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Isolation and Properties of $\beta$-N-Acetyl-D-glucosaminidase B from Rat Uterus

  • Jung, Jin-Ha;Yang, Chul-Hak
    • Bulletin of the Korean Chemical Society
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    • 제4권3호
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    • pp.139-143
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    • 1983
  • ${\beta}$-N-Acetyl-D-glucosaminidase B was highly purified with the following sequence of steps; DEAE-cellulose, CM-cellulose, and Sephadex G-200 gel filtration chromatograpies. The specific activity of the purified ${\beta}$ -N-acetyl-D-glucosaminidase B was 2.2 units/mg protein with 12.9 % yield and 196.2 fold purity. The purified ${\beta}$-N-acetyl-D-glucosaminidase B showed single band on polyacrylamide gel electrophoresis. The final preparation of ${\beta}$ -N-acetyl-D-glucosaminidase B was completely free friom arylsulfatase and ${\beta}$-glucuronidase. ${\beta}$ -N-Acetyl-D-glucosaminidase B had pH optimum of 4.5 in 0.5 M sodium citrate buffer. The molecular weight of ${\beta}$-N-acetyl-D-glucosaminidase B was 133,000 by Sephadex G-200 gel filtration. The Km value of ${\beta}$-N-acetyl-D-glucosaminidase B using p-nitrophenyl-N-acetyl-${\beta}$-D-glucosaminide as substrate was 1.0 mM and $V_{max}$ was 0.014 ${\mu}$ mole/min. ${\beta}$-N-Acetyl-D-glucosaminidase B was stable at $55^{circ}C$ for 70 minutes. The crude ${\beta}$ -N-acetyl-D-glucosamiinidase in 70 % ammonium sulfate retained 93 % activity after 7 months storage at -$55^{circ}C$. Bovine serum albumin, sodium chloride, and phosphate activated ${\beta}$ -N-Acetyl-D-glucosaminidase B. N-Acetyl-D-glucosamine, ${\alpha}$-methyl-D-mannoside, and acetate inhibited ${\beta}$ -N-acetyl-D-glucosaminidase B.

Synergistic effects of dietary $\beta$-1,3 glucan and feed stimulants in juvenile olive flounder (Paralichthys olivaceus)

  • Sungchul C. Bai;Park, Gunjun;Kim, Joon-Hyung;Cui Hua;Kim, Youngchul
    • 한국양식학회:학술대회논문집
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    • 한국양식학회 2003년도 추계학술발표대회 논문요약집
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    • pp.68-69
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    • 2003
  • The present study was conducted to investigate the effects of dietary supplementation of $\beta$-1,3 glucan and feed stimulants(BAISM) as a feed additive for juvenile olive flounder (Paralichthys olivaceus). Eight experimental diets supplemented with $\beta$-1,3 glucan and feed stimulants at 0%, $\beta$-1,3 glucan 0.05% + Baism 0.45%, $\beta$-1,3 glucan 0.05% + Baism 0.95%, $\beta$-1,3 glucan 0.10% + Baism 0.90%, $\beta$-1,3 glucan 0.10% + Baism 1.90%, $\beta$-1,3 glucan 0.15% + Baism 1.35%, $\beta$-1,3 glucan 0.15% + Baism 2.85% and $\beta$-1,3 glucan 0.30% + Baism 2.70% of diets as a dry-matter(DM) basis were prepared. Three replicate groups of fish averaging 9.2 $\pm$ 0.1g (Mean $\pm$ SD) were randomly distributed in each aquarium as a group of 15 fish and fed one of eight experimental diets for seven weeks. After the feeding trial, $\beta$-1,3 glucan 0.10% + Baism 0.90%, $\beta$-1,3 glucan 0.10% + Baism 1.90% diets had a higher weight gain (WG), feed efficiency(FE), specific growth rate(SGR) and protein efficiency ratio(PER) than did fish fed 0%, $\beta$-1,3 glucan 0.05% + Baism 0.45%, $\beta$-1,3 glucan 0.05% + Baism 0.95%, $\beta$-1,3 glucan 0.15% + Baism 2.85% and $\beta$-1,3 glucan 0.30% + Baism 2.70% (P<0.05). however, there was no significant difference among fish fed $\beta$-1,3 glucan 0.05% + Baism 0.45%, $\beta$-1,3 glucan 0.05% + Baism 0.95%, $\beta$-1,3 glucan 0.15% + Baism 2.85% and $\beta$-1,3 glucan 0.30% + Baism 2.70%(P>0.05). and $\beta$-1,3 glucan 0.10% + Baism 0.90% diets had a higher peak value of CL(Chemiluminescence) and lysozyme activity, than did fish fed the other diets (P<0.05). These results indicated that dietary sipplementation of $\beta$-1, 3 glucan and Baism affected growth, feed efficiency, specific growth rate, protein efficiency ratio, Peak value of CL and Lysozyme activity, and the optimum dietary supplementation level of $\beta$-1, 3 glucan and Baism as a feed additive could be approximately $\beta$-1, 3 glucan 0.10% + Baism 0.90% of diet in juvenile olive flounder (Paralichthys olivaceus).

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등숙 중인 보리 종실중 (1-3, 1-4)-$\beta$-Glucan과 전분 함량 및 이들의 가수분해효소 활성 ((1-3, 1-4)-$\beta$-Glucan and Starch Contents and Their Hydrolytic Enzyme Activities in Developing Barley Kernels)

  • 윤성중;박상래;유남희
    • 한국작물학회지
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    • 제42권4호
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    • pp.403-409
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    • 1997
  • 취반용 보리 종실 내 (1-3, 1-4)-$\beta$-glucan의 축적기작을 알아보기 위하여 개화 후 일정 간격으로 보리 종실을 채취하여 (1-3, 1-4)-$\beta$-glucan 함량, (1-3, 1-4)-$\beta$-glucanase 활성 및 전분함량과 $\alpha$-amylase 활성을 조사하였다. $\beta$-glucan 함량은 등숙 초기에 매우 낮았으나 개화 후 15~25일 사이에 급속히 증가하였고 개화 후 30일경에는 종실 건물중의 3.5~4%로 증가하였다. (1-3, 1-4)-$\beta$-glucanase 활성은 등숙 초기에 높았으며 등숙이 진전될수록 감소하였다. $\beta$-glucan 함량과 (1-3, 1-4)-$\beta$-glucanase 활성간에는 고도로 유의한 부의 상관관계가 인정되었으나 등숙 종실 중의(1-3, 1-4)-$\beta$-glucanase 활성이 매우 낮은 수준이므로 $\beta$-glucan 축적량에 크게 영향을 미치지 않을 것으로 추정되었다. 전분함량은 등숙이 진전됨에 따라 지속적으로 증가하였으며 개화 후 10~20일에 가장 뚜렷하게 증가하였다. 포도당함량은 등숙이 진전됨에 따라 현저히 감소하였으며, 등숙 초기와 중기에 감소 정도가 매우 컸다. $\alpha$-amylase의 활성도 등숙이 진전됨에 따라 현저히 감소하였으며, 감소 정도는 등숙 초기와 중기에 매우 컸다.

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DSC에 의한 보리 ${\beta}-Glucan$ [mixed-linked$(1-3),(1-4)-{\beta}-D-Glucan$의 열적 특성에 관한 연구 (A Study on the Thermal Characterization of Barley ${\beta}-Glucan$ [mixed-linked $(1-3),(1-4)-{\beta}-D-Glucan$] by Differential Scanning Calorimetry)

  • 차희숙;김미옥;구성자
    • 한국식품과학회지
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    • 제25권1호
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    • pp.22-27
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    • 1993
  • 보리를 thermostable ${\alpha}-amylase$와 amyloglucosidase로 처리하여 ${\beta}-glucan$을 얻은 후 정제과정을 통해 순수한 ${\beta}-glucan$을 얻어 보리 ${\beta}-glucan$의 열적특성을 연구하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 보리${\beta}-glucan$의 DSC thermogram은 3개의 흡열곡선을 나타냈으며 1차 흡열곡선은 겔화상전이 현상을 나타냈다. 보리 ${\beta}-glucan$의 농도가 증가함에 따라 겔화 온도범위와 엔탈피가 최대값을 나타냈으며 4 g/dl ${\beta}-glucan$의 To, Tp 및 Tc는 각각 $48.8^{\circ}C,\;61.2^{\circ}C$$78.5^{\circ}C$였고 엔탈피는 0.23 ca1/g이었다. pH 의존성에서 pH 7일 때 겔화온도의 범위가 넓었고 엔탈피도 가장 컸으며 산성과 알칼리성이 강할수록 낮은 값을 나타냈다. 염농도 의존성에서는 염을 가하지 않았을 때 겔화 온도범위와 엔탈피가 높았고 염을 첨가했을 경우 엔탈피는 급격히 감소하였으며 Tp와 Tc는 저온으로 이동되었으나 염농도 증가에는 영향을 받지 않았다. 보리 ${\beta}-glucan$의 열적특성에서 urea는 겔형성을 촉진시키는 active-reagent이었고 glycerol은 inactive-reagent임이 확인되었다. 열분해 현상에서 보리 ${\beta}-glucan$의 "true melting" 온도는 $184^{\circ}C$ 였고 엔탈피는 34.6 cal/g이었으며 분해온도는 $316^{\circ}C{\sim}346^{\circ}C$ 범위로 열에 대해 매우 안정한 물질임을 알 수 있었다.

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Agrobacterium spp. R259 KCTC 10197BP로부터 생산된 ${\beta}-glucan$ 고함유 식빵 반죽의 특성 (Baking Qualities of Bread Dough Substituted with High Amount of ${\beta}-Glucan$ from Agrobacterium spp. R259 KCTC 10197Bp)

  • 강은영;양윤형;오상희;이정희;김혜영;김미경;조한영;김미리
    • 한국식품과학회지
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    • 제38권3호
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    • pp.348-354
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    • 2006
  • 기능성 식품소재인 ${\beta}-glucan$을 식빵재료의 10, 20 및 30% 첨가하여 제조한 반죽의 이화학적 특성을 분석하였다. ${\beta}-Glucan$ 첨가량이 많을수록 반죽형성시간이 증가한 반면 발효에 걸리는 시간은 단축되었다. 반죽의 발효팽창력은 ${\beta}-glucan$ 20% 첨가까지 ${\beta}-glucan$ 첨가량이 증가할수록 증가하였고 ${\beta}-glucan$ 30% 첨가시에는 유의적으로 감소하였다. 반죽의 pH는 대조군의 경우 발효과정을 거치면서 낮아지는 경향을 나타내었으나 ${\beta}-glucan$ 첨가군은 다소 증가하였다. 반죽의 물성 중 탄력성은 ${\beta}-glucan$의 첨가량이 증가함에 따라 증가하고 경도는 감소하였다. 검성은 ${\beta}-glucan$ 10 및 20% 첨가군의 경우 대조군과 차이가 없었고 ${\beta}-glucan$ 30% 첨가군은 유의적으로 낮았다. 발효과정이 진행됨에 따라 반죽은 탄력성, 검성, 경도 및 응집성이 모두 감소하는 경향을 보였으나, ${\beta}-glucan$ 첨가에 따른 유의적인 변화는 없었다. Amylogram에서 호화개시온도와 최고점도에 달하는 온도가 모두 높아져 ${\beta}-glucan$이 호화를 지연시켰으며, setback과 consistency는 감소하여 ${\beta}-glucan$이 식빵노화를 지연시켜 줄 수 있음을 암시하였다. 반죽의 초미세구조를 관찰한 결과 ${\beta}-glucan$ 30% 첨가시 ${\beta}-glucan$ 입자가 반죽에 흡수되지 못하였음을 알 수 있었다. 따라서 제빵적성에 적합한 ${\beta}-glucan$ 첨가율은 20% 이하가 바람직한 것으로 보인다.

각종(各種) 신질환(腎疾患)에서의 혈청(血淸) $\beta_2-microglobulin$ 측정(測定)의 의의(意義) (The Significance of Serum $Beta_2-Microglobulin$ Measurement in Various Renal Diseases)

  • 궁성수;오하영;한진석;이정상
    • 대한핵의학회지
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    • 제19권1호
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    • pp.127-136
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    • 1985
  • To evaluate change of serum $beta_2-microglobulin$ concentration$(s\beta_2-MG)$ and the usefulness of $s\beta_2-MG$ and $s\beta_2-MG/serum$ creatinine concentration(sCr) ratio in various renal diseases, $s\beta_2-MG$ and sCr were measured in 25 normal controls and 90 patients of various renal diseases(16 cases of glomerulonephritis, 12 cases of acute renal failure, 8 cases of chronic renal failure, 24 cases of nephrotic syndrome, 15 cases of tubulointerstitial diseases and 15 cases of lupus nephritis) using $Phadebas^\circledR$ $Beta_2-Micro$ Test kits. The results were as follows; 1) In normal control, the mean value of $s\beta_2-MG$ was $1.65{\pm}0.41mg/l$ and the mean value of $s\beta_2-MG/sCr$ ratio was $0.14{\pm}0.05$. 2) In various renal diseases, the mean value of $s\beta_2-MG$ was $6.74{\pm}5.47mg/l$. The mean value of $s\beta_2-MG/sCr$ ratio was $0.24{\pm}0.11$ and significantly elevated than that of normal control. (p<0.05) 3) The correlation between $s\beta_2-MG$ and sCr in glomerular and tubulointerstitial disease was log $s\beta_2-MG-0.90$ log sCr-0.48 and its correlation coefficient was 0.78(p<0.05). 4) In glomerular disease, the correlation between $s\beta_2-MG$ and sCr was log $s\beta_2-MG-0.89$ log sCr-0.46(r - 0.76) and in tubulointerstitial disease, it was log, $s\beta2-MG-0.95$ log sCr-0.59 (r-0.87). There was no significant difference between the two groups(p<0.05). 5) Among 32 cases of glomerular and tubulointerstitial disease patients, whose sCr was within normal range, 17 cases showed elevated $s\beta_2-MG$. The mean values of $s\beta_2-MG/sCr$ ratio in these patients was $0.30{\pm}0.14$ and significantly elevated than that of normal control(p<0.05). 6) In 15 cases of lupus nephritis, 12 cases showed elevated $s\beta_2-MG$ with normal sCr and 12 cases showed elevated $s\beta_2-MG/sCr$ ratio. With above results, it was found that the $s\beta_2MG$ can be used as an index of glomerular filtration rate as in the case of sCr and that $s\beta_2-MG/sCr$ ratio can be used as a tool in early detection of slightly decreased glomerular filtration rate and in detection of the renal disease of increased $\beta_2-MG$ production.

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쥐의 골세포에서 $PGE_2$ 합성과 plasminogen activator 활성 조절에 의한 IL-$1{\beta}$의 골 흡수유도와 TGF-$\beta$에 의한 골 흡수 억제 기전에 관한 연구 (Interleukin-$1{\beta}$ induces bone resorption by regulation of prostaglandin $E_2$ synthesis and plasminogen activator activity, and TGF-$\beta$ inhibits bone resorption of rat bone cells)

  • 김영훈;이영준;정규림;박영국
    • 대한치과교정학회지
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    • 제30권6호
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    • pp.713-721
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    • 2000
  • 골세포는 골대사에 영향을 미치는 다양한 성장인자와 싸이토카인을 생성하여 골 기질로 유리시킨다. 이 연구는 쥐의 장골 세포 배양 모델에서 recombinant human IL-$1\beta$$PGE_2$ 합성과 plasminogen activator의 활성 조절을 통한 골 흡수 유도 기전의 일단을 구명하고, 이와 동시에 TGF-$\beta$에 의한 골흡수 억제 기전을 해명하는데 그 목적이 있다. 쥐의 장골 세포를 배양하여 통법의 골모세포 phenotype을 발현하는 세포를 분리하고 세포 배양능, alkaline phosphatase assay, PG assay, 골흡수능 측정들을 시행하여 다음의 결과를 얻었다. 1. IL-$1\beta$는 쥐의 골모세포의 증식, $PGE_2$ 생성 및 palsmonogen activator의 활성을 촉진하였다. 2. IL-$1\beta$는 쥐의 골모세포에서의 alkaline phosphatase 활성을 감소시켰다. 3. rhIL-$1\beta$는 골 흡수를 촉진시켰다. 4. TGF-$\beta$는 쥐의 장골 세포에서 골의 흡수를 억제하였으며, Vitamin $D_3$에 의하여 유도된 골 흡수를 억제하였다. 이상의 연구 결과는 IL-$1\beta$에 의한 골 파괴의 병인과 관련하여 골 세포 대사의 병리학적 조절에 있어서의 IL-$1\beta$의 역할을 지지하며, 이와 동시에 골 흡수 억제에 있어서의 TGF-$\beta$의 역할을 확인시켜주는 것으로 생각된다.

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초고온 고세균 Thermococcus pacificus P-4로부터 내열성 β-glucosidase의 새로운 기질 특이성 (Novel substrate specificity of a thermostable β-glucosidase from the hyperthermophilic archaeon, Thermococcus pacificus P-4)

  • 김윤재;이재은;이현숙;권개경;강성균;이정현
    • 미생물학회지
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    • 제51권1호
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    • pp.68-74
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    • 2015
  • Thermococcus pacificus P-4의 유전체 서열 분석을 통하여 예측되는 GH1 ${\beta}$-glucosidase를 암호화하는 유전자를 동정하였다. 그 유전자는 487 아미노산들을 암호화하는 1,464 bp 나타내었으며, 그 아미노산 서열은 Pyrococcus furiosus ${\beta}$-glucosidase와 77% 상동성을 나타내었다. 그 유전자는 Escherichia coli 시스템 내에서 복제 및 발현하였다. 재조합 된 단백질은 금속 친화크로마토그래피를 통하여 정제하고 특성을 분석하였다. 정제된 단백질(Tpa-Glu)은 pH 7.5와 $75^{\circ}C$에서 최적활성을 나타내었으며, 열안정성은 $90^{\circ}C$에서 약 6시간의 반감기를 보였다. Tpa-Glu는 pNP-${\beta}$-glucopyranoside, pNP-${\beta}$-galactopyranoside, pNP-${\beta}$-mannopyranoside, 그리고 pNP-${\beta}$-xylopyranoside 순으로 우수한 $k_{cat}/K_m$ 값을 나타내었다. 또한, Tpa-Glu는 ${\beta}$-1,3-linked polysaccharide (laminarin) 그리고 ${\beta}$-1,3-와 ${\beta}$-1,4-linked oligosaccharides에 대하여 exo-hydrolyzing 활성을 보였다. 본 연구는 초고온 고세균으로터 ${\beta}$-glucosidase가 exohydrolyzing 활성을 처음 확인한 것으로 이 효소는 laminarin의 당화공정에 ${\beta}$-1,3-endoglucanase와 함께 적용할 수 있을 것으로 기대된다.

커피전문점 서비스품질이 지각된 가치와 행동의도에 미치는 영향에 관한 연구 - 부산지역 대학생을 중심으로 - (A Study on the Effect of Coffee Shop Service Quality on Perceived Value and Behavioral Intention - Focusing on Busan-Area College Students -)

  • 이종호
    • 한국조리학회지
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    • 제19권3호
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    • pp.218-233
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    • 2013
  • 본 연구는 커피전문점 서비스품질이 지각된 가치와 행동의도에 미치는 영향 관계를 파악하기 위하여 통계프로그램 SPSSS 18.0을 이용하여 부산지역 대학생 237명을 대상으로 빈도분석, 요인 및 신뢰도 분석, 상관관계분석, 회귀분석을 실시하였다. 가설검정을 위한 다중회귀분석에서는 서비스품질 4개요인 중 종사원의 신뢰감, 커피의 본원적 특성은 심미적 가치에 유의한 영향을 미치지 않는 것으로 나타났고, 커피이외의 메뉴특성(${\beta}$=.293, p<.001)과 물리적 환경(${\beta}$=.293, p<.001)은 유의하게 분석되어 연구가설은 부분 채택되었다. 그리고 서비스품질이 실용적 가치에 미치는 영향에서는 종업원 신뢰감은 (${\beta}$=.264 p<.001), 커피의 본원적 특성은 (${\beta}$=.463, p<.001), 커피이외의 메뉴특성(${\beta}$=.139, p<.05)과 물리적 환경(${\beta}$=.110, p<.05) 모두 유의하게 분석되어 연구가설은 채택되었다. 그리고 서비스품질이 행동의도에 미치는 영향에서는 종업원의 신뢰감은 (${\beta}$=.262 p<.001), 커피의 본원적 특성은 (${\beta}$=.411, p<.001), 커피이외의 메뉴특성(${\beta}$=.157, p<.01)과 물리적 환경(${\beta}$=.137, p<.05) 모두 유의하게 분석되어 연구가설이 채택되었다. 또한 지각된 가치가 행동의도에 미치는 영향에서는 심미적 가치(${\beta}$=.265 p<.001), 실용적 가치(${\beta}$=.536, p<.001), 모두 유의하게 분석되어 행동의도와의 인과관계를 확인할 수 있었다.

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EpH4 세포에서 TGF-β에 의한 세포사멸시 Smad 단백질에 의존한 Gadd45b 유전자의 발현 변화 (Smad-dependent Expression of Gadd45b Gene during TGF-β-induced Apoptosis in EpH4 Cells.)

  • 조희준;유지윤
    • 생명과학회지
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    • 제18권4호
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    • pp.461-466
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    • 2008
  • Transforming growth $factor-{\beta}$ ($TGF-{\beta}$)에 의해 유도되는 세포사멸 과정은 정상 조직에서 손상 받은 조직이나 비정상 적인 조직을 제거하는데 중요한 역할을 담당한다. Gadd45b는 p38 kinase를 활성화시킴으로 $TGF-{\beta}$에 의해 유도되는 세포사멸 과정을 매개한다고 알려져 있다. 본 연구에서는 $TGF-{\beta}$에 의해 세포사멸이 일어나는 EpH4 세포에서 Gadd45b 유전자의 발현이 $TGF-{\beta}$에 의해 촉진됨을 보여주었다. 어떠한 기작으로 $TGF-{\beta}$에 의해 Gadd45b 유전자의 발현이 촉진되는지 알아보기 위해 Gadd45g 유전자의 5'-flanking region을 cloning하였으며, EpH4 세포에서 $TGF-{\beta}$에 의해 그 promoter activity가 증가함을 확인하였다. 여러 가지 deletion mutants를 제조하여 promoter activity를 조사한 결과 전사 개시점으로부터 220 bp upstream 부위 에 promoter activity에 필수적인 sequence가 존재함을 확인하였다. 또한 $TGF-{\beta}$에 의한 Gadd45b 유전자의 promoter activity에 Smad2, Smad3, 그리고 Smad4가 중요한 기능을 담당함도 확인하였다. 마지막으로 ras 유전자가 도입되어 $TGF-{\beta}$에 의한 세포사멸이 억제되어있는 EpRas 세포에서 $TGF-{\beta}$에 의한 Gadd45b 유전자의 발현을 확인한 결과 EpRas 세포에서 $TGF-{\beta}$에 의한 Gadd45b 유전자의 발현이 억제됨을 확인하였다. 이러한 결과는 Gadd45b 유전자가 EpH4 세포에서 $TGF-{\beta}$에 의한 세포사멸을 유도하는데 중요한 기능을 담당할 가능성이 높음을 의미하는 것이다.