The recently isolated aniline-degrading bacterium Pseudomonas migulae AN-1 was tagged with green fluorescent protein (GFP) to investigate its bioaugmentation potential against aniline-contaminated groundwater through microcosm experiments. The survival and cellular response of GFP-tagged AN-1 introduced in a lab-scale aquifer corresponded directly with aniline consumption. During the process, the GFP-tagged AN-1 biomass increased from 7.52 × 105 cells/ml to 128 × 105 cells/ml and the degradation rate of aniline was 6.04 mg/l/h. GFP-tagged AN-1 was moderately hydrophobic (41.74%-47.69%) when treated with 20-100 mg/l aniline and exhibited relatively strong hydrophobicity (55.25%-65.78%) when the concentration of aniline was ≥100 mg/l. The membrane permeability of AN-1 increased followed by a rise in aniline below 100 mg/l and was invariable with aniline above 100 mg/l. Pyrosequencing analysis showed that the relative abundance of Proteobacteria (accounted for 99.22% in the non-bioaugmentation samples) changed to 89.23% after bioaugmentation with GFP-tagged AN-1. Actinobacteria increased from 0.29% to 2.01%, whereas the abundance of Firmicutes barely changed. These combined findings demonstrate the feasibility of removing aniline in aquifers by introducing the strain AN-1 and provide valuable information on the changes in the diversity of dominant populations during bioaugmentation.
3가지 종류의 생물정화법인 natural attenuation (NA), biostimulation (BS) 및 bioaugmentation (BA) 방법을 디젤로 오염된 토양을 정화하기 위해 적용하여, 각 방법에 의한 정화효율과 미생물 활성을 계면활성제 첨가 유무(Tween 80)에 따라 비교하였다. 토양 정화 초기 단계에서는 Rhodococcus sp. EH831을 접종원으로 이용하는 BA 방법에 의한 토양 정화효율이 가장 좋았다. 3가지 생물정화방법 모두에서 계면활성제 첨가는 토양 정화효율에 영향을 미치지 않았다. 토양의 탈수소활성(DHA)과 잔류 총석유계탄화수소(TPHs) 농도는 음의 상관관계를 보였다: DHA (${\mu}g-TPF{\cdot}g$-dry $soil^{-1}\;d^{-1}$) = -0.02 ${\times}$ TPHs concentration ($mg-TPHs{\cdot}kg$-dry $soil^{-1}$) + 425.76 (2500 ${\leq}$ TPHs concentration ${\leq}$ 20000, p < 0.01).
In order to improve reactor performance of existing sewage treatment plants, the feasibility of enhancing reactor performance by bioaugmentation using EM as bioaugmentation agent and the effects of anoxic: oxic time ratio on reactor performance were investigated. Continuous and intermittent aeration modes were compared under the 6 hr of HRT. Three different types of intermittent aeration modes, that is, 15 min, of anoxic:45 min of oxic, 30 min of anoxic: 30 min of oxic, and 45 min of anoxic: 15 min oxic respectively were chosen as test modes to study the effects of anoxic : oxic time ratios on reactor performance. The optimum anoxic: oxic time ratio was 30 min:30 min when considering simultaneous removal of organic, nitrogen and phosphorus. When applying EM into a continuously aerated reactor under the varying dosing rates of 50-200 ppm, reactor performance in terms of organic and nitrogen removal efficiencies was not improved at all. Nitrogen removal efficiency was increase when the EM dosing rate was increased. However the degree of improvement was slight when the EM was injected above 100 ppm. However optimum phosphorus removal was found at the EM dosing of 200 ppm. Thus it was found that optimum injection concentration of EM is 200 ppm. It is apparent that putting EM into a sewage treatment plant significantly affects the T-N removal efficiency of the reactor by enhancing denitrification efficiency especially in operational conditions of relatively long anoxic periods. To achieve reciprocal condition in a reactor with intermittent aeration it is necessary to enhance the reactor performance by EM injection. In the case of modifying existing continuously aerated reactors into intermittent aerated reactors, it is obvious that operating costs of aeration would be reduced by reducing aeration time when compared with existing conventional sewage treatment plants.
This study presents a mathematical model for simulating the fate and transport of a reactive organic contaminant degraded through cometabolism in dual-porosity soils during the in situ bioaugmentations. To investigate the effect of dual-porosity on transport and biodegradation of organic hydrocarbons, a bimodal approach was incorporated into the model. Modified Monod kinetics and a microcolony concept [Molz et at., 1986〕 were employed to represent the effects of biodegrading microbes on the transport and biodegradation of an organic contaminant. The effect of permeability reduction due to biomass accumulation on the flow field were examined in the simulation of a hypothetical field-scale in situ bioaugmentation. Simulation results indicate that the presence of the immobile region can decrease the bioavailablity of biodegradable contaminants and that the placement of microbes and nutrients injection wells should be considered for an effective in situ bioaugmentation scheme.
본 연구의 목표는 생물담체(biocarrier)에 의한 생물접종기술(bioaugmentation)을 개발하여 원유로 오염된 해양저질의 정화에 활용하고자 하는 것이다. 몇 군데의 원유로 오염된 해안으로부터 수 가지의 분해미생물군집을 농화배양하여 평가한 결과 기능적으로 상이한 2가지의 미생물군집을 분리하였다. 이들 미생물군집을 혼합 배양한 경우 Alcanivorax sp.가 우점종을 이루는 것으로 나타났으며, 이 군집과 대나무활성탄 등을 이용하여 미생물제제(MA-2)를 제조하여 사질의 원유오염 해안토양에 처리할 경우 5주 후 산소발생제의 존재하에 90% 이상의 TPH 분해력을 나타내었다. 또한 점질의 토양도 미생물제제(MA-1)를 처리할 경우 5주 후 71% 정도의 분해율을 나타냈다. 이는 분리된 토착미생물군집을 활용하여 오염토양의 처리에 효과적으로 활용할 수 있음을 의미한다. 한편 계면활성제의 고농도의 처리는 분해미생물의 작용을 억제하므로 적절한 농도의 확인이 필요하며 점토질의 토양의 정화를 위해서는 적절한 통기를 시키는 방법(산소발생제 투여, 기계적 aeration 등)의 활용이 요구된다.
The mature landfill leachate, which is characterized by a high concentration of ammonia nitrogen ($NH_3$-N) and humic acid (HA), poses a challenge to biotreatment methods, due to the constituent toxicity and low biodegradable fraction of the organics. In this study, we applied bioaugmentation technology in landfill leachate degradation by introducing a domesticated $NH_3$-N and HA resistant bacteria strain, which was identified as Bacillus cereus (abbreviated as B. cereus Jlu) and Enterococcus casseliflavus (abbreviated as E. casseliflavus Jlu), respectively. The isolated strains exhibited excellent tolerant ability for $NH_3$-N and HA and they could also greatly improved the COD (chemical oxygen demand), $NH_3$-N and HA removal rate, and efficiency of bioaugmentation degradation of landfill leachate. Only 3 days was required for the domesticated bacteria to remove about 70.0% COD, compared with 9 days' degradation for the undomesticated (autochthonous) bacteria to obtain a similar removal rate. An orthogonal array was then used to further improve the COD and $NH_3$-N removal rate. Under the optimum condition, the COD removal rate in leachate by using E. casseliflavus Jlu and B. cereus Jlu increased to 86.0% and 90.0%, respectively after, 2 days of degradation. The simultaneous removal of $NH_3$-N and HA with more than 50% and 40% removal rate in leachate by employing the sole screened strain was first observed.
This study was conducted to evaluate the slurping process affecting the variation of free product and VOCs concentration and the bioaugmentation effect on bioremediation process. Free products and soil gas were extracted from 30 extraction wells installed in a petroleum contaminated area. The extraction system was operated for 10 hours per day with 1 hour on-and-off mode. The thickness of free product in extraction well was decreased from 11.7 cm to 4.5 cm and the VOCs concentration was increased from 10.37 ppm to 30.78 ppm during the operation period. After the slurping process for 2 months, contaminated soil was treated with bioremediation process in 2 cells, $15{\times}40$ m, biologically enhanced with adjusting oxygen, moisture and nutrients concentration. Total 1,400 L of microbial inoculant, Naturesys. (Dong Myung Ent. Co.) was added to the pile B, which has an outstanding ability for degrading petroleum hydrocarbons. The results showed that bioremediaton effect in soil with the microorganisms solution is 33% higher than that in soil with only residual bacteria.
Crowley, David E.;Luepromchai, Ekawan;Singer, Andrew S.;Yang, Chang Sool
한국미생물생명공학회:학술대회논문집
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한국미생물생명공학회 2000년도 Proceedings of 2000 KSAM International Symposium and Spring Meeting
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pp.100-107
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2000
In a recently developed strategy for in-situ treatment of polychlorinated biphenyls (PCB), bioaugmentation was used in conjunction with a surfactant, sorbitan trioleate, as a carbon source for the degrader bacteria, along with the monoterpene, carvone, and salicylic acid as inducing substrates. Two bacteria were used for soil inoculants, including Arthrobacter sp. st. B1B and Ralstonia eutrophus H850. This methodology achieved 60% degradation of PCBs in Aroclor 1242 after 18 weeks in soils receiving 34 repeated applications of the degrader bacteria. However, an obvious limitation was the requirement for soil mixing after every soil inoculation. In the research reported here, bioaugmentation and biostimulation treatment strategies were modified by using the earthworm, Pheretima hawayana, as a vector for dispersal and mixing of surface-applied PCB-degrading bacteria and soil chemical amendments. Changes in microbial biomass and microbial community structure due to earthworm effects were examined using DNA extraction and PCR-DGGE of 16S rDNA. Results showed that earthworms effectively promoted biodegradation of PCBs in bioaugmented soils to the same extent previously achieved using physical soil mixing, and had a lesser, but significant effect in promoting PCB biodegradation in biostimulated soils treated with carvone and salicylic acid. The effects of earthworms were speculated to involve many interacting factors including increased bacterial transport to lower soil depths, improved soil aeration, and enhanced microbial activity and diversity.
Anaerobic digestion (AD) has been widely used to valorize food waste (FW) because of its ability to convert organic carbon into $CH_4$ and $CO_2$. Korean FW has a high content of fruits and vegetables, and efficient hydrolysis of less biodegradable fibers is critical for its complete stabilization by AD. This study examined the digestates from different anaerobic digesters, namely Rs, Rr, and Rm, as the inocula for the AD of vegetable waste (VW) and cellulose (CL): Rs inoculated with anaerobic sludge from an AD plant, Rr inoculated with rumen fluid, and Rm inoculated with anaerobic sludge and augmented with rumen fluid. A total of six conditions ($3\;inocula{\times}2\;substrates$) were tested in serial subcultures. Biogas yield was higher in the runs inoculated with Rm than in the other runs for both VW (up to 1.10 L/g VS added) and CL (up to 1.05 L/g VS added), and so was biogas production rate. The inocula had different microbial community structures, and both substrate type and inoculum source had a significant effect on the formation and development of microbial community structures in the subcultures. The overall results suggest that the bioaugmentation with rumen microbial consortium has good potential to enhance the anaerobic biodegradability of VW, and thereby can help more efficiently digest high fiber-content Korean FW.
Rusted iron could retain activity to redox-sensitive pollutants in batch reactor. Flow-through columns packed with permeable reactive iron filings (Fe$^{0}$ ) between soil and sand layers were used to evaluate the applicability of bio-enhanced iron barriers to treat explosives-contaminated groundwater. One column was bioaugmented with municipal anaerobic sludge to evaluate the enhancement of biodegradation. Military contaminants (RDX, HMX, TNT, 2,4DNT, 2,6DNT), which coexist in soils at military sites, were completely removed in the bioaugmented Fe$^{0}$ layer after 8 months of operation. Overall, this research suggests that Fe$^{0}$ barriers can effectively clean up groundwater contaminated with military explosives, and that treatment efficiency can be enhanced by bioaugmentation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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