Kim, Won-Ho;Cho, Kyoung-Won;Jung, In-Su;Choi, Keum-Hwa;Hur, Byung-Ki;Kim, Geun-Joong
한국생물공학회:학술대회논문집
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한국생물공학회 2003년도 생물공학의 동향(XIII)
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pp.815-820
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2003
A huge database resulted from whole genome sequencing has provided a possibility of new information that is likely to extent the scope and thus changes the way of approach for the functional assigning of putative open reading frames annotated by whole genome sequence analyses. These are mainly realized by ease, one-step identification of putative genes using genomics or proteomics tools. A major challenge remained in biotechnology may translate these informations into better ways to screen or select a gene as a representative sequence. Further attempts to mine the related whole genes or partial DNA fragment from whole genome treasure, and then the incorporation of these sequences into a representative template, will result in the use of putative genes that can be translated into functional proteins or allowed the generation of new lineages as a valuable pool. Such screens enable rapid biochemical analysis and easy isolation of the target activity, thereby accelerating the screening of novel enzymes from the expanded library with related sequences. Information-based PCR amplification of whole genes and reconstitution of functional DNA fragments will provide a platform for expanding the functional spaces of potential enzymes, especially when used mixed- or metagenome as gene resources.
본 연구는 proteomics의 방법을 이용하여 가금의 육질과 관련된 단백질을 찾고자 수행하였다. 인삼부산물을 급이한 실용재래계와 대조구와의 비교에서 육질과 관련된 3개의 후보 단백질이 이 연구를 통해 밝혀졌다. 이 유전자들은 tropomyosin, triosephosphate isomerase와 한 개의 기능이 밝혀지지 않은 단백질이었다. 각각의 기능을 살펴볼 때 이 유전자들은 근육의 성장과 면역의 증강에 관여하며 이 결과는 인삼부산물을 이용하여 가금의 육질을 향상시키는 단백질 마커로 중요하게 이용이 될 수 있을 것으로 추정된다.
Kim, Heeyoun;Lee, Inhwan;Han, Jeongmin;Cheong, Hae-kap;Kim, Eunhee;Lee, Weontae
한국자기공명학회논문지
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제19권2호
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pp.83-87
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2015
Syndesmos, which is co-localized with syndecan-4 cytoplasmic domain ($Syn4^{cyto}$) in focal contacts, interacts with various cell adhesion adaptor proteins including $Syn4^{cyto}$ to control cell signaling. Syndesmos consists of 211 amino acids and it exists as a dimer (44kDa) in solution. Recently, we have determined the structure of syndesmos by x-ray crystallography, however, dynamics related to syndecan binding still remain elusive. In this report, we performed NMR experiments to acquire biochemical and structural information of syndesmos. Based on a series of three-dimensional triple resonance experiments on a $^{13}C/^{15}N/^2H$ labeled protein, NMR spectra were obtained with well dispersed and homogeneous NMR data. We present the sequence specific backbone assignment of syndesmos and assigned NMR data with combination structural information can be directly used for the studies on interaction with $Syn4^{cyto}$ and other binding molecules.
Because of high growth rate and large deposition of fat in the abdomen, the chicken has been used as a model organism for understanding lipid metabolism, fattening and growing. In this study, differentially expression of proteins in chicken liver, one of the important organs for lipid metabolism, has been investigated at four different growing stages. After separation of proteins using two-dimensional electrophoresis (2-DE), more than 700 protein spots were detected. Among them, 13 growing stage specific proteins in chicken liver were selected and further investigated by matrix-assisted laser adsorptions ionization-time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS). Of these, 12 proteins were matched to existing proteins based on a database search. The identified fat-related proteins in this study were fatty acid synthase (FASN) and malic enzyme (ME1). These proteins were more highly expressed at week 32 than at other weeks. In order to confirm the differential expression, one of the proteins, FASN, was confirmed by western blotting. The identified proteins will give valuable information on biochemical roles in chicken liver, especially for lipid metabolism.
Journal of information and communication convergence engineering
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제10권2호
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pp.210-214
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2012
A microtiter well plate DNA hybridization method using Mycobacterium kansasii-specific rpoB DNA probe (kanp) were evaluated for the detection of M. kansasii from culture isolates. Among the 201 isolates tested by this method, 27 strains show positive results for M. kansasii, but the other 174 isolates were negative results for M. kansasii. This result was consistent with partial rpoB sequence analysis of M. kansasii and the result of biochemical tests. The negative strains by this DNA-DNA hybridization method were identified as Mycobacterium tuberculosis (159 strains), Mycobacterium avim (5 strains), Mycobacterium intracellulare (8 strains), and Mycobacterium flavescens (2 strain) by rpoB DNA sequence analysis. Due to high sensitivity and specificity of this test result, we suggest that DNA-DNA hybridization method using rpoB DNA probes of M. kansasii could be used for the rapid and convenient detection of M. kansasii.
DNA-DNA hybridization method with four oligonucleotide-specific probes was used simultaneously for differentiation and identification of four Mycobacterium species (Mycobacterium tuberculosis, M. avium, M. intracellulare, and M. kansasii). This DNA-DNA hybridization method with 4 oligonucleotide-specific probes, which targets in the rpoB region of 4 Mycobacteria species, respectively, was tested on 322 clinical isolates. Using DNA-DNA hybridization method, we detected M. tuberculosis (282 strains), M. avim (7 strains), M. intracellulare (9 strains), and M. kansasii (3 strain) from 322 clinical isolates. This result was compared with conventional biochemical test and rpoB DNA sequence analysis of this clinical isolates. We confirmed identification of Mycobacterium tuberculosis, M. avium, M. intracellulare, and M. kansasii with high sensitivity (100 %) and specificity (100 %). This DNA-DNA hybridization method could be performed within 4 hours at least. Therefore, we suggest that DNA- DNA hybridization method using 4 rpoB DNA probes of Mycobacteria could be used for accurate, rapid, convenient detection and identification of Mycobacterium tuberculosis, M. avium, M. intracellulare, and M. kansasii in clinical samples.
Completion of the human genome project has allowed a deeper understanding of molecular pathophysiology and has provided invaluable genomic information for the diagnosis of genetic disorders. Advent of new technologies has lead to an explosion in genetic testing. However, this overwhelming stream of genetic information often misleads physicians and patients into a misguided faith in the power of genetic testing. Moreover, genetic testing raises a number of ethical, legal, and social issues. Diagnostic genetic tests can be divided into three primary but overlapping categories: cytogenetic studies (including routine karyotyping, high-resolution karyotyping, and fluorescent in situ hybridization studies), biochemical tests, and DNA-based diagnostic tests. DNA-based testing has grown rapidly over the past decade and includes preandpostnatal testing for the diagnosis of genetic diseases, testing for carriers of genetic diseases, genetic testing for susceptibility to common non-genetic diseases, and screening for common genetic diseases in a particular population. Theoretically, once a gene's structure, function, and association with a disease are well established, the clinical application of genetic testing should be feasible. However, for routine applications in a clinical setting, such tests must satisfy a number of criteria. These criteria include an acceptable degree of clinical and analytical validity, support of a quality assurance program, possibility of modifying the course of the diagnosed disease with treatment, inclusion of pre-and postnatal genetic counseling, and determination of whether the proposed test satisfies cost-benefit criteria and should replace or complement traditional tests. In the near future, the application of genetic testing to common diseases is expected to expand and will likely be extended to include individual pharmacogenetic assessments.
Cellulases are a group of biocatalyst enzymes that are capable of degrading cellulosic biomass present in the natural environment and produced by a large number of microorganisms, including bacteria and fungi, etc. In the current study, we isolated, screened and characterized cellulase-producing bacteria from soil. Three cellulose-degrading species were isolated based on clear zone using Congo red stain on carboxymethyl cellulose (CMC) agar plates. These bacterial isolates, named as HB2, HS5 and HS9, were subsequently characterized by morphological and biochemical tests as well as 16S rRNA gene sequencing. Based on 16S rRNA analysis, the bacterial isolates were identified as Bacillus cerus, Bacillus subtilis and Bacillus stratosphericus. Moreover, for maximum cellulase production, different growth parameters were optimized. Maximum optical density for growth was also noted at pH 7.0 for 48 h for all three isolates. Optical density was high for all three isolates using meat extract as a nitrogen source for 48 h. The pH profile of all three strains was quite similar but the maximum enzyme activity was observed at pH 7.0. Maximum cellulase production by all three bacterial isolates was noted when using lactose as a carbon rather than nitrogen and peptone. Further studies are needed for identification of new isolates in this region having maximum cellulolytic activity. Our findings indicate that this enzyme has various potential industrial applications.
Han, Seunghee;Muller, Markus G.;Kang, Seunghee;Kang, Haejin
한국의학물리학회지:의학물리
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제12권1호
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pp.79-94
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2001
생물학적 조직(Biological Tissue)에서 얻어내는 형광(Fluorescence)은 산란(Scattrering), 흡수(Absorption), 그리고 형광체(Fluorophores)가 원인이 되는, 인트린식 형광(Intrinsic Fluorescence)들에 관한 정보를 갖고 있다. 생물학적 조직의 형광스펙트럼은 조직 내에 존재하는 흡수체(Absorber)와 산란물질(Scatters)들의 영향을 받기 때문에 다른 조직의 생화학적인 인트린식 형광을 선형적인 조합으로 해석할 수 없었다. 생물학적 조직 같은 터비드 매질(Turbid Media)로부터 실험적으로 형광을 얻어서 산란과 흡수의 영향을 조사하기 위하여 본 연구소에서 제작한 장치를 소개하고, 넓은 범위의 흡수체와 산란물질의 농도를 갖고 제작한 조직 팬텀(Tissue Phantom)에 대한 형광과 반사(Reflectance) 스펙트럼을 측정하였다. 형광스펙트럼에 존재하는 산란과 흡수의 왜곡(Distortion)을 제거하기 위하여, 반사스펙트럼에 포함된 산란과 흡수 정보를 이용하는 ‘광자 이동 모델(Photon Migration Model)’을 적용하였고, 이러한 조직모델에 대한 인트린식 형광을 얻었다 연구 결과, 모델 값과 실제 인트린식 형광 스펙트럼이 훌륭하게 일치함을 확인하였다. 이런 연구를 하게된 동기는, 인간의 조직이 병들어서 진화하면 조직의 생화학적 구성의 변화가 발생하고 이때 인트린식 형광의 변화가 생기기 때문이다 결론적으로, 조직에 대한 실시간 광학적 생검에서 병든 조직과 정상조직을 단지 형광스펙트럼만으로 구분하는 것은 어렵지만, 인트린식 형광을 이용하면 가능하다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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