In order to investigate the antimutagenicity of the sweet potato enzymatic browning reaction products (SPEBRP) were studied the DNA breaking action, spore rec assay and Ames test. In the DNA breaking action of reaction mixture of SPEBRP and polyphenol compounds with an agarose horizonal electrophoresis, catechol (CAT)-SPEBRP and hydroxyhydroquinone (HHQ)SPEBRP inhibited DNA breaking effect in the presence of $Fe^{2+}$. In the spore ree assay using Bacillus subtilis H17(rec+) and M45(rec-), 3,4-dihydroxytoluene (DHT)-SPEBRP showed strong antimutagenic effects on MNNG. In the Ames test using Salmonella tYPhimurium TA 98 and TA 100, pyrogallol(PYR)-, 3,4-dihydroxytoluene (DHT)- and hydroxyhydroquinone (HHQ)-SPEBRPs suppressed about 67%, 71% and 63% in the mutagenesis induced by Benzo($\alpha$)Pyrene(B($\alpha$)p).
The strain isolated for making chungkuk-jang was Bacillus subtilis which formed sport with 98% ratio. Logarithmical culture was inoculated(1,000 CF/g) to the steamed soybeans and at th optimum fer-mentation conditions(4$0^{\circ}C$, RH 90%) fermentation progressed very rapidly and synchronously. Fermen-tation time was 24 hours on the optimum fermentation conditions. During activated fermentation chun-gkuk-jang's aroma and flavor created. After finishing the fermentation the spore forming ratio was 95% and replenishment was not occured easily during aging at the below 5$^{\circ}C$.
D10 values obtained for radiation alone in Bacillus subtilis and Clostridium perfrigenes were 0.35-0.48 kGy in vegetative cells, and 2~2.08 kGy in spores, respectively. Irradiation dose of 24 kGy completely inhibited spores. In the case of heat treatment, D50, 60 values ranged from 10 to 14 minutes in vegetative cells, and D70, 80, 90 values ranged from 10 to 140 minutes in spores. In the case of combined treatment with heat and radiation, D10 values ranged form 1 to 1.25 kGy in vegetative cells, and from 3.42 to 3.61 kGy in spores. Thus, resistance of cells to gamma radiation did not seem to be influences by pre-heating.
Antimutagenicity profiles of the enzymatic browning reaction products(EBRP) were investigated. The rec-assay with Bacillus subtilis strains $H17(rec^+)$ and $M45(rec^-)$ was carried out using their spores. The biological activities were evaluated for seven different enzymatic browning reaction products, which resulted from the reactions of seven polyphenols with polyphenol oxidase isolated from Ginkgo biloba leaves. In the spore $rec^-$ assay, most of the polyphenolic compounds tested were positive, whereas their enzymatic browning reaction products were tested negative. The mutagenicity of enzymic browning mixtures of the polyphenols and the enzymes obtained from Ginkgo biloba leaves showed negative results in the mutagenicity test using Bacillus subtilis strains $H17(rec^+)$ and $M45(rec^-)$. In the case where polyphenol oxidase inhibitors were added in the enzymatic reaction mixtures with polyphenols, the polyphenols showed mutagenic effect in the spore $rec^-$ assay. This suggests that the activity of polyphenol oxidase is decreased.
To confirm the antimicobial mechanism of Torilis japonica, antimicrobial profile was observed on various spore conditions by combining 0.1% (3 mM) torilin with antimicrobial activity and 0.27% water fraction with germinants. A 75% ethanol extract of T. japonica fruit reduced Bacillus subtilis ATCC 6633 spore counts by 3 log cycles and reduced the vegetative cells to undetectable level (by about 6 log cycles) (both in terms of CFU/mL). Further fractionating the ethanol extract into n-hexane and water fractions revealed that the former reduced the spore count by 1 log cycle whereas the latter had no effect. The antimicrobial active compound was isolated and purified from the hexane layer, and identified as torilin ($C_{22}H_{32}O_5$). The water fraction of the ethanol layer did not show antimicrobial activity, whereas the antimicrobial effect of 0.1% (3 mM) torilin was significantly enhanced in the presence of the water fraction (0.27%). This result can be explained by synergistic effects of the water fraction containing considerable amounts of germinants such as L-alanine and K+ ions that triggered germination.
UV-ray air cleaner consisted of 6 watt UV lamp and fan was developed to sanitize air of refrigerator. Light intensity of the lamp showed 5 times of D value of Bacillus subtilis and air velocity around the lamp in holding section was 0.7 m/s, giving 0.33s of the resident time. The performance of air cleaner was tested with bacterial contaminator sprayed with suspension of Bacillus subtilis and hey powder. The device effectively decreased 80% of the population of airborn spore after 100 min operation at room temperature.
The siderophore ($siderophore_{AH18}$) of Bacillus subtilis AR18 was determined to be one of catechol type and purified by using Amberlite XAD-2, Sephadex LR-20 chromatography, and reversed-phase RPLC. The $Siderophore_{AH18}$ was identified bacillibactin with its structure by GC-MS, $^1H$-NMR, and $^{13}C$-NMR. $Siderophore_{AH18}$ (bacillibactin) had been confirmed its molecular weight of 883 and chemical structure of $(2,3-dihydroxybenzoate-glycine-threonine)_3$. Purified $siderophore_{AH18}$ showed strong biocontrol ability towards the spore of Phytophthora capsici on PDA and able to effectively suppress (55%) P. capsici causing red-pepper blight in the pot in vivo test.
The multi-function of 18 Bacillus subtilis isolates collected from agricultural extension centers of local government and National Academy of Agricultural Science was investigated by measuring their antifungal activities against five plant pathogens, such as Rhizoctonia solani, Colletotrichum acutatum, Fusarium oxysporum, Magnaporthe oryzae and Phytophthora capsici, phosphorus solubilization ability, production of indole acetic acid (IAA) and siderophore, and nitrogen fixation. The B. subtilis isolates showed antifungal activity against several plant pathogens and nitrogen fixation activity, and produced siderophore and IAA. They could control pepper powdery mildew (Leveillula taurica), but there was no difference in control efficacy among the B. subtilis isolates. In fields, the control efficacy of B. subtilis R2-1 ($10^8$ cells/ml) was compared with two microbial fungicides, Q-pect and Topsid. In 2009, the control efficacy of B. subtilis R2-1 (37.7%) was lower than that of Topsid (47.6%), but higher than that of Q-pect (25.7%). In 2010, the control efficacy of B. subtilis R2-1 (83.3%) was higher than that of Topsid (67.9%). In order to elucidate mode of action of B. subtilis R2-1 for controlling pepper powdery mildew, spore germination rates of pepper powdery mildew pathogen collected on treated leaves was investigated when suspensions of B. subtilis R2-1 and two microbial fungicides (Q-pect and Topsid) were foliar-sprayed. They highly suppressed spore germination of the pathogen with inhibition values of 84.2% for B. subtilis R2-1, 97.9% for Q-pect and 94.7% for Topsid. Further study on the mass-culturing method and formulation is needed for development of a microbial fungicide.
In order to identify the bacteria living on the cocoons in Korea, the isolated bacterias' morphological. cultural and physiological characters has been determined through the detailed study. The second aim of this experiment was to protect against the bacteria which damage silk protein during storage. 1. The twelve strains of the bacteria were isolated and identified in the cocoons produced in Korea. The results of the identification are as the following. No 1, No 8; Bacillus subtilis variation No 2, ; Bacillus stearothermophilus No 3, ; Bacillus circulans No 5, No 6; Bacillus thuringiensis No 7, No 11; Bacillus brevis No 12, No l0; Bacillus cereus variation
In this study, the treatment of pistachio nuts by Bacillus subtilis UTBSP1, a promising isolate to degrade aflatoxin B1 (AFB1), caused to reduce the growth of Aspergillus flavus R5 and AFB1 content on pistachio nuts. Fluorescence probes revealed that the cell free supernatant fluid from UTBSP1 affects spore viability considerably. Using high-performance liquid chromatographic (HPLC) method, 10 fractions were separated and collected from methanol extract of cell free supernatant fluid. Two fractions showed inhibition zones against A. flavus. Mass spectrometric analysis of the both antifungal fractions revealed a high similarity between these anti-A. flavus compounds and cyclic-lipopeptides of surfactin, and fengycin families. Coproduction of surfactin and fengycin acted in a synergistic manner and consequently caused a strong antifungal activity against A. flavus R5. There was a positive significant correlation between the reduction of A. flavus growth and the reduction of AFB1 contamination on pistachio nut by UTBSP1. The results indicated that fengycin and surfactin-producing B. subtilis UTBSP1 can potentially reduce A. flavus growth and AFB1 content in pistachio nut.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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