Microbial strains exhibiting proteolytic activity were isolated from kimchi, one of traditional fermented foods in Korea. Eight strains formed clear zones around their colonies when grown on TSA plates supplemented with skim milk. MBE/L865 exhibited 2.6-fold higher protease activity than that of control strain (Bacillus subtilis KCTC13112). MBE/L865 was identified as B. subtilis and deposited in the Korean Collection for Type Cultures under the accession number of KCCM43059. The optimum growth conditions for B. subtilis KCCM43059 were determined to be $37^{\circ}C$ and pH 8. The strain showed maximum protease activity ($429.37{\pm}18.65U/mg$ protein) at $60^{\circ}C$ and pH 6. Further, B. subtilis KCCM43059 had a higher salt (NaCl) tolerance than that of the control strain.
Aly, Aly A.;El-Mahdy, Omima M.;Habeb, Marian M.;Elhakem, Abeer;Asran, Amal A.;Youssef, Maryan M.;Mohamed, Heba I.;Hanafy, Rania S.
The Plant Pathology Journal
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v.38
no.2
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pp.90-101
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2022
Pathogenicity of eight Bacillus strains to seedlings of four cotton cultivars was evaluated under greenhouse conditions. Each of the tested cultivars was individually treated with powdered inoculum of each bacterial strain. Untreated seeds were planted as control treatments in autoclaved soil. Effects of the tested strains on levels and activities of some biochemical components of the infected seedlings were also assayed. The biochemical components included total soluble sugars, total soluble proteins, total free amino acids, peroxidase, polyphenol oxidase, phenols, and lipid peroxidation. ANOVA showed that Bacillus strain (B) was a very highly significant source of variation in damping-off and dry weight. Cotton cultivar (V) was a nonsignificant source of variation in damping-off while it was a significant source of variation in dry weight. B × V interaction was a significant source of variation in damping-off and a nonsignificant source of variation in dry weight. Bacillus strain was the most important source of variation as it accounted for 59.36 and 64.99% of the explained (model) variation in damping-off and dry weight, respectively. The lack of significant correlation between levels and activities of the assayed biochemical components and incidence of damping-off clearly demonstrated that these biochemical components were not involved in the pathogenicity of the tested strains. Therefore, it was hypothesized that the pathogenicity of the tested strains could be due to the effect of cell wall degrading enzymes of pathogenic toxins. Based on the results of the present study, Bacillus strains should be considered in studying the etiology of cotton seedling damping-off.
Kim, Keun-Ki;Kim, Yong-Chul;Choi, Young-Whan;Sin, Taek-Sun;Park, Ki-Do;Kang, Ui-Gum;Choi, Yong-Lark;Park, Hyean-Cheal
Journal of Life Science
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v.18
no.6
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pp.858-864
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2008
In the greenhouse fields for fruits and vegetables during the winter in Korea, there are serious damages by the sclerotium diseases due to the low temperature and humidity. This study was carried out to select an antagonic agent for the biological control of the sclerotium diseases. The 55 antagonic agents were selected from the rhizosphere in soil where the fruits and vegetables were cultivated in the green house fields, and strain AB02 among the tested isolates was estimated to be the strongest antagonist against the sclerotium disease. Using strain AB02, the antifungal spectrum was tested against 5 different plant pathogens. According to the results of the test, strain AB02 . showed the high antagonistic effect against Botrytis cinerea and Sclerotinia sclerotiorum. For the experiment of biological control against the sclerotium disease, it was estimated the suppression effect and the control effect by the strain in the pot experiment using the green perilla. According to the result of the pot experiments, the suppression effect was 40% and the control effect was 62%, respectively. For the stimulation effect of the tested plant growth by strain AB02 compared to the control, it was improved as 120% for the total length, 141% for the liveweight, 121% for the total number of leaves, 185% for the leaf area, and 327% for the liveweight of the root, respectively. Strain AB02 showing the antagonistic effect against the sclerotium disease and the stimulation effect for the plant growth was identified as Bacillus sp.
For the isolation of a plant growth-promoting rhizobacteria, strain YK-5 was selected from approximately 400 thermostable strains isolated from special soil samples. Strain YK-5 produced an antifungal compound, and optimum carbon and nitrogen sources for the production of the antifungal compound were investigated against Aspergillus flavus as a test strain. Modified LB medium containing 1% peptone, 1% yeast extract and 5% black sugar was determined to be the optimal medium for growth and antifungal compound production. Culture broth of strain YK-5 potently inhibited growth of the phytopathogenic fungus Fusarium oxysporum KACC 40052 for 7 days. The plant growth-promotion function of strain YK-5 was tested against radish and rice in pot trials. Leaf number, plant height and root length in YK-5-treated radish markedly exceeded (> 60%) those of untreated radish. Leaf length and white rootlet development were markedly more prominent than in commercially-treated rice plants. Strain YK-5 was determined to be Bacillus subtilis YK-5 by physiological, chemotaxonomical, and phylogenetical analyses.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.25
no.5
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pp.878-884
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1996
A bacterial strain, designated as Bacillu sp. IJ-3 strain, was shown to produce the extracellular soy protein coagulating enzyme and culture conditions for the production of enzyme by this microbial strain was investigated. The culture medium giving a maximum soy protein coagulating activity was consist of 20%(w/v) soymilk, 2.0%(w/v) glucose, 4.0%(w/v) yeast extract, 5.0%(w/v) polypeptone and 1.0%(w/v) potassium phosphate, monobasic. Initial pH was optimal at 6.0 and the enzyme activity in the culture usually reached a maximal level of fermentation at $35^{\circ}C.$ After the culture medium adjustment where required, enzyme activity was reached maximum at 72 hour of cultivation but this enzyme activity was reduced quickly. It can be assumed that Bacillu sp. IJ-3 strain enzyme has a specificity toward the 75 globulin.
A new alkalophilic strain of Bacillus pumilus JB¬05 producing bleach-stable and halo-tolerant alkaline protease was isolated from cement industry effluents in Karnataka, India. The effects of carbon and nitrogen sources on protease production by this alkalophilic strain were observed after a 30-h incubation. A high level of alkaline protease activity was obtained in the presence of starch as the carbon and peptone as the nitrogen sources. The partially purified enzyme showed an optimum temperature and pH activity at $58^{\circ}C$ and 10.5, respectively. The enzyme was completely inhibited by PMSF (95.0%) indicating it as a serine protease. It is bleach-stable as it retained 35% original activity in the presence of 10% (v/v) hydrogen peroxide at $30^{\circ}$C after 2 h and is halo-tolerant as it retained 70% original activity in the presence of 2.5 M sodium chloride at $30^{\circ}C$ after 2 h incubation.
Bacillus stearothermophilus No. 236, an effective xylanolytic bacterium, produced an extracellular carboxymethyl cellulase when the strain was grown on xylan. The carboxymethyl cellulase was purified to homogeneity as judged by SDS-PAGE and zymogram, The carboxymethyl cellulase had a pI of 4.0, and a molecular mass of 95 kDa. The highest level of enzyme activity was observed at pH 6.5 and $60^{\circ}C$. The $K_m$, and $V_{max}$ values of the enzyme to carboxymethyl cellulose were 20.8 mg/ml and $0.63 {\mu}mole$/min/mg protein, respectively, The enzyme was found to act also on filter paper and xylan as well as carboxymethyl cellulose. Therefore, it is expected that this xylanolytic strain isolated from soil could be efficiently used for xylan biodegradation.
A new strain of Bacillus capable of growing upto pH 11 was isolated from a local pond polluted with detergents. This strain elicited unimpaired growth in media supplemented with heavy metals such as As, Cu, Cd, Hg, Ni and Zn. A MIC value of 200, 3, 1.60, 2.25, 7.50 and 3.70 mM was noticed for As, Cu, Cd, Hg, Ni and Zn respectively. Analysis of total DNA revealed the presence of a plasmid of 26 kb. This plasmid was lost by acriflavine treatment to the cultures. Such cured strains were found sensitive to heavy metals. Our findings suggest that incidence of heavy metal resistance is widely distributed and resistant strains could be isolated from heavy metal unpolluted sites.
Bacillus vallismortis EXTN-1, a biocontrol agent in cucumber, tomato and potato was tested in rice pathosystem against rice fungal pathogens viz. Magnaporthe grisea, Rhizoctonia solani and Cochliobolus miyabeanus. Apart from increasing the yield in the bacterized plants (11.6-12.6% over control), the study showed that EXTN1 is effective in bringing about disease suppression against all the tested fungal pathogens. EXTN-l treatment resulted in 52.11% reduction in rice blast, 83.02% reduction in sheath blight and 11.54% decrease in brown spot symptoms. As the strain is proven as an inducer for systemic resistance based on PR gene expression in Arabidopsis and tobacco models, it is supposed that a similar mechanism works in rice, bringing about disease suppression. The strain could be used as a potent biocontrol and growth-promoting agent in rice cropping system.
A strain producing soybean paste flavor was isolated from traditional Korean soybean paste. The isolate was identified as Bacillus subtilis PM3. The neutral fraction representing the traditional soybean paste aroma was obtained from the whole volatile components produced by B. subtilis PM3 in cooked soybean. Each separated peak from the neutral fraction of gas chromatogram was identified by gas chromatography-mass spectrometry (GC/MS) and Kovat's retention index, and the aromas of each peak were investigated by a sniffing test with the exercise panel. The twenty-nine components, including six character impact compounds and twelve components of flavors of Korean soybean paste, were confirmed. Some regions of gas chromatogram represented the soybean paste odor. It has been confirmed that traditional Korean soybean paste can be manufactured with the strain B. subtilis PM3.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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