrations of TBI protein biomarkers.
Purpose: Recently, the prevalence of eosinophilic gastrointestinal disease (EGID) has shown an increasing trend worldwide. As the diagnosis of EGID requires invasive endoscopy with biopsy, noninvasive markers for detecting EGID in suspected patients, particularly children, are urgently needed. Therefore, this study aimed to evaluate the diagnostic accuracy of serum eosinophil cationic protein (ECP) beyond peripheral eosinophil counts in pediatric patients with EGID. Methods: Overall, 156 children diagnosed with EGID were enrolled and 150 children with functional abdominal pain disorder (FAPD) were recruited as controls. All participants underwent endoscopic biopsy in each segment of the gastrointestinal (GI) tract and serum ECP measurement, as well as peripheral eosinophil percent and absolute eosinophil count. Results: Comparing EGID (n=156) with FAPD (n=150) patients, serum ECP levels were significantly higher in pediatric patients with EGID than in those with FAPD (25.8±28.6 ㎍/L vs. 19.5±21.0 ㎍/L, p=0.007), while there was no significant difference in peripheral eosinophil percent and absolute eosinophil counts between the two groups. Serum ECP levels were correlated with peripheral eosinophil percent (r=0.593, p<0.001) and the absolute eosinophil count (r=0.660, p<0.001). The optimal cutoff value of serum ECP for pediatric EGID was 10.5 ㎍/mL, with a sensitivity of 69.9% and a specificity of 43.4% with an area under the receiver operating characteristic curve of 0.562. Conclusion: The combination of serum ECP levels and peripheral eosinophil counts, when employed with appropriated thresholds, could serve as a valuable noninvasive biomarker to distinguish between EGID and FAPD in pediatric patients manifesting GI symptoms.
Ji-Eun Park;Seung Gee Lee;Seung-Jin Lee;Wook-Joon Yu;Jong-Min Kim
한국발생생물학회지:발생과생식
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제27권4호
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pp.185-193
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2023
Although increasing evidence of cause-and-effect relationship between BPA exposure and female reproductive disorders have been suggested through many studies, the precise biochemical and molecular mechanism(s) by which BPA interferes with steroidogenesis in the ovarian cells still remain unclear. Therefore, the purpose of this study was to discover the steroidogenic biomarker(s) associated with BPA treatment in human granulosa cell line, KGN. In this study, our results obtained via the analysis of steroidogenesis-related protein expression in KGN cells using quantitative polymerase chain reaction (qPCR) and western blot analyses revealed that the expression levels of steroidogenic acute regulatory (StAR) and aromatase decreased considerably and gradually after BPA treatment in a dose-dependent manner under BPA treatment. Further, remarkable decreases in their expression levels at the cellular levels were also confirmed via immunocytochemistry, and subsequent StAR and aromatase mRNA expression levels showed profiles similar to those observed for their proteins, i.e., both StAR and aromatase mRNA expression levels were significantly decreased under BPA treatment at concentrations ≥0.1 μM. We observed that follicle stimulating hormone upregulated StAR and aromatase protein expression levels; however, this effect was suppressed in the presence of BPA. Regarding the steroidogenic effects of BPA on KGN cells, controversies remain regarding the ultimate outcomes. Nevertheless, we believe that the results here presented imply that KGN cells have a good cellular and steroidogenic machinery for evaluating endocrine disruption. Therefore, StAR and aromatase could be stable and sensitive biomarkers in KGN cells for the cellular screening of the potential risk posed by exogenous and environmental chemicals to female reproductive (endocrine) function.
Hafez, Mohamed M.;Al-Shabanah, Othman A.;Al-Rejaie, Salim S.;Al-Harbi, Naif O.;Hassan, Zeinab K.;Alsheikh, Abdulmalik;Theyab, Abdurrahman I. Al;Aldelemy, Meshan L.;Sayed-Ahmed, Mohamed M.
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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제16권2호
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pp.541-549
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2015
Triple negative breast cancer (TNBC) is an aggressive subtype of breast cancer (BC) with higher metastatic rate and both local and systemic recurrence compared to non-TNBC. The generation of reactive oxygen species (ROS) secondary to oxidative stress is associated with DNA damage, chromosomal degradation and alterations of both hypermethylation and hypomethylation of DNA. This study concerns differential methylation of promoter regions in specific groups of genes in TNBC and non-TNBC Saudi females in an effort to understand whether epigenetic events might be involved in breast carcinogenesis, and whether they might be used as markers for Saudi BCs. Methylation of glutathione S-transferase P1 (GSTP1), T-cadherin (CDH13), Paired box protein 5 (PAX5), death associated protein kinase (DAPK), twist-related protein (TWIST), DNA-binding protein inhibitor (ID4), High In Normal-1 (HIN-1), cyclin-dependent kinase inhibitor 2A (p16), cyclin D2 and retinoic acid receptor-${\beta}$ ($RAR{\beta}1$) genes was analyzed by methylation specific polymerase chain reaction (MSP) in 200 archival formalin-fixed paraffin embedded BC tissues divided into 3 groups; benign breast tissues (20), TNBC (80) and non-TNBC (100). The relationships between methylation status, and clinical and pathological characteristics of patients and tumors were assessed. Higher frequencies of GSTP1, ID4, TWIST, DAPK, PAX5 and HIN-1 hypermethylation were found in TNBC than in non-TNBC. Hypermethylation of GSTP1, CDH13, ID4, DAPK, HIN-1 and PAX5 increased with tumor grade increasing. Other statistically significant correlations were identified with studied genes. Data from this study suggest that increased hypermethylation of GSTP1, ID4, TWIST, DAPK, PAX5 and HIN-1 genes in TNBC than in non-TNBC can act as useful biomarker for BCs in the Saudi population. The higher frequency of specific hypermethylated genes paralleling tumor grade, size and lymph node involvement suggests contributions to breast cancer initiation and progression.
흰쥐를 대상으로 하여 식이 단백질 수준에 따라 칼슘 수준을 달리하여 식이를 공급하여 칼슘 식이효율, 칼슘대사와 관련된 호르몬, 대퇴골의 무게 및 칼슘 함유량, 골밀도를 측정하였다. 실험 식이의 구성은 \circled1 HPNC군-고단백 적정칼슘군(Protein: 400 g/kg diet, calcuim: 0.5%) \circled2 HPLC군-고단백 저칼슘군(Protein: 400 g/kg diet, calcium: 0.1%) \circled3 NPNC군-적정 단백 적정 칼슘군 protein: 200 g/kg diet, calcium: 0.5%) \circled4 NPLC군-적정단백 저칼슘군(protein: 200 g/kg diet, calcium: 0.1%)으로 구별하였다. 실험 종료까지의 체중은 NPLC군에서 가장 많이 증가하였으나, 실험군간의 차이를 나타내지 않았고, 식이 섭취량도 실험군간에 차이를 보이지 않았다. 뇨 칼슘배설량은 고단백군이 적정단백군보다 높은 경향을 나타내었고, HPLC군에서 유의적으로 높은 값을 보였으며 체내 칼슘보유량과 흡수율은 실험군에 따른 차이가 없었다. 뼈형성의 biomarker인 ALP의 활성은 저칼슘 식이군인 NPLC군에서 유의하게 높았고, 고단백 적정칼슘을 섭취한 HPNC군에서 유의적으로 낮았다. 혈액의 PTH 농도는 HPLC군에서 가장 낮게 나타났으며, 소변의 DPD농도는 저칼슘 식이군인 HPLC군과 NPLC군에서 높은 수치로 관찰되었고, HPNC군에서는 유의적으로 낮아졌다. 대퇴골의 건조 전의 습윤무게는 중 100 g당의 무게로 환산했을 때 NPLC군에서 가장 낮았으며 건조 후의 대퇴골의 무게 역시 다른군에 비해 NPLC군에서 가장 낮았다. 대퇴골의 회분 함량은 실험군간의 큰 차이를 나타내지 않았고, 칼슘 함량은 NPLC군과 HPLC군에서 유의하게 낮았다. 대퇴골의 골밀도는 NPNC군에서 가장 높게 나타났으며, NPC군은 가장 낮게 나타났다. 본 연구결과 고단백 저칼슘 식이 섭취시 요중 칼슘 배설량이 가장 많았고, DPD 농도가 다른 군에 비하여 유의적으로 높았으며, 골밀도도 가장 낮게 조사되어 고단백식이 섭취시 칼슘섭취 부족은 칼슘대사에 좋지 못한 결과를 나타냄을 알 수 있었다.이로 볼 때 적절한 단백질과 칼슘 섭취가 골격의 건강을 유지하고 노령화에 따른 골격질환을 예방할 수 있고, 특히 고단백 섭취시에는 칼슘영 양이 부족할 경우 골격 대사를 저해할 수 있으므로 충분한 칼슘 섭 취가 무엇보다도 중요하다고 본다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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