• Applied Biological Chemistry
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• 제51권3호
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• pp.159-163
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• 2008

Sephadex G-100 column chromatography에 의해 Xylogone sphaerospora 유래 ${\beta}$-mannanase의 정제를 수행하여 비활성 8.44 units/ml, 정제배율 56.27을 나타내었다. SDS-PAGE에 의한 단일밴드를 확인하였고, 분자량은 42kDa으로 결정되었다. 정제효소에 의해 konjac glucomannan을 가수분해하여 activated carbon column chromatograph)에 의해 당가수분해물을 분리 회수하여 TLC에 의해 주요 당가수분해물은 합도 3과 4의 hetero type으로 확인되었으며 D.P. 3과 4의 예상되는 구조는 본 연구실에서 확보하고 있는 standard glucomannooligosaccharides에 의한 TLC에서 나타나는 Rf value 상으로 1차적으로 확인하고, Aspergillus niger 5-16 유래 정제 ${\beta}$-mannanase를 단계적으로 처리하여 가수분해 pattern을 TLC로 해석한 결과 D.P. 3의 구조식은 비환원말단 mannose로 부터 2번째에 1분자의 glucose가 결합하고 있는 hetero type의 구조(M-G-M)로, D.P. 4의 구조식은 비환원말단 mannose로부터 3번째에 1분자의 glucose가 결합하고 있는 hetero type의 구조(M-M-G-M)로 예상하고 있다. B. longumm, B. bifidum, B. infantis, B. adolescentis, B. animalis, B. auglutum, B. breve의 생육활성에 대한 중합도 3과4의 영향을 검토하기 위하여 modified-MRS 배지 상에 탄소원으로 중합도 3과 4를 대체하여 생육활성을 비교한 결과 B. longum에서는 D.P 4 glucomannooligosaccharide를 탄소원으로 대체한 경우 표준 MRS배지와 비교하여 3.9배의, D.P. 3을 처리한 경우에도 2.7배의 상대 활성을 나타내어 가장 우수한 생육활성을 나타냈었으며, B. breve의 경우에서도 D.P 4에서 2.47배, D.P 3에서 2.08배의 활성을 나타내었으며 B. bifidum에 있어서는 D.P. 4의 경우 2.8배의 상대활성을 나타내었다. Bifidobacterium 7균주 모두에 대해서 중합도 4의 올리고당이 중합도 3의 올리고당보다 생육활성에 크게 기여하는 것으로 나타났다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제29권3호
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• pp.410-418
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• 2019

To investigate a novel ${\beta}$-glucosidase from Bifidobacterium breve ATCC 15700 (BbBgl) to produce compound K (CK) via ginsenoside $F_2$ by highly selective and efficient hydrolysis of the C-3 glycoside from ginsenoside Rd, the BbBgl gene was cloned and expressed in E. coli BL21. The recombinant BbBgl was purified by Ni-NTA magnetic beads to obtain an enzyme with specific activity of 37 U/mg protein using pNP-Glc as substrate. The enzyme activity was optimized at pH 5.0, $35^{\circ}C$, 2 or 6 U/ml, and its activity was enhanced by $Mn^{2+}$ significantly. Under the optimal conditions, the half-life of the BbBgl is 180 h, much longer than the characterized ${\beta}$-glycosidases, and the $K_m$ and $V_{max}$ values are 2.7 mM and $39.8{\mu}mol/mg/min$ for ginsenoside Rd. Moreover, the enzyme exhibits strong tolerance against high substrate concentration (up to 40 g/l ginsenoside Rd) with a molar biotransformation rate of 96% within 12 h. The good enzymatic properties and gram-scale conversion capacity of BbBgl provide an attractive method for large-scale production of rare ginsenoside CK using a single enzyme or a combination of enzymes.

• 한국식품영양과학회지
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• 제33권7호
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• pp.1186-1191
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• 2004

DEAE-sephadex ion exchange column chromatography에 의해 Bacillus sp. 유래 h-mannanase의 정제를 수행하여 비활성은 21.57 units/mg, 정제배율은 93.78배를 나타내었다. 최적 온도는 5$0^{\circ}C$, 최적 pH는 6.0이며, 온도 안정성에서는 30∼5$0^{\circ}C$에서는 90%이상의 잔존활성을 나타내었고,70∼8$0^{\circ}C$에서는 30%이하의 잔존활성을 나타내었다. pH 안정성에서는 pH 5.5∼7.0에서 100%의 잔존활성을 나타낸 반면 pH 2.0∼4.0에서는 40%이하로 감소되 었다. 정제효소에 의해 konjac glucomannan을 가수분해하여 1차 activated carbon column chromatography와 2차 sephadex G-25 gel filtration 에 의해 당가수분해물을 분리 회수하여 TLC및 FACE에 의해 주요 당가수분해물은 중합도 5와 7로 확인되었다. B. iongum, B. btfidum, B. infantis, E. adolescentis, B. animalis, B. breve의 생육활성에 대한 중합도5와7의 영향을 검토하기 위하여 modified-MRS배지상에 탄소원으로 중합도 5와 7을 대체하여 생육활성을 비교한 결과 B. longum의 경우 특징적으로 각각 4.67, 5.33배의 상대활성을 나타내어 우수한 생육활성을 나타내었다. 또한 B. breve에 대해서는 중합도 5 glucomannooligosaccharide를 처리시 2.42배의 생육활성을 나타내었으나 B. infantis와 B. adolescentis에 대해서는 중합도 5와 7의 올리고당을 탄소원으로 대체시 오히려 생육활성이 현저히 감소되었다.

• 한국생물공학회:학술대회논문집
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• 한국생물공학회 2005년도 생물공학의 동향(XVI)
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• pp.304-304
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• 2005

• 한국축산식품학회:학술대회논문집
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• 한국축산식품학회 1998년도 추계학술발표회
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• pp.41-57
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• 1998

Five hundreds of bifidobacteria were isolated from an healthy Korean and the inhibitory effects of these isolated bacteria on harmful enzymes of human intestinal microflora were examined by cocultivation of the isolated bifidobacteria with E. coli HGU-3 or total human intestinal microflora. In comparison with the results of E. coli or intestinal microflora cultivation, Bifidobacterium breave K-110, B. breve K-111 and B. infantis K-525 effectively inhibited harmful enzymes (${\beta}-glucuronidase$ and tryptophanase) of E. coli and lowered the pH of the culture media. Also they inhibited the harmful enzymes (${\beta}-glucosidase$, ${\beta}-glucuronidase$, tryptophanase and urease) and ammonia production of intestinal microflora, and lowered pH of the culture media by increasing the number of bifidobateria on intestinal microflora. The inhibitory effect of bifidobacteria on Growth of Helicobacter pylori and Rotavirus infection were exammed. Bifidobacterium K-110 and K-111 inhibited effectively them. When these isolated bifidobacteria were administered to mice, the activities of fecal harmful enzymes were inhibited and the AC and ACF formation were suppressed. Among tested bifidobacteria, B. breve K-110 had high inhibitory effect of fecal harmful enzymes and ACF formation.

• Preventive Nutrition and Food Science
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• 제20권1호
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• pp.78-81
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• 2015

1,4-Dihydroxy-2-naphthoic acid (DHNA) is a bifidogenic growth stimulator (BGS) and could be a functional food ingredient since bifidobacteria are beneficial for human health. For that reason, lactic acid bacteria producing DHNA have been screened. A lactic acid bacterium LP1 strain isolated from a natural cheese was confirmed to produce DHNA, analyzed by a HPLC method. The strain was identified as Lactobacillus casei by 16S rRNA gene sequence analysis. The cell-free supernatant of fermented whey produced by L. casei LP1 presented the BGS activity for three bifidobacterial strains such as Bifidobacterium longum subsp. infantis KCTC 3127, Bifidobacterium bifidum KCTC 3202, and Bifidobacterium breve KCTC 3220 which were human-originated. To the best of our knowledge, a L. casei strain which can produce DHNA was firstly identified in this study.

• 한국식품과학회지
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• 제28권5호
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• pp.947-952
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• 1996

버섯이 유산균 증식 효과를 측정한 결과 대부분의 버섯이 B. breve에 대한 증식 효과와 배양배지의 pH 저하 효과가 우수했으며 식용버섯 중에서는 표고버섯, 운지버섯, 영지버섯, 느타리버섯이 우수했다. 사람 및 흰쥐의 장내 세균을 버섯추출물 함유 배지에서 배양시 배지의 pH 저하 효과가 우수한 표고버섯, 운지버섯, 양송이버섯은 장내유산균을 선택적으로 증식시켰다. B. breve 배양시 버섯추출물의 첨가는 균의 성장을 촉진하였으며 ${\beta}-glucosidase$의 효소 활성을 억제하였으며, 이는 배양배지의 pH 저하 효과와 비례하였다. 표고버섯, 영지버섯, 운지버섯은 사람 및 흰쥐의 장내 세균총 효소인 ${\beta}-glucosidase$ 및 tryptophanase 효소 활성을 억제하였으며 pH 저하 효과와 비례하였다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제26권5호
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• pp.442-449
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• 1998

CGTase를 이용한 당전이 xylitol의 합성과 당전이 xylitol의 비피더스균 생육증식 효과에 대한 연구를 수행하였다. 수종의 세균류가 분비하는 CGTase의 xylitol에 대한 당전이능을 비교하였으며, Thermoanaerobacter sp. 유래의 CGTase가 가장 우수한 당전이능을 보였다. 각종 당공여체를 검토한 결과 압출전분이 가장 우수한 결과를 보였으며, 당전이 효소반응의 최적 조건을 검토하였다. 생성된 당전이 xylitol을 활성탄-셀라이트 칼럼 크로마토그래피를 이용하여 분리하여 두 개의 fraction인 F-I, F-II를 얻었다. 이들의 당쇄결합 양상을 FAB mass spectrometer와 $^{13}$C-NMR spectrometer, 그리고 glucoamylase을 이용한 효소소화법을 이용하여 분석한 결과 xylitol에 glucose와 maltose 분자가 $\alpha$-1,4 결합되어 있는 것으로 유추되었다. 얻어진 당전이 xylitol은 xylitol과는 달리 Bifidobacterium breve에 대한 생육촉진효과를 보였다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제32권2호
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• pp.117-122
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• 2004

DEAE-sephadex ion exchange column chromatography에 의해 Bacillus sp. 유래 $\beta$-mannanase 의정제를 수행하여 비활성 21.57 units/$m\ell$, 정제배율 95.33을 나타내었다. SDS-PAGE에 의한 단일밴드를 확인하였고, 분자량은 38.9 kDa으로 결정되었다. 정제효소에 의해 guar gum galactomannan을 가수분해하여 1차 activated carbon column chromatography 와 2차 Sephadex G-25 gel filtration에 의해 당가수분해물을 분리 회수하여 TLC 및 FACE 에 의해 주요 당가수분해물은 중합도 5와 7로 확인되었다. B. longum B. bifidum, B. infantis, B. adolescentis, B. animalis, and B. breve의 생육활성에 대한 중합도 5와 7의 영향을 검토하기 위하여 modified-MRS 배지상에 탄소원으로 중합도 5와 7을 대체하여 생육활성을 비교한 결과 B. longum 에서는 중합도 5 galactomannooligosaccharide를 탄소원으로 대체한 경우 Standard MRS와 배교하여 0.62배로 감소하였다. 또한 중합도 5의 올리고당이 중합도 7의 올리고당보다 생육활성에 크게 기여하는 것으로 나타났다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제15권2호
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• pp.388-394
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• 2005

In order to investigate the distribution of dominant Bifidobacterium species in intestinal microflora of Korean adults and seniors, SDS-PAGE profiles of whole cell proteins were used for the identification of bifidobacteria. To confirm the reliability of SDS-PAGE, the Bifidobacterium species identified by SDS-PAGE of whole cell proteins were validated by using 16S rDNA sequencing analysis. The results of SDS­PAGE corresponded well with those determined by the analysis of 16S rDNA sequencing. Based on the analysis of SDS-PAGE patterns on unidentified fecal strains which showed positive in fructose-6-phosphate phosphoketolase activity, B. adolescentis, B. longum, and B. bifidum were identified in the feces of adults, and B. adolescentis, B. longum, B. bifidum, B. breve, and B. dentium were identified in those of seniors. In most of the fecal samples tested, the predominant Bifidobacterium species consisted of only a few species, and differences in the distribution and numbers of Bifidobacterium species were observed between adults and seniors. B. adolescentis and B. longum were found to be the most common species in feces of adults, but not in seniors. Accordingly, the distribution and abundance of bifidobacteria in the human intestinal microflora varied depending on the age of hosts.