Pullulanase 생산력이 높은 세균 No.S-76을 토양으로부터 분리하였다. 분리된 균은 0.4~$0.6\times 0.8$~1.4 $\mu\textrm{m}$의 크기의 gram음성, 간균으로서 운동성이 있으며, 여러가지 특성을 조사한 결과 Bergey의 세균분류 동종법에 따라 Aeromonas caviae로 동정되었다. 본 균의 pullulanase 생산배지로서는 탄소원은 1 pullulan, soluble strach 또는 corn starch가, 질소원으로는 0.5% yeast extract 또는 peptone이 적당하였으며 initial pH는 9.0의 배지가 가장 좋았으며 $32^{\circ}C$에서 2일간 배양이 적당하였다.
우리 나라의 전통 대두발효식품인 된장으로부터 혈전용해능을 가진 미생물을 분리하였다. 그 중 5종류의 균주를 Bergey's manual of systematic bacteriology에 의거하여 동정한 결과 Bacillus sp. 균주로 밝혀졌다. 분리된 Bacillus 속 미생물을 효소 유도배지에서 배양한 결과 B. amyloliquefaciens는 2.46 plasmin unit/ml, B pantothenticus는 3.82 plasmin unit/ml 의 혈전용해능을 가지고 있었고, B. subtilis는 4.94 plasmin unti/ml의 높은 혈전용해효소 생산능을 보여주었다. 분리 균주에 의하여 생산된 세포외 단백질을 SDS-PAGE와 reverse fibrin zymogram 활성측정법에 의해 확인한 결과 각 균주별로 서로 다른 혈전용해효소가 생산되었음을 확인하였다.
농산페자원을 기질로 하여 섬유소단세포단백을 생산하기 위해 전국에서 수집한 썩은 나무, 퇴비, 토양 등 시료에서 enrichment culture technique으로 172주의 섬유소자화세균을 분리하였다. 이들중 섬유소 자화력이 강한 균 6주를 동정하여 다음 결과를 얻었다. 1. 선별한 6주 중 5주는 Cellulomonas속이었으며 나머지 1주는 Sporocytophaga속이었다. 2. Sporocytophaga속의 세균은 microcyst가 타원형인 S. ellepsospora이었다. 3. Cellulomonas속의 세균들은 C.fimi 1균주, C.gelida 1균주, C. flavigena 2균주 및 C. aurogena 1 균주이 었다. 4. 분리균 C. aurogena는 5탄당인 arabinose 와 xylose를 자화하는 성질이 Bergey's Manual에 수록된 균과 달라 새로운 변종으로 판명되었다.
김치발효 중 Gram 양성세균 또는 유산균의 분리와 동정을 시도하였다. 종의 다양성은 분리배지와 온도에 영양을 받았고, 다양성은 온도가 낮아질수록 감소하는 경향이었다. MRS는 세균의 분리에 KM(김치재료로 만든 자연배지)은 종의 수를 파악 하는데 각각 적합하였다. 분리균의 동정은 Bergey's manual of Systematic Bacterio]ogy (1986)를 기초로 하여 작성한 이 분농생표(dichotomous Identification scheme)에 의하여 선행하였다. 각 온도(5, 15, $25^{\circ}C$)에서 동정된 Gram 양성세균은 Leuconostoc 5종, Streptococcus 4종, Pediococcus 3종, Bacillus 2종 그리고 Ltobacillms 18종이였다. 각 온도에서 출현 빈도가 높은 종은 $25^{\circ}C$에서 LactobaIlus ptantanmz, Streptococcµs faffinolactis, Leuconostoc maιnteroid, subsp mlsentιroides 이었고, $15^{\circ}C$에서 L. mesenteroides Lactobacillus fructosus, L. maen teroid,l.I subsp. mesent,roid, 이였고, $5^{\circ}C$ 에서 Leuconostoc sp.(65.2 빈도)에 의하여 이루어졌다. 그리고 각 온도에 따른 김치발효 중 지금까지 알려진 Pediococcus cerevisiae 와 Streptococcus faecalis는 분리되지 않았다.
Microorganisms having beta-latamase inhibitory activity were selected from soil samples collected from 63 spots throughout the country. Screening procedures consist of two steps. Those are growth inhibition test of penicillinase-producing Staphylococcus aureus by double-layered agar plate containing penicillin G as a substrate, and that of penicillin sensitive Staphylococcus aureus ATCC 6538 in the similiar condition including penicillinase. Finally, a strain was selected from a soil sample of Pa-ju, Kyeong-gi Do. This strain was classified as a Streptomyces sp. by ISP(International Streptomycete Project) and Bergey's manual.
The purpose of this paper is to study on the morphological and physiological nature generally observed for the identifications, and the four strains of thermal resistanting aerobic bacteria isolated from swelled cans and the different soils collected from the wide area in Korea. The results obtained in the light of the Bergey's Manual for the identification of the bacteria, have been shown that the four strains of bacteria are pertained to Bacillus subtilis. The optimum temperature, pH and the thermal resistance (2.5 min. at $121^{\circ}C$) of the bacteria have been measured.
가축분 및 음식물 퇴비 132점에서 517균주를 분리하고 CMC와 xylan 및 PGA 배지에서 강한 활성을 가지는 10여개의 균주를 선별하여 배추종자 발아를 이용한 작물 inhibition test와 오이 육묘실험으로 growth test를 거쳐 생육이 가장 양호한 LYH201 균주를 야생균주로 선발하였다. Bergey's manual 방법으로 특성을 조사한 결과 LYH201균주는 Gram 양성균으로 내생포자 형성, oxidase, CMCCase, xylanase, catalase, V-P test, methyl red test, arabinose 등의 탄소원 이용성은 양성이었으며, indole을 생성하고, urease, lecithinase, dihydrolase test는 음성이었고, 전자현미경으로 관찰한 결과 길이가 $2.5{\sim}3.0{\mu}m$, 너비가 $0.5{\sim}0.7{\mu}m$의 간균인 Bacillus subtilis로 확인되었다. Bacillus subtilis LYH201 균주를 MMY를 이용하여 배양한 결과 온도 $50^{\circ}C$, pH 6.0에서 생육이 가장 좋았다.
지금까지 보고된 바와는 달리 이눌라아제를 체외로 분비하는 한 세균을 분리하였고 이균은 이눌린이 존재하지 않는 설탕, 세룰로오스, 포도당이 포함된 배지에서 이눌라아제를 생산하는 구성 효소로서의 특성을 나타내었다. 또한 동일한 배지 조건에서 강력한 이눌라아제를 생산하는 것으로 알려진 Kluyveromyces fragilis와 유사한 효소 활성을 짧은 배양 시간내에 나타내었다. Bergery's manual에 따라 조사된 이 균의 특징은 호기성, 그람양성, 간균으로 포자를 형성하여 Bacillus subtilis로 추정되었다.
본 연구는 김치로부터 분리한 젖산균의 다양성과 항균성을 조사하기 위하여 수행되었다. 희석한 김치 국물을 CaCO$_3$가 첨가된 MRS 고체 배지에 도말 한 후, $25^{\circ}C$에서 2일 동안 배양하여 여러 가지 김치로부터 27가지의 젖산균을 분리하였다. 이렇게 분리한 젖산균들을 Bergey 분류법과 BPB 배지를 통한 생화학적인 방법과 16S rDNA PCR을 이용한 분자 생물학적인 방법으로써 분석하였다. 그러나 이들 방법으로 분석한 결과가 일치하지 않은 경우가 많았다. 이들 분리 젖산균은 16S rDNA 부분 염기서열을 결정한 결과 Leuconostoc mesenteriodes(11균주), Leu. carnosum(3균주), Lactobacillus curvatus(8균주), Lac. pentosus(2균주), Weisselia kimchi(1균주), W. cibaria(1균주), Pediococcus pentosaceus(1균주) 등의 것과 각각 매우 유사한 것으로 분석되었다. 이들중 Leu. carnosum은 이전에 김치에서 분리되었다고 보고된 바가 없다. 그리고 이들 김치에서 분리 동정한 균들의 항균작용 활성을 검사 해 본 결과 균주에 따라서 활성의 정도는 다르게 나타났으나 Bacillus subtilis, Escherichia coli, Salmonella enteritidis, S. paratyphica, S. typhi, Staphylococcus aureus, Shigella boydii, S. sonnei 등에 대해 뚜렷한 항균효과를 나타내었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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